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Automatizacion Del Hemograma

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  • Automatizacin del hemogramapor: Lisseth Samudio

  • Qu es el hemograma?Anlisis en que se miden de forma global y en porcentaje los tres tipos bsicos de clulas sanguneas:Serie eritrocitaria o serie roja Serie leucocitaria o serie blanca Serie plaquetaria

  • Hemograma CBC: Complete blood countCSC: conteo sanguneo completo.BH o BHC: biometra hemtica o biometra hemtica completa.Sangre anticoagulada de preferencia con etilendiaminotetractico.

  • EDTAAnticoagulante slido recomendado por varias razones:No produce dilucin de la sangre.Respeta la morfologa eritrocitaria y leucocitaria.Asegura la conservacin de las clulas durante 24 horas.Inhibe la agregacin de las plaquetas, facilitando el recuento de las mismas.

  • Estudio de la serie RojaSe cuantifica: Globulos rojosHemoglobina.Hematocrito.ndices hemticos (algunos calculados):VCM: volumen corpuscular medio.HCM: hemoglobina corpuscular media.CHCM: concentracin de hemoglobina corpuscular media.IDE: ndice de distribucin eritrocitaria.

  • Estudio de la Serie BlancaSe cuantifica:Cifra total de glbulos blancos.Frmula leucocitaria diferencial (neutrfilos, linfocitos, monocitos, eosinfilos y basfilos)

  • Estudio de la Serie PlaquetariaSe cuantifica:PlaquetasVPM: volmen plaquetario medioPCT: plaquetocrito.IDP: ndice de distribucin de plaquetas.

  • Recuento automatizado Historia-1949 con Wallace Coulter (desarrollo el principio de resistencia elctrica o impedancia).A principio de los 60 s los equipos suministraron las principales magnitudes.En los 70 recuento de plaquetas.1953 Parker y Horts, recuento mediante luz halgena (previa tincin)1965 katmentsky introdujo la espectrofotometra y el principio del fondo oscuro.

  • Recuento automatizado Historia-1966 cambios en ondas de radiofrecuencias.1980 citometra de flujo.

  • COMPAAS FABRICANTES DE AUTOANALIZADORESMenarini Diagnostics IT Abbott Diagnostics US Aurora Instruments Ltd Bayer Diagnostics US Beckman Coulter Inc US Biocode Hycel BE bioMerieux FR Bio-Rad Laboratories US

  • COMPAAS FABRICANTES DE AUTOANALIZADORESGrifols International ES Horiba ABX FR Olympus JP RAL Tecnicas para el Laboratorio SA ES Roche Diagnostics Corporation EURSpinreact SA ES Sysmex JP

  • Principios de medicin ms empleadosContador hematolgico que realiza el conteo por variacin de impedancia. Conteo ptico.Contador hematolgico que realiza el conteo mediante utilizacin de citometra de flujo.Contadores celulares centrfugos.

  • Equipos de hematologaSegn el tipo de ondas electromagnticas empleadas se utilizan individual o combinadas las siguientes metodologas bsicas: Impedancia (corriente directa)Dispersin lumnica.Fluorescencia (mejora la sensibilidad y precisin).

  • Automatizacin Para obtener cantidad y volumen de los componentes sanguneos los analizadores hematolgicos automatizados utilizan las variaciaciones que ejercen las clulas al atravesar campos magnticos.Las condiciones son estrictas y constantes.Los datos cuantitativos se expresan en tablas, histogramas y citogramas.

  • VARIACIN DE IMPEDANCIAEl contador de impedancia elctrica trabaja mediante la suspensin de las clulas sanguneas en un lquido electrnicamente conductor. Cada partcula es forzada a atravesar un par de electrodos produciendo un cambio en la resistencia elctrica entre los electrodos. Cada clula produce un pulso elctrico especfico que permite su clasificacin y conteo.

