Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i

Embed Size (px)

Citation preview

  • 8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i

    1/18

    BIO 30271 PTA

    PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI 2011/2012

    Dra. SITARESMI, M.Sc. FMIPA UI

    Drs. IMAN SANTOSO, M.Ph!.

    LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI

    AKTI"ITAS BIOKIMIA DARI MIKROORGANISME I

    NAMA # MU$AMAD K$AERULLO$

    NPM # 0%0&&32%'3

    KELOMPOK # III (TIGA) B

    TANGGAL PRAKTIKUM # 30 NO"EMBER 2011

    ASISTEN # FAT$IA NO"A

    SA"ITR* PANDU +IA*A

    UNI"ERSITAS INDONESIA

    FAKULTAS ,MATEMATIKA DAN ILMU PENGETA$UAN ALAM

    DEPARTEMEN BIOLOGI

    DEPOK

    2011

  • 8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i

    2/18

    1

    AKTI"ITAS BIOKIMIA DARI MIKROORGANISME I

    I. TUUAN

    1. Mengetahui dan memahami perbedaan aktivitas biokimi antar

    mikroorganisme.

    2. Mempelajari hubungan aktivitas mikroorganisme dengan enzim.

    3. Mengetahui dan memahami mikroorganisme melalui sifat biokimi.

    II. TEORI

    Mikroorganisme, seperti juga mahluk hidup lainnya, memerlukan energi

    untuk kelangsungan hidupnya. Energi tersebut dapat diperoleh dari lingkungan

    sekitarnya dalam bentuk senyawa kimia tertentu yang dapat diurai. emampuan

    mikroorganisme untuk mengurai senyawa tertentu dan mensintesis senyawa yang

    baru merupakan sifat khas masing!masing mikroorganisme. "emua aktivitas

    metabolisme tersebut berlangsung dengan bantuan enzim tertentu. #asil reaksi

    metabolisme tersebut hampir semuanya dapat diamati, bahkan dapat diukur

    kekuatannya. $eaksi!reaksi metabolisme tersebut berbeda untuk setiap

    mikroorganisme, sehingga hal tersebut merupakan sifat yang sangat penting untuk

    mengidentifikasi mikroorganisme %&andjar dkk. 1''2( )'*.

    eseluruhan dari rekasi kimia dalam mikroorganisme didefinisikan sebagai

    metabolisme selular, dan transformasi biokimia yang terjadi di dalam dan luar sel

    dipengaruhi oleh katalis biologikal yang disebut enzim %+appuino - "herman

    1''( 131*. Enzim merupakan unit fungsional dari metabolisme sel. erja enzim

    menurut aturan tertentu yang teratur. Enzim mengkatalisis reaksi penyimpanan

    dan mengubah energi kimia. "pesifikasi enzim amat tinggi terhadap substrat dan

    enzim memperepat reaksi kimia spesifik tanpa pembentukan produk sampingan %

    /ehninger 1''0( 230*.

    Enzim ekstraseluler atau eksoenzim adalah enzim yang dihasilkan oleh

    bakteri dan disekresikan ke lingkungan %enzim yang aktivitasnya di luar sel*.

    "ebagian besar substansi dengan berat molekul yang besar tidak dapat melewati

  • 8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i

    3/18

    2

    membran sel. leh karena itu, substansi seperti polisakarida substansi seperti

    polisakarida, lipid dan protein harus didegradasi terlebih dahulu menjadi bahan

    dengan berat molekul yang rendah sebelum ditransportasikan ke dalam sel,

    Eksoenzim terutama enzim hidrolitik dapat mereduksi bahan dengan molekul

    tinggi ke dalam blok!blok pembangunnya dengan penambahan air pada molekul.

    Eksoenzim sangat berguna untuk hidrolisis pati, hidrolisis lipid, hidrolisis kasein

    dan hidrolisis gelatin %+appuino - "herman 1''( 132*.

