Created by XMLmind XSL-FO Converter.

A vrusok osztlyozsa

dr. Horvth, Jzsef

Created by XMLmind XSL-FO Converter.

Nvnyvrusok s virolgiai vizsglati mdszerek dr. Horvth, Jzsef

Ez a knyv a Fldmvelsgyi s Vidkfejlesztsi Minisztrium tmogatsval, az Intzmnykzi Tanknyvkiadsi Szakmai Bizottsga jvhagysval kszlt. Szerzi jog 1999 dr. Horvth Jzsef - dr. Gborjnyi Richard

Minden jog fenntartva. Brmilyen msols, sokszorosts, illetve adatfeldolgoz rendszerben val trols a kiad elzetes rsbeli hozzjrulshoz van ktve.

iii Created by XMLmind XSL-FO Converter.

Tartalom

1. Elsz ............................................................................................................................................. 1 2. Bevezets a virolgiba .................................................................................................................. 2

1. A vrusok jelentsge ............................................................................................................ 2 2. A vrusok morfolgija s felptse ..................................................................................... 2 3. A vrusok replikcija ........................................................................................................... 2 4. A vrusos betegsgek kialakulsa s a tnetek (szimptmk) ............................................... 3 5. A vrusok tvitele, terjedse .................................................................................................. 3 6. A vrusok diagnosztikja ....................................................................................................... 4 7. A vrusok elleni vdekezs .................................................................................................... 4 8. A vrusok eredete .................................................................................................................. 5

3. A vrusok osztlyozsa s rendszertana .......................................................................................... 6 1. .............................................................................................................................................. 8

1.1. .................................................................................................................................. 8 1.1.1. ..................................................................................................................... 8

2. A vruscsaldok s nemzetsgeik ltalnos jellemzse ......................................................... 9 3. A vrusnemzetsgek ltalnos jellemzse ........................................................................... 23 4. j rendszertani javaslatok ................................................................................................... 35

4.1. Aktulis vrusrendszer: a nvnypatogn vrusnemzetsgek s tpus vrusfajok fontosabb tulajdonsgai .................................................................................................................. 35 4.2. Rendszertanilag nem besorolhat vrusok .............................................................. 45

4. A vrusok adatbzisa ..................................................................................................................... 46 1. Az adatbzis szerepe a vrusidentifiklsban ...................................................................... 46

1.1. Az adatbzis elvi szempontjai ................................................................................ 46 1.2. Az adatbzis gyakorlati szempontjai ...................................................................... 46 1.3. A vrusidentifikls stratgija ............................................................................... 47 1.4. Adatbzis-karakterek (jellemzk) ........................................................................... 47

5. A nvnyvrusok hivatalos elnevezse s akronmjai ................................................................... 52 6. A nvnyvirolgiban hasznlt fontosabb nvnyek kdjai ........................................................ 66 7. A vrustvitel mdszerei ............................................................................................................... 68

1. llatvektor nlkli vrustvitel ............................................................................................ 68 1.1. Oltssal trtn tvitel ............................................................................................ 68 1.2. Mechanikai tvitel .................................................................................................. 69

1.2.1. ................................................................................................................... 70 1.3. Vegetatv szaportszervekkel trtn vrustvitel ................................................. 71 1.4. Maggal s pollennel trtn tvitel ......................................................................... 71 1.5. Vrustvitel a talajban ............................................................................................. 72

1.5.1. Gykrrel trtn tvitel ............................................................................ 72 1.5.2. Alacsonyabb rend gombkkal trtn tvitel ........................................... 73

1.6. Vrustvitel Cuscuta fajokkal ................................................................................. 73 1.7. Vzzel trtn vrustvitel ....................................................................................... 74

2. llatvektorokkal trtn vrustvitel ................................................................................... 74 2.1. Levltetvek ............................................................................................................. 75

