i

AKTIVITAS IMUNOSTIMULATOR KOMBINASI EKSTRAK KAYU MANIS

(Cinnamomum Verum) DAN SAMBILOTO (Andrographis Paniculata)

TERHADAP IgG MENCIT BALB/C YANG DIINDUKSI VAKSIN

HEPATITIS B

SKRIPSI

Oleh :

Siti Saidah

145010091

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS WAHID HASYIM

SEMARANG

2018

ii

AKTIVITAS IMUNOSTIMULATOR KOMBINASI EKSTRAK KAYU MANIS

(Cinnamomum Verum) DAN SAMBILOTO (Andrographis Paniculata)

TERHADAP IgG MENCIT BALB/C YANG DIINDUKSI VAKSIN

HEPATITIS B

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat dalam mencapai derajat Sarjana

Farmasi Program StudiI lmu Farmasi pada Fakultas Farmasi

Universitas Wahid Hasyim

Semarang

Oleh:

Siti Saidah

145010091

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS WAHID HASYIM

SEMARANG

iii

iv

SURAT PERNYATAAN

Yang bertanda tangan di bawah ini saya:

Nama : Siti Saidah

NIM : 145010091

Judul Skripsi :Aktivitas Imunostimulator Kombinasi Ekstrak Kayu Manis

(Cinnamomum Verum) Dan Sambiloto (Andrographispaniculata)

Terhadap IgG Mencit Balb/C Yang Diinduksi Vaksin Hepatitis B.

Menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah diajukan untuk

memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi dan sepanjang pengetahuan

saya, juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan

orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam

daftar pustaka.

Demikian surat pernyataan ini saya buat untuk digunakan sebagaimana mestinya.

Semarang, 5 Maret 2018

Siti Saidah

v

MOTTO DAN PERSEMBAHAN

“ opportunities don’t happen. You create them. (Chris Grosser)”

Karya Ilmiah ini aku persembahkan kepada :

Ibu dan Bapakku yang tidak pernah lelah untuk

menyayangiku, terima kasih atas semua doa yang selalu

kau berikan kepadaku dalam setiap hembusan nafasmu.

Masku, Nawoto terima kasih atas semua dukungan dan

kesabaran yang telah kamu berikan kepadaku

Adik-adikku Inayah, wiwik dan fitrotul semoga kalian

selalu semangat untuk mengejar cita-cita.

Almamaterku

vi

KATA PENGANTAR

Puji syukur senantiasa penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas segala

rahmat serta hidayah-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan

penulisan skripsi yang berjudul “Aktivitas Imunostimulator Kombinasi Ekstrak

Kayu Manis (Cinnamomum Verum) Dan Sambiloto (Andrographispaniculata)

Terhadap IgG Mencit Balb/C Yang Diinduksi Vaksin Hepatitis B”. Skripsi ini

disusun untuk memenuhi salah satu syarat dalam memperoleh derajat Sarjana

Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang. Penulis

mengucapkan banyak terima kasih kepada semua pihak yang telah membantu dalam

penyusunan skripsi ini, sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik. Rasa

terima kasih juga penulis haturkan kepada :

1. Ibu Aqnes Budiarti, S.F., M.Sc., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas

Wahid Hasyim Semarang

2. Ibu Maria Ulfah, S.Farm., M.Sc., Apt selaku dosen pembimbing yang telah

memberikan bantuan, bimbingan, semangat, perhatian dan kesabarannya selama

penelitian dan penyusunan skripsi ini.

3. Bapak Drs. H. Ibrahim Arifin, M.Sc., Apt serta Ibu Ririn Lispita W, M.Si., Med.,

Apt selaku dosen penguji yang telah memberikan saran dan koreksi terhadap

skripsi ini.

4. Dosen-dosen di Fakultas Farmasi Universitas Wahid Hasyim Semarang yang

telah memberikan bekal ilmu pengetahuan sebagai dasar penulisan skripsi ini.

vii

5. Seluruh staf di Laboratorium Biologi Fakultas Farmasi Universitas Wahid

Hasyim Semarang yang telah membantu pelaksanaan penelitian ini.

6. Bapak Nur Hasan dan Ibu Alfafa terimakasih atas semua dukungan dan doanya

selama ini.