    Endoenzim berfungsi di dalam sel dan berperan dalam sintesis

    protoplasma baru yang diperlukan dan produksi energi selular dari asimilasi

    bahan. emampuan sel untuk bekerja pada substrat bernutrisi menembus

    membran sel mengindikasikan adanya eksoenzim yang dapat merubah substrat

    yang spesifik seara kimiawi menjadi bahan yang penting. erubahan tersebut

    diperlukan untuk ketahanan dan fungsi sel, dan merupakan dasar dari metabolisme

    selular. Endoenzim berperan dalam fermentasi karbohidrat, reaksi litmus susu,

    produksi #2", reduksi nitrat, reaksi katalase, tes urease, tes oksidase, tes M4+

    dan tes triple sugar-iron%+appuino - "herman 1''( 132*.

    A. $-r!ss P!saar-a

    olisakarida adalah karbohidrat yang memilki berat molekul tinggi,

    polimer panjang yang terdiri dari ratusan atau ribuan unit monomer gula, yang

    satu dengan lainnya digabungkan dengan ikatan glikosida. &lukosa adalah

    monosakarida yang paling banyak digunakan untuk pembentukan polisakarida

    yaitu pada komponen pati dan selulosa %5rok - Madigan 1''6( )7*.

    arbohidrase mengkatalis hidrolisis karbohidrat untuk membentuk gula

    yang lebih sederhana dan lebih dapat larut. #idrolisa dari pati pada mulanya akanmenghasilkan polimer rantai pendek yang disebut dekstrin, kemudian disakarida

    maltosa dan terakhir menghasilkan glukosa. Enzim yang paling berguna dalam

    sakarifikasi pati adalah !amilase, !amilase, glukoamilase, glukosa isomerase,

    pululanase dan isomilase. !amilase adalah enzim ekstraselular yang

    menghidrolisis ikatan !1,) glikosida. $eaksi hidrolisis pada pati adalah sebagai

    berikut(

    !amilase 8 pati 9 dekstrin 8 !maltosa

  • 8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i

    4/18

    3

    !amilase 8 pati 9 maltosa

    %"alle 1'6( 267*.

    B. $-r!ss Pr

    rotein merupakan makromolekul yang paling berlimpah di dalam sel dan

    menyusun lebih dari setengah berat kering pada hampir semua organisme. rotein

    terdiri dari rantai polipeptida panjang, yang disusun oleh 1::!!1::: unit asam

    amino yang disatukan oleh ikatan peptida. rotein sederhana hanya menghasilkan

    asam amino dengan hidrolisis; protein konyugasi mengandung beberapa

    komponen tambahan lain, suatu ion logam atau gugus prostetik organik.

    5eberapa protein berbentuk serabut dan bersifat tidak larut, yang lain berbentuk

    globular dengan rantai peptida yang berlipat!lipat %/ehninger 1''0( 1:*.

    #idrolisis protein didefinisikan sebagai suatu aksi proteinase pada protein,

    yang menghasilkan kerusakan molekul ke dalam fraksi yang tersebar. roteinase

    atau protease menghidrolisis protein menjadi asam amino dan peptida. roteinase

    memiliki kemampuan untuk memisahkan ikatan #= dengan

    penambahan air, dan menghasilkan pengeluaran karboksil bebas %!+#* dan

    kelompok amino bebas %!>#2*. roteinase adalah enzim ekstraselular. ?ungsinya

    adalah mengubah protein yang padat menjadi peptida yang tersebar dan dipeptida

    yang dapat memasuki sel mikroorganisme. roteinase menyerang protein dan

    peptida dengan berbagai maam kondisi %"alle 1'6( 303*.

    asein, protein susu yang paling banyak, adalah suatu makromolekul yang

    tersusun atas subunit asam amino yang saling berikatan dan dihubungkan oleh

    ikatan peptida, +=>#. asein pada peptonisasi susu dihidrolisisis oleh enzim

    renin menjadi parakasein dan pepton!pepton terlarut. eptonisasi adalah

    perubahan dari bentuk tidak larut menjadi bentuk larut pada bermaam!maam

    protein, dan menunjukkan adanya pemeahan protein menjadi pepton %@utono dkk.