2.1.1. ................................................................................................................... 75 2.2. Kabck .................................................................................................................. 76 2.3. Nematdk (fonlfrgek) ........................................................................................ 77 2.4. Atkk ...................................................................................................................... 77 2.5. Tripszek .................................................................................................................. 78 2.6. Poloskk ................................................................................................................. 79 2.7. Molytetvek (fehrlegyek, liszteskk) ...................................................................... 80 2.8. Pajzstetvek .............................................................................................................. 81 2.9. Levlbolhk ............................................................................................................ 81 2.10. Aknzlegyek ....................................................................................................... 81 2.11. Bogarak ................................................................................................................. 81 2.12. Sskk ................................................................................................................... 81 2.13. Lepkk .................................................................................................................. 82 2.14. szkk .................................................................................................................. 82

A vrusok osztlyozsa

iv Created by XMLmind XSL-FO Converter.

2.15. Flbemszk ......................................................................................................... 82 2.16. Csigk ................................................................................................................... 82

3. A vrustvitel mdszertana .................................................................................................. 82 3.1. Vrustvitel levltetvekkel ...................................................................................... 82

3.1.1. ................................................................................................................... 82 3.2. Vrus-, illetve fitoplazma-tvitel kabckkal .......................................................... 91

3.2.1. ................................................................................................................... 91 3.3. Vrustvitel nematdkkal (fonlfrgekkel) ........................................................... 92

3.3.1. ................................................................................................................... 92 3.4. Vrustvitel talajlak gombkkal ............................................................................ 98 3.5. Vrustvitel Cuscuta fajokkal ................................................................................. 99

4. Rovarokkal trtn vrustvitel molekulris aspektusai ...................................................... 99 4.1. Kpenyfehrje (CP) ................................................................................................ 99 4.2. Helper komponens (HC) ....................................................................................... 101

5. Fonlfrgekkel trtn vrustvitel molekulris aspektusai .............................................. 101 8. A biotesztek virolgiai alkalmazsa ........................................................................................... 104

1. A nvnyvrus kapcsolat tpusai ..................................................................................... 104 1.1. .............................................................................................................................. 104

1.1.1. ................................................................................................................. 104 2. A vrusfertzs tnetei (szimptomatolgia) ...................................................................... 105

2.1. .............................................................................................................................. 105 2.1.1. ................................................................................................................. 105

3. A vrusfertzs mrtknek meghatrozsa ...................................................................... 111 4. Fizikai tulajdonsgok vizsglati mdszerei ....................................................................... 112 5. A vrusok differencilsa tesztnvnyekkel ...................................................................... 113 6. A vrusok fenntartsa tesztnvnyeken ............................................................................. 115 7. Gazdanvnykrk ........................................................................................................... 118 8. A fs szr nvnyek virolgiai ellenrzse ..................................................................... 118

8.1. A szl virolgiai ellenrzsnek rendszere ......................................................... 118 8.1.1. A szl veghzi tesztelse ...................................................................... 119 8.1.2. A szl szabadfldi tesztelse .................................................................. 120

8.2. A gymlcsfajok virolgiai ellenrzsnek rendszere ......................................... 121 8.2.1. A gymlcsfajok veghzi, lgy szr biolgiai tesztelse ..................... 122 8.2.2. A gymlcsfajok veghzi, fs szr tesztelse ....................................... 122 8.2.3. A gymlcsfajok szabadfldi, fs szr tesztelse ................................... 125

9. Szntfldi nvnyek virolgiai ellenrzse .................................................................... 126 9.1. A burgonya virolgiai ellenrzsnek ltalnos szempontjai ............................... 126

9.1.1. A burgonya vrusellenrzsnek rendszere .............................................. 127 9. Elektronmikroszkpos mdszerek .............................................................................................. 128

1. Negatv festses mdszer .................................................................................................. 128 2. Immuno-elektronmikroszkpos mdszer .......................................................................... 130 3. Dekorcis mdszer .......................................................................................................... 131 4. Kicsapsos (precipitcis) mdszer .................................................................................. 132 5. Finomszerkezeti vizsglatok mdszerei ............................................................................ 132 6. Citokmiai vizsglatok ...................................................................................................... 134 7. Immunokmiai vizsglatok ............................................................................................... 134