7. Sismiyati, Metalia, Maulida, Layyina Mawardah, Gita Karmila, Ummu Jauharin,

Siswanto, Asani, Andi dan Efa yang selalu ada dalam suka dan duka.

8. Keluarga Louis, Kholifah, Arif Mirza dan Lina Wahyuni terima kasih karena

sudah menjadi partner penelitian yang menyenangkan.

9. Staf Laboratorium Parasitologi Universitas Gajah Mada Yogyakarta.

10. Teman-teman Farmasi A angkatan 2014, terima kasih atas solidaritas,

kebersamaan selama kita bersama.

Semoga Allah SWT senantiasa melimpahkan berkat-Nya kepada pihak- pihak

yang telah berjasa dalam penyusunan skripsi ini. Penulis menyadari sepenuhnya

bahwa skripsi ini masih memiliki kekurangan, untuk itu segala kritik dan saran yang

membangun sangat penulis harapkan demi perbaikan di masa mendatang. Semoga

penelitian ini dapat memberikan sumbangan yang berarti bagi ilmu pengetahuan pada

umumnya dan dunia farmasi pada khususnya.

Semarang, 5 Maret 2018

Siti Saidah

viii

DAFTAR ISI

Halaman

COVER ............................................................................................................. i

HALAMAN JUDUL ......................................................................................... ii

PENGESAHAN ................................................................................................. iii

SURAT PERNYATAAN .................................................................................. iv

HALAMAN PERSEMBAHAN ....................................................................... v

KATA PENGANTAR ....................................................................................... vi

DAFTAR ISI ...................................................................................................... viii

DAFTAR GAMBAR ......................................................................................... xi

DAFTAR TABEL ............................................................................................. xii

DAFTAR LAMPIRAN ..................................................................................... xiii

INTISARI ......................................................................................................... xiv

ABSTRACT ........................................................................................................ xv

BAB I. PENDAHULUAN ................................................................................ 1

A. Latar Belakang Masalah .................................................................. 1

B. Rumusan Masalah............................................................................ 4

C. Tujuan Penelitian ............................................................................. 4

D. Manfaat Penelitian ........................................................................... 5

E. Tinjauan Pustaka.............................................................................. 5

1. Sistem Imun ............................................................................... 5

2. Kekebalan Imun Humoral ......................................................... 9

ix

3. Imunoglobulin G ....................................................................... 10

4. Imunomodulator ........................................................................ 11

5. Kayu Manis................................................................................ 12

6. Sambiloto ................................................................................... 14

7. Ekstraksi .................................................................................... 16

8. Vaksin Hepatitis B .................................................................... 17

9. ELISA (Enzym Linked Immunosorbent Assay) ......................... 18

10. Levamisol .................................................................................. 19

F. Landasan Teori ............................................................................... 19

G. Hipotesis ......................................................................................... 20

BAB II. METODE PENELITIAN ................................................................... 21

A. Jenis dan Variabel Penelitian ......................................................... 21

B. Bahan Penelitian............................................................................. 21

C. Alat Penelitian ................................................................................ 22

D. Jalannya penelitian ......................................................................... 22

1. Determinasi Tanaman ................................................................ 22

2. Pengumpulan Bahan dan Pembuatan Serbuk Simplisia ............ 22

3. Pembuatan Ekstrak Etanol Sambiloto dan Kayu Manis ............ 23

4. Kriteria Inklusi dan Eksklusi ..................................................... 24

5. Perizinan Ethical Clearence ...................................................... 24

6. Pengelompokkan Hewan Uji ..................................................... 24

7. Perlakuan Hewan Uji ................................................................. 25

x

8. Penetapan Kadar IgG Dengan ELISA Tidak Langsung ............ 27

E. Analsis Data .................................................................................. 38

F. Skema Jalannya Penelitian ........................................................... 29

BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN ......................................................... 30

A. Determinasi Tanaman ................................................................... 30

B. Pembuatan Ekstrak Sambiloto dan Kayu Manis .......................... 30

C. Penenuntuan Aktivitas Imunomodulaor ....................................... 33

BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN......................................................... 44

A. Kesimpulan ................................................................................... 44

B. Saran ............................................................................................. 44

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................ 45

LAMPIRAN ....................................................................................................... 51

xi

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 1. Grafik Produksi Antibodi IgG ..................................................... 10

Gambar 2. Kayu Manis .................................................................................... 13