    1'63( 12:*.

    . Fr4as Kar5h-ra

    rganisme menggunakan karbohidrat seara berbeda, tergantung dari

    enzim yang dimilikinya. 5eberapa organisme dapat menfermentasikan gula

  • 8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i

    5/18

    )

    seperti glukosa seara anaerob, dan mikroorganisme lainnya menggunakannya

    pada jalur aerob %+appuino - "herman 1''( 1)'*.

    ?ermentasi dapat didefinisikan sebagai oksidasi tidak lengkap yang

    dihasilkan oleh mikroorganisme dalam suatu senyawa yang kebanyakan

    merupakan karbohidrat. ?ermentasi dapat dibagi dalam dua tahap(

    1. emisahan rantai glukosa menjadi asam piruvat dengan menghilangkan

    pasangan atom hidrogen.

    2. $eduksi asam piruvat atau turunnya oleh atom hidrogen dari tahap pertama.

    %"alle 1'6( 3*.

    "ubstrat seperti karbohidrat dan alkohol pada proses fermentasi akan

    melakukan disimilasi anaerob dan menghasilkan asam organik, ontohnya( asam

    laktat, asam format atau asam asetat, dengan disertai gas seperti hidrogen atau

    karbondioksida. Anaerob fakultatif biasanya dinamakan fermenter pada

    karbohidrat. ?ermentasi dapat digambarkan dengan degradasi glukosa dengan

    menggunakan ara Embden!Meyerhof, yang juga dikenal dengan jalur glikolitik

    %+appuino - "herman 1''( 1)'*.

    Beteksi fermentasi karbohidrat selalu melalui reaksi asam yang dapat

    ditunjukkan dengan indikator yang dimasukkan dalam medium. roduksi gas

    dapat ditunjukkan dengan menggunakan tabung yang diletakkan dalam posisi

    terbalik dalam medium %"alle 1'6( 37)*.

    D. Pr-6s $2S

    #2" diproduksi oleh beberapa jenis bakteri melalui pemeahan asam

    amino yang mengandung unsur belerang %"* seperti sistein dan metionin. #2"

    dapat juga diproduksi melalui reduksi senyawa!senyawa belerang anorganik,misalnya( tiosulfat, sulfit, atau sulfat. #2" yang terjadi dapat diamati dengan

    menambahkan garam!garam logam berat ke dalam medium. #2" akan bereaksi

    dengan senyawa!senyawa tersebut membentuk logam sulfida berwarna hitam

    %&andjar dkk.1''2( 01*.

    roduksi #2" oleh beberapa mikroorganisme dapat terjadi melalui dua

    jalur, yaitu(

  • 8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i

    6/18

    0

    1. &as #2" diproduksi dengan reduksi %hidrogenasi* sulfur organik yang terdapat

    pada asam amino sistein, yang terdapat komponen!komponen pepton di dalam

    medium. epton tersebut didegradasi oleh enzim mikroba terhadap asam

    amino, termasuk asam amino sistein yang mengandung belerang. Asam

    amino yang didalamnya terdapat sistein desulfurase akan kehilangan atom

    sulfur, dan kemudian direduksi dengan penambahan hidrogen dari air dan

    membentuk gas hidrogen sulfida.

    2. &as #2" juga dapat diproduksi dengan reduksi senyawa sulfur anorganik

    seperti tiosulfat %"23C*, sulfat %")

    C* dan sulfit %"3C*. Medium berisi sodium

    tiosulfat dan beberapa mikroorganisme dapat mereduksi sulfit dengan

    pelepasan hidrogen sulfida. Atom sulfur bertindak sebagai aseptor hidrogen

    selama oksidasi bahan anorganik seperti reaksi berikut(

    3"23C 8 )#8e thiosulfat reduktase 2"3

    !8 2#2"

    Diosulfat "ulfit gas #2"

    %+appuino - "herman 1''( 1'*.