10. A vrusfertztt nvnyi sejtek finomszerkezete ...................................................................... 135 1. Sejtek s sejtalkotk .......................................................................................................... 135 2. Zrvnyok ......................................................................................................................... 138

2.1. Kristlyos citoplazmatikus zrvnyok .................................................................. 138 2.2. Amorf citoplazmatikus zrvnyok ........................................................................ 139 2.3. Hengeres citoplazmatikus, forgkerkszer (pinwheel) zrvnyok ..................... 140 2.4. Kristlyos sejtmagzrvny .................................................................................... 141

11. Fnymikroszkpos festses mdszerek .................................................................................... 142 1. Calcomine orangeLuxol brilliant green bl fests (og fests) ......................................... 143 2. Nukleoproteidek azrkk festse ...................................................................................... 143

2.1. .............................................................................................................................. 144 2.1.1. ................................................................................................................. 144

12. A vrusok izollsa s tiszttsa ................................................................................................ 145 1. A virionok tiszttsa fertztt nvnyekbl ...................................................................... 145

A vrusok osztlyozsa

v Created by XMLmind XSL-FO Converter.

1.1. A vrusok biolgiai tisztasga ............................................................................... 145 1.2. A vrusok felszaportsa fogkony nvnyben ..................................................... 145 1.3. A feltrs s kivons krlmnyei ........................................................................ 146 1.4. A vrusoldat szrse .............................................................................................. 147 1.5. A vrusok elvlasztsa ms sejtalkotrszektl .................................................... 147 1.6. A nvnyi fehrjk elklntse ........................................................................... 147 1.7. A virionok elklntse s a vrusoldat tmnytse ............................................ 147 1.8. A tiszttott vrusoldat minsgi ellenrzse, eltartsa ........................................... 148

2. A vrusfehrjk izollsa s tiszttsa ................................................................................ 153 3. A vrusnukleinsavak kivonsa s tiszttsa ....................................................................... 154

3.1. RNS-kivons tiszttott vrusszuszpenzibl ......................................................... 154 3.1.1. ................................................................................................................. 154

3.2. Vrus-DNS kivonsa ............................................................................................. 156 3.3. Ketts szl rns-ek kivonsa a fertztt nvnyekbl .......................................... 156

13. A vrusgenom szervezdse s a vrusok replikcija .............................................................. 159 1. A vrusreplikci alapvet vizsglati mdszerei ............................................................... 159

1.1. Restrikcis enzimek s a vrusok elsdleges szerkezetvizsglata ......................... 159 1.2. Ketts szl nukleinsavmsolatok (cDNS) ksztse egyszl RNS-bl ............. 159 1.3. A protoplasztok virolgiai alkalmazsa ................................................................ 160 1.4. A sejtmentes, in vitro fehrjeszintetizl rendszerek ............................................ 160

2. A vrusgenom szervezdsnek alaptpusai ...................................................................... 160 2.1. A nukleinsavak jellemz vgei ............................................................................. 161 2.2. Nyitott leolvassi szakaszok, fehrjetermkek ..................................................... 161 2.3. A vrusnukleinsav-replikci ltalnos menete .................................................... 161 2.4. A gnkifejezds ltalnos mdjai ....................................................................... 162