  • IMPEDANCIA

  • Impedancia Los impulsos generados son directamente proporcionales al tamao de la clula y el nmero de partculas que atraviesa el orificio de apertura por unidad de tiempo es proporcional a su concentracin en el medio electrolito.Para el recuento correcto necesitamos corriente directa y que las clulas sigan una trayectoria uniforme por el detector.

  • Impedancia Ejemplos de instrumentos con este principio son el Contador Coulter, los instrumentos TOA Sysmex y los instrumentos Abbot Cell-Dyn.

  • Contadores celulares centrfugos Basado en la densidad variable de los componentes celulares al ser colocados en un capilar de micro hematocrito y ser sometidos a centrifugacin. Un flotador cilndrico especficamente colocado entre la capa de eritrocitos y el plasma expande en distintas capas de los componentes leucocitarios.

  • BUFFY COATLos resultados contenidos comprenden hematocrito, hemoglobina, nmero de clulas rojas, nmero de leucocitos, granulocitos totales, neutrfilos, eosinfilos y porcentaje de reticulocitos

  • Contadores celulares centrfugosLa diferenciacin se logra mediante el uso de reactivos y colorantes (naranja de acridina, oxalato potsico y un anticuerpo monoclonal) que cubren internamente el tubo o capilar.Los componentes una vez teidos son expuestos a una fuente de luz azul violeta y la fluorescencia permite distinguir los componentes celulares.

  • Contadores lser o citometra de flujoEl principio de trabajo de estos equipos radica en la dispersin de la luz sobre una clula. Las interrupciones del lser pueden ser usadas para el conteo celular.Los cambios en la refraccin de la luz brindan informacin de tamao celular o complejidad y densidad interna.

  • Tres haces de luz blanco al pasar por un coloide de partculas de azufre en un liquido, se convierten en anaranjados, rosados y azul verdosos.Citometra de flujo

  • Citometra de flujoPara ello hacemos pasar dichas clulas, a velocidad constante de varios miles por segundo a travs de un cmara de flujo laminar sobre la que incide un haz de luz a una longitud de onda especfica Lser. Como consecuencia del impacto, se produce una dispersin de luz policromtica generada por los diferentes fluorocromos que es captada por diversos detectores de gran sensibilidad.

  • Citometra de flujoLos detectores convierten las seales en seales electrnicas que posteriormente sern digitalizadas para permitir la medida simultnea de varios parmetros en la clula. Estos parmetros son: - caractersticas intrnsecas de la clula: tamao y la complejidad de su ncleo y citoplasma. - Caractersticas antignicas de cada clula.

  • Citometra de flujoAnalizar cada seal permite conocer propiedades celulares y el comportamiento al ponerlas en contacto con diferentes sustancias o marcadores.Las seales pueden ser de dispersin (interacta la partcula con la luz y produce cambios de direccin en el espacio) o de fluorescencia (interaccin del fluorocromo con la luz y emisin de energa radiante).

  • Citometra de flujo

  • Citometra de flujoLa citometra de flujo se utiliza en muy diversas aplicaciones, que van desde inmunofenotipado, muerte celular, contaje celular, expresin de genes reporteros, etc.

  • Determinacin de la HemoglobinaFerrocianuro potsico oxida la hemoglobina a hemiglobina (metahemoglobina).Cianuro de potasio para formar el compuesto cromognico (HiCN).Se mide por espectrofotometra a una longitud de onda de 550 nm.Resultado final: valor de absorbancia x coeficiente de calibracin.

  • Reactivos empleadosEQUIPOS DE TRES PARTES:DiluyenteLisanteDetergente.EQUIPOS DE CINCO PARTES:Diluyente.Lisante.Detergente limpiador o cleaner.Reactivos con fluorocromos.

  • Presentacin de los resultados

    Tablas numricas.Histogramas.Diagrama de dispersin.

  • Limitaciones

    Mantenimiento.Muestras de sangre.Interferencias.Limitaciones del operador.

  • Gracias

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