    E. Pcara G!a

    &elatin merupakan suatu jenis protein yang tidak mengandung triptofan

    dan hanya sedikit mengandung asam!asam amino penting lain. enairan gelatin

    oleh mikroorganisme dapat terjadi dengan adanya enzim gelatinase yang bersifat

    proteolitik %&andjar dkk.1''2( 02*.

    alaupun nilai gelatin sebagai sumber nutrisi masih dipertanyakan, gelatin

    sangat berguna di dalam mengidentifikasi spesies bakteri. &elatin adalah suatu

    protein yang diproduksi dari hidrolisis kolagen, komponen utama dalam jaringan

    penghubung dan otot manusia dan hewan lainnya. ada temperatur di bawah20+, gelatin bersifat padat dan membentuk gel, sedangkan pada temperatur di

    atas 20+, gelatin bersifat air %+appuino - "herman 1''( 1)0*.

    enairan gelatin oleh bakteri dilakukan oleh enzim proteolitik yang

    dikenal sebagai gelatinase. Adanya gelatinase dapat dilihat dengan memasukkan

    kultur ke dalam lemari pendingin. Apabila gelatin tetap air, menunjukkan bahwa

    mikroorganisme tersebut mensekresi gelatinase ke dalam medium %"alle 1'6(

    30)*.

  • 8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i

    7/18

    F. U Kaa!as

    etika melakukan respirasi aerob, mikroorganisme menghasilkan hidrogen

    peroksida dan beberapa superoksida toksik. Akumulasi substansi itu dapat

    menimbulkan kematian pada organisme jika substansi itu tidak didegradasi seara

    enzimatis. "ubstansi tersebut diproduksi ketika organisme aerob, anaerob

    fakultatif dan mikroaerofil menggunakan jalur respirastori aerob, yang

    membutuhkan oksigen bebas sebagai aseptor elektron terakhir, selama degradasi

    karbohidrat untuk menghasilkan energi. rganisme yang dapat memproduksi

    katalase atau peroksidase dapat mendegradasi hidrogen peroksida seara epat,

    reaksinya sebagai berikut(

    2 #22katalase 2 #2 8 2

    eroksidase

    #idrogen peroksida Air ksigen bebas

    %+appuino - "herman 1''( 176*.

    "uperoksida dismutase adalah enzim yang bertanggung jawab untuk

    degradasi superoksida toksik pada organisme aerob katalase negatif.

    etidakmampuan mikroorganisme untuk mensintesis katalase, peroksidase atau

    superoksida dismutase dapat menjelaskan bahwa oksigen beraun untuk

    mikroorganisme tersebut. leh karena enzim tidak ada, konsentrasi #22yang

    bersifat toksik tidak dapat didegradasi ketika organisme itu ditumbuhkan pada

    kondisi yang ada oksigennya. roduksi katalase dapat ditentukan dengan

    penambahan substrat #22pada kultur trypticase soy agar. @ika terdapat katalase,

    reaksi kimia yang terjadi diindikasikan dengan adanya gelembung gas oksigen

    bebas %+appuino - "herman 1''( 176*.

    G. U Os-as

    Enzim oksidase memiliki peranan yang penting dalam proses sistem

    transport elektron selama respirasi aerob. "itokrom oksidase mengkatalis oksidasi

    sitokrom oleh molekul oksigen %2*, sebagai hasil dari pembentukan #2 atau

    #22. 5akteri aerob, juga anaerob fakultatif dan mikroaerofil terlibat dalam

    aktivitas oksidasi. Des oksidasi berguna di dalam diferensiasi pada kelompok

  • 8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i

    8/18

    6

    NeisseriadanPseudomonas, yang bersifat oksidasi positif dan Enterobateriaeae

    yang bersifat oksidasi negatif %+appuino - "herman 1''( 1'1*.

    emampuan bakteri untuk menghasilkan sitokrom oksidase dapat

    ditentukan dengan penambahan reagen tetrametil-p-penilendiamin dihidroklorida

    pada koloni yang ditambahkan pada awan petri. $eagen warna merah muda

    tersebut bertindak sebagai substrat buatan, yang memberikan elektron dan

    teroksidasi menjadi senyawa berwarna hitam dengan keberadaan oksidase dan

    oksigen bebas %+appuino - "herman 1''( 1'1*.