3. A gnkifejezds stratgii a klnbz vrusnemzetsgekben ........................................ 163 3.1. A potyvirusok replikcija: poliprotein szintzise s transzlci utni hasadsi termkek 163 3.2. A tehnbors mozaik vrus (cowpea mosaic comovirus) replikcija: osztott genom s poliproteinek ............................................................................................................... 164 3.3. A rozsnok mozaik vrus (brome mosaic bromovirus) replikcija: osztott genom s szubgenomi RNS ......................................................................................................... 165 3.4. A dohny mozaik vrus (tobacco mosaic tobamovirus) replikcija: tolvasott fehrje s szubgenomi RNS-ek ................................................................................................... 166 3.5. A pararetrovirusok replikcija: fordtott transzkripci ....................................... 167 3.6. Geminivirusok: ktirny transzkripcis stratgia ............................................... 168 3.7. A paradicsom bronzfoltossg vrus (tomato spotted wilt tospovirus) replikcija: negatv s ambiszensz nukleinsavak transzlcija ................................................................... 169 3.8. A vrusok paraziti: a szatellit vrusok s a szatellit RNS-ek replikcija ............ 170 3.9. Defektv interferl RNS-ek: a vrusreplikci hibs termkei ............................ 171

4. A vrusok rokonsga, a vrusok trzsfejldse .................................................................. 171 4.1. Vrus-szupercsaldok ........................................................................................ 171 4.2. Felttelezsek a vrusok trzsfejldsrl ............................................................ 173

14. Szerolgiai vizsglati mdszerek .............................................................................................. 176 1. Immunolgiai alapfogalmak ............................................................................................. 176

1.1. Az immunvlasz ................................................................................................... 176 1.2. A vrus-kpenyfehrje felptse s antign tulajdonsgai ................................... 177 1.3. Az antitest (immunoglobulin) felptse s tpusai ............................................... 177 1.4. Antignantitest klcsnhatsok .......................................................................... 178

2. Polikln antitestek ellltsa ............................................................................................ 178 2.1. A ksrleti llat kivlasztsa ................................................................................. 179 2.2. Az immunizls .................................................................................................... 179 2.3. Injektlsi mdszerek ........................................................................................... 179 2.4. Vrvtel s szrumnyers ..................................................................................... 180 2.5. Az IgG tiszttsa az antiszrumbl ....................................................................... 180

3. Monokln antitestek ellltsa ......................................................................................... 180 3.1. A monokln antitestek alkalmazsnak lehetsgei ............................................. 182

4. A szerolgiai reakcik alaptpusai .................................................................................... 184 4.1. Precipitci ........................................................................................................... 184 4.2. Agglutinci ......................................................................................................... 185

A vrusok osztlyozsa

vi Created by XMLmind XSL-FO Converter.

4.3. Immunodiffzis tesztek ...................................................................................... 186 4.4. Immunoelektroforzis ........................................................................................... 187 4.5. ELISA-mdszerek ................................................................................................ 188 4.6. Radioimmuno-vizsglat (RIA) ............................................................................. 192 4.7. Immunoblotting .................................................................................................... 192

5. A klnbz szerolgiai eljrsok alkalmazsa a vrusdiagnosztikban .......................... 194 15. A nukleinsavak jellemzsnek mdszerei ................................................................................ 195

1. Gl-elektroforzis .............................................................................................................. 195 2. Nukleinsav-hibridizci .................................................................................................... 196

2.1. Dot-blot hibridizci ............................................................................................. 197 2.2. Southern-hibridizci ........................................................................................... 198 2.3. Northern-hibridizci ........................................................................................... 199 2.4. Szendvics-hibridizci .......................................................................................... 200 2.5. Prbakszts ........................................................................................................ 200

3. Nukleinsav-szekvencia meghatrozsa ............................................................................. 202 4. Polimerz lncreakci (pcr) .............................................................................................. 203

16. Nvnyi vrusbetegsgek s nvekedst szablyoz anyagok .................................................. 207 1. A nvnyi hormonok jellemzse ....................................................................................... 207

1.1. Juvenilhormonok .................................................................................................. 207 1.2. Szeneszcenciahormonok ....................................................................................... 209

2. A vrusfertztt nvnyek hormonvltozsai .................................................................... 210 3. A nvnyi hormonok meghatrozsa ................................................................................ 211

3.1. Az auxin (indol-3-ecetsav) meghatrozsa ........................................................... 213 3.2. A gibberellinek meghatrozsa ............................................................................. 218 3.3. A citokininek meghatrozsa ................................................................................ 221 3.4. Az etiln meghatrozsa ....................................................................................... 226 3.5. Az abszcisszinsav meghatrozsa ......................................................................... 228