Gambar 3. Sambiloto ........................................................................................ 15

Gambar 4. Serbuk Kayu Manis ....................................................................... 31

Gambar 5. Serbuk Sambiloto .......................................................................... 31

Gambar 6. Reaksi TMB Dan Peroksidase Pada Metode ELISA ................. 34

Gambar 7. Histogram IgG hari ke-14 ............................................................. 36

Gambar 8. Histogram IgG hari ke-28 ............................................................. 41

xii

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 1. Hasil Data Uji LSD Pada Hari ke-14 ............................................... 36

Tabel 2. Data OD IgG Hari Ke-14 ................................................................... 60

Tabel 3. Data OD IgG Hari Ke-28 ................................................................... 67

xiii

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Determinasi Tanaman Sambiloto dan Kayu Manis ................ 51

Lampiran 2. Jalannya Penelitian ..................................................................... 54

Lampiran 3. Data Perhitungan Preparasi Sampel Uji .................................. 57

Lampiran 4. Nilai OD IgG ............................................................................... 59

Lampiran 5. Nilai OD IgG hari ke-14 ............................................................. 60

Lampiran 6. Analisis Statistika Data OD IgG Hari Ke-14 ........................... 61

Lampiran 7. Nilai OD IgG Hari Ke-28 ........................................................... 67

Lampiran 8. Analisis Statistika Data OD IgG Hari ke-28 ............................ 68

Lampiran 9. Ethical Clearence ......................................................................... 70

xiv

INTISARI

Daun Sambiloto dan Kayu Manis mengandung banyak komponen kimia yang

dapat digunakan sebagai agen imunostimulan. Penelitian ini bertujuan untuk

mengkaji efek imunostimulan dari kombinasi ekstrak etanol Sambiloto dan Kayu

Manis dengan melihat ekspresi sistem imun humoral (IgG) pada mencit Balb/C yang

telah di induksi vaksin Hepatitis B.

Ekstraksi kedua bahan menggunakan etanol 96% dengan cara soxhletasi

kemudian dikentalkan dengan rotary evaporator. Perlakuan pada hewan uji dilakukan

dengan pemberian oral pada masing-masing ekstrak 150 mg/kgBB dan kombinasi

ekstrak Sambiloto dan Kayu Manis 1:1, 1:2, dan 2:1. Pengamatan sistem imun

Humoral IgG dengan menggunakan metode ELISA tidak langsung.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa pemberian kombinasi ekstrak Sambiloto

dan Kayu Manis dapat meningkatkan sistem imun humoral (IgG) tertinggi yaitu pada

pemberian dengan dosis ES:EKM 2:1 (300mg/KgBB:150mg/KgBB) baik pada serum

hari ke-14 dan serum pada hari ke-28. Dimana pada uji imunostimulan pada hari ke-

14 terdapat perbedaan bermakna antara pemberian ES:EKM 2:1, Sambiloto tunggal

terdapat perbedaan bermakna dengan kontrol negatif dan kontrol normal.

Kata kunci : Sambiloto, Kayu Manis, Imunostimulan, IgG, ELISA tidak

langsung

xv

ABSTRACT

Andrographis and cinnamon contains a lot of chemical components that can

be used as agent imunostimulan. this study aims to assess the effects imunostimulan

of combination extract ethanol Andrographis herbs and Cinnamon by looking at the

expression of the immune system humoral (IgG) in mice Balb / C that has been in the

induction of vaccine Hepatitis B.

Extraction materials using ethanol 96% by Soxhletasi then in thicken with

Rotary Evaporator. treatment of animals test done with oral administration on each

extract 150mg/kgbb and combination extract Andrographis herbs and Cinna

mon 1: 1, 1: 2, and 2:1.

Observation of the immune system humoral IgG by using the method Elisa

indirectly.the results showed that the provision of a combination of extract

Andrographis herbs and Cinnamon can increase the immune system humoral (IgG)

highest that is in the provision of doses of ES:EKM 2: 1 (300mg / kgbb: 150mg /

kgbb) good on serum the 14th and serum day to 28. where in the test imunostimulan

day 14th there are significant difference between the provision of ES:EKM 2: 1, bitter

single there are significant difference with negative control and control normal.

Keywords : Andrographis herbs and Cinnamon, Imunostimulan, IgG, ELISA

Indirect.