    III. $ASIL PENGAMATAN

    Dabel pengamatan dapat dilihat di lampiran.

    I". PEMBA$ASAN

    A. $-r!ss P!saar-a

    erobaan hidrolisis polisakarida menggunakan mediumstarch agaruntuk

    mengamati aktivitas enzim amilase. Medium tersebut tersusun atas nutrien agar

    yang diberi suplemen pati, yang bekerja sebagai substrat polisakarida. 5akteri

    yang diinokulasikan pada perobaan adalahEscherichia colidanBacillus subtilis.

    Fji amilase dilakukan dengan meneteskan larutan iodin ke dalam medium

    yang berisistarch agar. Fji tersebut bertujuan untuk membedakan bakteri yang

    memberikan reaksi positif terhadap hidrolisis polisakarida. $eaksi positif

    tersebut ditandai dengan terbentuknya zona bening disekitar biakan. #al tersebut

    disebabkan pati pada medium dapat dihidrolisis oleh bakteri yang menghasilkan

    enzim amilase %+appuino - "herman 1''( 13)*. enguraian polisakarida oleh

    enzim amilase akan menghasilkan produk akhir monosakarida, yaitu glukosa.

    &lukosa merupakan monomer yang mudah diserap dan dapat melewati dinding

    sel %elzar dkk.1'07( 1:2*.

    #asil pengamatan setelah 2) jam menunjukkan bahwa hanyaB.subtilis

    yang dapat mendegradasi pati. >amun, pada pengamatan )7 jam menunjukkan

    bahwa baik biakanE. coli maupun biakanB. subtilisdapat mendegradasi pati.

    #al tersebut dapat dibuktikan dengan terbentuknya zona bening di sekitar biakan.

  • 8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i

    9/18

    7

    Derbentuknya zona bening di sekitar kedua biakan disebabkan karena kedua

    bakteri tersebut menghasilkan enzim amilase yang dapat menghidrolisis

    polisakarida. >amun, Gona bening yang terbentuk di sekitarE. colitidak selebar

    zona beninya di sekitarB. Subtilis. #al tersebut mengindikasikan bahwa enzim

    pemisah polisakarida pada biakanE. oli lebih sedikit sehingga hanya sedikit pati

    yang terhidrolisis olehE. oli. "ementara pada biakanBacillus subtilispati

    sudah terhidrolisis lebih banyak, sehingga zona beningnya akan berwarna

    keoklatan dan menunjukkan hasil yang positif .

    B. $-r!ss Pr

    erobaan hidrolisis protein bertujuan untuk mengamati aktivitas enzim

    protease yang dihasilkan oleh mikroorganisme. 5akteri yang digunakan pada

    perobaan tersebut adalah E. colidanB. subtilis yang berumur )7 jam.

    erobaan tersebut menggunakan medium Skim Milk Agar yang mengandung

    mengandung protein.

    "etelah diinokulasi dan diinkubasi, mikroorganisme yang mensekresi

    protease akan menampakan zona proteolisis yaitu zona bening di sekitar

    pertumbuhan mikroorganisme tersebut. #al itu merupakan hasil dari reaksi

    hidrolitik yang menghasilkan asam amino terlarut dan menggambarkan suatu

    reaksi yang positif %+appuino - "herman 1''( 1)1*.

    #asil pengamatan setelah )7 jam, terlihat adanya zona bening pada

    medium yang ditumbuhi oleh kedua biakan, tetapi pada medium yang ditumbuhi

    Escherichia coliterdapat zona bening yang lebih luas dan epat. Adanya zona

    bening di sekitar biakanmenunjukkan bahwa mikroorganisme tersebut memiliki

    enzim protease yang dapat menghidrolisis protein %"alle 1'6( 3:6*.