17. Aktv oxignformk s antioxidns enzimrendszerek .............................................................. 232 1. Az aktv oxignformk ...................................................................................................... 233

1.1. Szuperoxid gyk (O2) .......................................................................................... 233 1.2. Hidrogn-peroxid (H2O2) ...................................................................................... 234 1.3. Hidroxil gyk (OH) .............................................................................................. 235 1.4. Egyb aktv oxignformk .................................................................................... 235

2. Antioxidns folyamatok, enzimek, enzimrendszerek s nem enzimatikus antioxidnsok 236 2.1. Szuperoxid-dizmutz (SOD) ................................................................................ 236 2.2. Aszkorbt .............................................................................................................. 236 2.3. Glutation, -tokoferol, flavonoidok ...................................................................... 237 2.4. Katalz .................................................................................................................. 237

3. Az aktv oxignformk lehetsges keletkezsi helye s mdja ......................................... 237 4. Az aktv oxignformk krfolyamatban betlttt szerepe ................................................ 240

4.1. Antimikrobilis aktivits ...................................................................................... 240 4.2. Fitoalexinek termeldse ...................................................................................... 240 4.3. Hiperszenzitv reakci .......................................................................................... 240 4.4. Szisztemikus szerzett rezisztencia ........................................................................ 240 4.5. Induklt sejtfal-megszilrdts .............................................................................. 240

5. Mrsi mdszerek s rtkelsk ...................................................................................... 241 5.1. KJ / kemnyt mdszer ....................................................................................... 242 5.2. CeCl3 mdszer ...................................................................................................... 244 5.3. Ti(IV)Cl4 mdszer ................................................................................................ 245 5.4. 4-nitro-tetrazliumkk (NBT) mdszer ................................................................ 246 5.5. Diaminobenzidin (DAB) mdszer ........................................................................ 246 5.6. Kemilumineszcencis mdszer ............................................................................. 247 5.7. Egyb mrsi mdszerek ...................................................................................... 247

18. A vrus-ellenllsgra nemests hagyomnyos mdszerei ...................................................... 251 1. A rezisztencira nemests f irnyai ................................................................................ 251

1.1. .............................................................................................................................. 251 1.1.1. ................................................................................................................. 251

2. A rezisztenciagnek mkdse egyes nvnyfajokban ..................................................... 252 2.1. .............................................................................................................................. 257

2.1.1. ................................................................................................................. 257

A vrusok osztlyozsa

vii Created by XMLmind XSL-FO Converter.

3. Az extrm rezisztencia kialaktsa s ellenrzsi mdszerei ............................................ 261 3.1. .............................................................................................................................. 262

3.1.1. ................................................................................................................. 262 19. A vrus-ellenllsgra nemests biotechnolgiai mdszerei ................................................... 266

1. Szomatikus hibridizci .................................................................................................... 266 1.1. .............................................................................................................................. 266

1.1.1. ................................................................................................................. 266 1.2. A burgonya s a Solanum brevidens szomatikus hibridjeinek sajtossgai .......... 269

2. Molekulris genetikai mdszerek ...................................................................................... 269 2.1. Vdekezs nvnyi eredet rezisztenciagnek beptsvel ................................. 270

2.1.1. Transzpozon mutagenezisen alapul gnizolls ..................................... 270 2.1.2. Trkpezsen alapul gnizolls ............................................................ 271

2.2. A krokoztl szrmaztatott rezisztencia ............................................................. 273 2.2.1. A kpenyfehrjegnnel induklt vrusrezisztencia ................................... 273 2.2.2. A replikz gnnel induklt rezisztencia .................................................... 277 2.2.3. A mozgsfehrjegnnel induklt rezisztencia .......................................... 277 2.2.4. A szatellit RNS (sat-RNS) ltal kzvettett rezisztencia .......................... 278 2.2.5. A defektv interferl (DI) RNS ltal kzvettett rezisztencia ................. 278 2.2.6. A kpenyfehrje ltal kzvettett rezisztencia mechanizmusa ................. 278 2.2.7. Az RNS ltal kzvettett rezisztencia mechanizmusa .............................. 279

2.3. Egyb rezisztenciagnek ....................................................................................... 280 2.3.1. ................................................................................................................. 280

3. A rezisztenciagnek beptse a nvnyi genomba ........................................................... 281 3.1. Az agrobaktriumos transzformls ..................................................................... 281 3.2. DNS-bevitel polietiln-glikollal (PEG) s elektromos impulzussal ..................... 284 3.3. Gntvitel biolisztikus mdszerrel ........................................................................ 284

3.3.1. ................................................................................................................. 284 20. Fggelk ................................................................................................................................... 285

1. A vrusok, a vrusszer organizmusok s a viroidok nemzetkzi forgalmnak (terjedsnek) ellenrzse s megakadlyozsa ........................................................................................... 285

1.1. Vrusokra s vrusszer krokozkra vonatkoz nvny-egszsggyi hatrozatok 285 1.1.1. ................................................................................................................. 285 1.1.2. Az Eurpai Kzssgben (EU) el nem fordul, s az EU-ra nzve fontos vrusok, vrusszer krokozk s viroidok ......................................................... 286 1.1.3. Az Eurpai Kzssgben (EU) elfordul s az EU-ra nzve fontos fitoplazma krokozk .......................................................................................................... 288 1.1.4. Krokozk, amelyeknek a behurcolsa s terjedse a meghatrozott vdett znkban tilos .................................................................................................... 288 1.1.5. Krokozk, amelyeknek a behurcolsa s terjedse valamennyi tagorszgban tilos, ha azok egyes nvnyeken s nvnyi termkeken elfordulnak ............. 288 1.1.6. Az Eurpai kzssgben (EU) elfordul s az EU-ra nzve fontos vrus, vrusszer, viroid s spiroplaza krokozk ........................................................ 289

1.2. Egyb hatrozatok ................................................................................................ 291 2. Karantn s veszlyes vrusok, vrusszer organizmusok s viroidok Eurpban ............ 291 3. Az brk eredete ................................................................................................................ 294

Irodalom ......................................................................................................................................... 297

viii Created by XMLmind XSL-FO Converter.