    . Fr4as Kar5h-ra

    erobaan fermentasi karbohidrat bertujuan kemampuan mikroorganisme

    untuk mendegradasi dan menfermentasi karbohidrat. 5akteri yang diuji pada

    perobaan tersebut adalahE.coli,Alcaligenessp., danB.subtilis. erobaan

  • 8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i

    10/18

    '

    tersebut menggunakan mediumNutrien Brothdan mengandung berbagai jenis

    gula yaitu Glukose Phenol Red,actose Phenol Red, Sucrose Phenol Red.

    erobaan fermentasi karbohidrat menggunakan tabung Burham yang

    diletakkan di dalam tabung reaksi. Dabung Burham adalah suatu tabung keil

    untuk mendeteksi produksi gas. erobaan tersebut juga menggunakanphenol

    red sebagai indikator, yang akan berwarna merah pada p# netral %6* dan berubah

    warnanya pada p# asam %,7* %+appuino - "herman 1''( 1)'*.

    #asil pengamatan pada medium yang berisi biakanE.coli! B.subtilis! dan

    Alcaligenessp. menunjukkan adanya perubahan warna indikator dari merah

    menjadi kuning dan tidak terlihat adanya gelembung udara yang banyak pada

    tabung Burham, baik pada medium glukosa, laktosa dan sukrosa. #al tersebut

    menunjukkan bahwa ketiga biakan tersebutdapat memfermentasi karbohidrat

    dengan dihasilkannya asam walaupun tidak menghasilkan gas.

    #asil pengamatan yang diperoleh sesuai dengan teori yang menyatakan

    bahwa setelah diinkubasi, karbohidrat yang telah difermentasi akan memproduksi

    buangan yang bersifat asam yang dapat menyebabkan perubahan warna merah

    padaphenolredmenjadi kuning, sehingga mengindikasikan reaksi yang positif.

    produksi asam seringkali disertai dengan pengeluran gas %+2* yang dapat terlihat

    sebagai gelembung pada tabung Burham. ultur biakan yang tidak dapat

    memfermentasi karbohidrat tidak menampakkan perubahan warna pada indikator

    dan tidak terjadi gelembung. #al itu merupakan reaksi negatif %+appuino -

    "herman 1''( 101*.

    D. Pr-6s $2S

    Fji produksi #2" bertujuan untuk mengetahui kemampuan

    mikroorganisme dalam memproduksi #2" melalui pemeahan asam amino yang

    mengandung unsur belerang %"* seperti sistein dan metionin %&andjar 1''2( 01*.

    5iakan yang digunakan adalah solat BD2dan solat ?D1 yang ditanam dalam

    medium"riple Sugar #ron Agar%D"A*. Medium D"A mengandung senyawa!

    senyawa yang terdiri dari pepton kasein dan daging, meat e$tract! yeast e$tract!

    >a+l, laktosa, sukrosa, B%8*glukosa, Amonium besi %* sitrat >a2"o3, ?enol red,

    agar dan aHuades %&andjar dkk.1''2( 71*. #asil engamatan 2), )7, dan 12: jam

  • 8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i

    11/18

    1:

    menunjukkan pada kedua biakanterdapat warna hitam disepanjang daerah

    inokulasi pada medium. #al tersebut membuktikan bahwa solat BD2dan solat

    ?D1memproduksi #2". #asil pengamatan yang diperoleh sesuai dengan teori

    yang menyatakan bahwa bakteri yang mampu memproduksi #2" yang ditandai

    dengan terbentuknya warna hitam pada medium %+owan - "teel 1'6)( 67*.

    #2" yang dihasilkan dapat diamati karena adanya reaksi antara #2" dengan

    ferros ammonium sulfat yang terdapat pada medium membentuk ferrosulfida yang

    berwarna hitam %+appuino - "herman 1''( 106*. $eaksi yang terjadi(

    ?e")9 ?e288 ")

    2!

    ?e 288 #2" 9 ?e" 8 #2")

    Enzim sistein desulfurase adalah enzim yang dimiliki oleh solat BD2dan

    solat ?D1 yang berfungsi membantu mereduksi asam amino yang mengandung

    unsur " %"alle 1'6( 3)*.

    E. Pcara G!a

    erobaan perairan gelatin mengunakan bakteriE. coli danB. subtilis

    yang diinokulasikan pada medium gelatin yang ditempatkan pada lemari

    pendingin. &elatin pada suhu rendah akan membeku. @ika dihidrolisis dengan

    gelatinase, medium tersebut akan kehilangan sifat solidifikasi. "emakin air,

    aktivitas proteolitik akan semakin tinggi. enairan gelatin dilakukan oleh enzim

    proteolitik yang dikenal sebagai gelatinase. Adanya enzim tersebut dapat dilihat

    dengan menginokulasi tabung berisi medium gelatin dengan mikroorganisme

    yang diamati dan diinkubasi. Medium diletakkan pada lemari pendingin. Apabila

    gelatin tetap menair menunjukkan bahwa organisme yang ada mensekresi

    gelatinase ke dalam medium %"alle 1'6( )21*.

    5erdasarkan hasil pengamatanB. subtilismemiliki enzim gelatinase yang

    dapat menghidrolisis gelatin. #al tersebut terlihat dari gelatin yang menair

    setelah diinkubasi selama 2) jam, sedangkan penairan gelatin tidak terlihat pada

    medium yang ditumbuhi olehE. coli. B. subtilisdapat menghidrolisis gelatin

    dengan bantuan enzim gelatinase, sedangkanE. colitidak dapat menghidrolisis

    gelatin karena tidak mempunyai enzim gelatinase. #al tersebut sesuai dengan

  • 8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i

    12/18

    11

    teori yang menyatakan bahwaE. colimemberikan hasil negatif pada penairan

    gelatin %+lifton 1'07( 1)*.

    F. U Kaa!as

    Fji katalase dapat dilihat dengan menetesi hidrogen peroksida %#22* pada

    biakan mikroorganisme yang diletakkan pada kaa objek. Mikroorganisme yang

    digunakan adalahBacillus subtilisdanEscherichia coli. @ika terdapat enzim

    katalase, reaksi kimia yang terjadi diindikasikan dengan terbentuknya gelembung

    gas oksigen bebas %2*.

    #asil pengamatan menunjukkan bahwa kedua bakteri yang digunakan

    menunjukkan adanya reaksi yang positif terhadap uji katalase. B.subtilis!danE.

    coli memperlihatkan adanya gelembung 2ketika ditetesi oleh #22, namun

    waktu yang dibutuhkan sampai terlihat adanya gelembung gas pada setiap bakteri

    adalah berbeda!beda. B. Subtilis memerlukan waktu sekitar 1' detik, sedangkan

    E. coli membutuhkan waktu sekitar ' detik. emampuan kedua biakan tersebut

    menghasilkan enzim katalase yang dapat memeah hidrogen peroksida menjadi

    air dan oksigen sesuai dengan literatur yang menyebutkan bahwa kedua bakteri

    tersebut memberikan uji terhadap uji katalase %#olt dkk. 1'')( 16'*.

    G. U Os-as

    #asil pengamatan pada biakan solat BD2 dan solat ?D1 menunjukkan

    pertumbuhan yang ukup baik pada tabung yang berisi mediumNutrient Broth.

    #al tersebut terlihat karena adanya perubahan warna medium dari kuning menjadi

    biru. #asil pengamatan tersebut mengindikasikan bahwa solat BD2 dan solat?D1dapat mengunakan karbohidrat dengan ara oksidasi %aerob*. #al tersebut

    sesuai dengan literatur yang menyatakan bahwa bakteri tersebut merupakan

    mikroorganisme yang bersifat aerob obligat, yang membutuhkan oksigen dalam

    proses respirasinya %#olt dkk. 1'')( 032*

    ". KESIMPULAN

  • 8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i

    13/18

    12

    1. "etiap mikroorganisme memiliki kemampuan aktivitas biokimia yang

    berbeda!beda untuk mendapatkan energi dan nutrisi.

    2. Mikroorganisme sangat membutuhkan enzim dalam melakukan

    metabolismenya, enzim yang digunakan antara lain katalase, gelatinase,

    amylase, proitenase, dan lain!lain.

    3. "etiap mikroorganisme mempunyai sifat biokimia yang identik.

    "I. DAFTAR AUAN

    5rok, D. B. - M.D. Madigan. 1''6. Biology o% Microorganisms. Ed. e!7.

    rentie!#all, n., >ew @ersey( Ii 8 '7 hlm.

    +appuino, @.&. - >. "herman. 1''.Microbiology&Alaboratorymanual.

    ddison!esley ublishing, $eading( Iiii 8 ) him.

    +lifton, +. E. 1'07. #ntroduction to the bacteria. Ed. ke!2. M&raw #ill 5ook

    +ompany, n., >ew Jork( Iiv 8 007 hlm.

    +owan, ". D. %rev*. 1'6). 'o(an and Steel)s manual %or the identi%ication o%

    medical bacteria. Ed. ke!2. +ambrigde Fniversity ress, /ondon( Iii 8 237

    hlm.

    &andjar, l., l. $. oentjoro, . Mangunwardoyo,- /. "oebagya. 1''2.Pedoman

    praktikummikrobiologidasar.@urusan 5iologi ?MA Fl, Bepok( vii 8 76

    hlm.

    #olt, @. &., >. $. neg, . #. A. "neath, @. D. "taley, - ". D. illiams. 1'').

    Bergey)s manual o% determinati*e bacteriology. Ed. e!'. illiams -

    ilkins, 5altimore( Iviii 8 676 hlm.

  • 8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i

    14/18

    13

    @utono, @., ". "oedarsono, ". #artadi, ". abirun, "uhadi, - "usanto. 1'63.

    Pedoman praktikum mikrobiologi umum. Bepartemen Mikrobiologi

    ?akulas ertanian F&M, Jogyakarta( Iii 8 232 hlm.

    /ehninger, A. /. 1''0. +asar-dasar biokimia. Derj. dariPrinciples o%

    biochemistry, oleh Dhenawidjaja, M. enerbit Erlangga, @akarta( Iv 8

    3' hlm.

    elzar, M.@., $. $eid - E.+.". +han. 1'07.Microbiology. )th ed. M&raw!#ill

    5ook +ompany, >ew york( vii 8 '02 hlm.

    "alle, A. @. 1'6. ,undamental principles o% bacteriology. Ed. e!0. M&raw

    #ill 5ook +ompany, n., >ew Jork( viii 8 712 hlm.

    LAMPIRAN

    Dabel 1. #asil pengamatan hidrolisis polisakarida

  • 8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i

    15/18

    1)

    Dabel 2. #asil pengamatan hidrolisis protein

    Dabel 3. #asil pengamatan fermentasi karbohidrat

    Dabel ). #asil pengamatan produksi #2"

    Dabel 0. #asil pengamatan penairan gelatin

  • 8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i

    16/18

    10

    Dabel . #asil pengamatan uji katalase

    Dabel 6. #asil pengamatan oksidase

  • 8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i

    17/18

    1

    &amabar 1.

    engamatan ?ermentasi

    arbohidrat

    K"umber( Bokumentasi pribadiL

    &ambar 2. engamatan roduksi #2"

    K"umber( Bokumntasi pribadiL

  • 8/10/2019 Aktivitas Biokimia Dari Mikroorganisme i

    18/18

    16

    &ambar 3. engamatan #idrolisis olisakarida

    K"umber( Bokumentasi pribadiL

    &ambar ). engamatan enairan &elatin

    K"umber( Bokumentasi pribadiL

    &ambar 0. /arutan Alpha neftol - ksalat

    K"umber( Bokumentasi pribadiL