Az brk listja

1. A vrusok sematikus brzolsa. A: heliklis dohny mozaik vrus (tobacco mosaic tobamovirus); B: izometrikus, kubiklis szimmetrij tarlrpa srga mozaik vrus (turnip yellow mosaic tymovirus); C: bakteriofg (Echerichia coli T2-fgja) ................................................................................................. 2 2. A: dohny mozaik vrussal (tobacco mosaic tobamovirus) fertztt Nicotiana tabacum cv. Samsun mozaikos levelei; B: tnetek a karfiol mozaik vrussal (cauliflower mosaic caulimovirus) inokullt Brassica rapa var. rapa leveln ........................................................................................................... 6 3. Nvnypatogn vrusok csaldjainak s nemzetsgeinek vzlatos brzolsa. dsDNA = ketts szl dezoxiribonukleinsav, ssDNA = egyszl dezoxiribonukleinsav, dsRNA = ketts szl ribonukleinsav, ssRNA = egyszl ribonukleinsav, () = negatv szl vrus, (+) = pozitv szl vrus. Mretjelz = 100 nm [Murphy et al., 1995 utn] ............................................................................................................ 7 4. A: az uborka mozaik vrus (cucumber mosaic cucumovirus) elektronmikroszkpos kpe (29 nm, 127 000-szeres nagyts); B: az uborka mozaik vrus szisztemikus tnete Nicotiana tabacum cv. Xanthi-nc nvnyen; C: Cucumis sativus nvny leveln ................................................................................ 11 5. A paradicsom bronzfoltossg vrus (tomato spotted wilt tospovirus) partikulumainak elektronmikroszkpos kpe [D. Peters szvessge folytn] .............................................................. 12 6. A rpa srgasg vrus [beet yellows closterovirus (1250 nm 10 nm)]flexibilis partikulumai [J. Brandes szvessge folytn] ............................................................................................................................ 14 7. A: a burgonya Y-vrus (potato Y potyvirus) elektronmikroszkpos kpe (730 nm x 11 nm); B: a rizs trpls vrus (rice dwarf phytoreovirus) kabcavektora (Nephotettix cincticeps); C: a rizs trpls vrus tnete rizsnvny leveln [F. Nakasuyi szvessge folytn] ............................................................. 17 8. A: Pittosporum rsrguls vrussal (Pittosporum vein yellowing nucleorhabdovirus) termszetes ton fertzdtt Pittosporum tobira nvny levele; B: egszsges nvny .............................................. 19 9. A csorbka srgaersg vrus (sowthistle yellow vein nucleorhabdovirus) lvedkszer partikulumai (230 nm 100 nm) [D. Peters szvessge folytn] ........................................................................... 20 10. A paszternk srga foltossg vrus (parsnip yellow fleck sequivirus) izometrikus partikulumai (31 nm) [A.F. Murant szvessge folytn] ...................................................................................................... 21 11. A dohny nekrzis vrus (tobacco necrosis necrovirus) helyi (loklis) nekrzisokat idz el a nvnyeken; A: Nicotiana glutinosa; B: Datura innoxia; C: Solanum ochroleucum; D: Ocimum gratissimum ...................................................................................................................................... 23 12. A karfiol mozaik vrus (cauliflower mosaic caulimovirus) virionjai (A) s szisztemikus tnetei Brassica rapa var. rapa (B), valamint Crambe strigosa (C) nvnyeken .......................................... 24 13. Carlavirusok virionjai. A: burgonya M-vrus (potato M carlavirus, 650 nm 12 nm); B: burgonya S-vrus (potato S carlavirus, 650 nm 12 nm); C: vrshere rmozaik vrus (red clover vein mosaic carlavirus, 600-700 nm 12 nm) [B s C: J. Brandes szvessge folytn] ....................................... 25 14. A: a burgonya X-vrus (potato X potexvirus) virionjai (515 nm 13 nm) [J. Brandes szvessge folytn]; B: a burgonya X-vrus (potato X potexvirus) loklis lzikat mutat gazdanvnynek (Gomphrena globosa) levele ............................................................................................................. 29 15. A, B, C: a Chenopodium mozaik vrus (sowbane mosaic sobemovirus, 26-28 nm) rszecskinek elektronmikroszkpos kpe. A: 1%-os formalinnal fixlt, urniummal rnykolt vrusprepartum; B: a vrusrszecskk hexagonlis elrendezdse n. negatv festses (negativ staining) mdszerrel vgzett vizsglat alapjn; C: a formalinnal s a negatv festses mdszerrel fixlt virionok; D: a csoms ebr foltossg vrus (cocksfoot mottle sobemovirus) szfrikus rszecski (30 nm) [A-C: C.I. Kado, D: A.J. Gibbs szvessge folytn] ................................................................................................................. 31 16. A: a dohny mozaik vrus (tobacco mosaic tobamovirus) plcika alak virionjai (300 nm 18 nm); B: dohny mozaik vrussal inokullt Nicotiana tabacum cv. Samsun nvny mozaikos s deformlt levelei 32 17. A dohny rattle vrus (tobacco rattle tobravirus) hossz (A) (180215 nm) s rvid (B) (46115 nm) partikulumai [B.D. Harrison szvessge folytn];C: Solanum capsicastrum a vrus nekrotikus tnetekkel reagl diagnosztikai nvnye .......................................................................................................... 32 18. A: Brassica chinensis a tarlrpa mozaik vrus (turnip yellow mosaic tymovirus) propagatv gazdanvnye [D. Mamula szvessge folytn];B: burgonya andeszi ltens vrus (potato Andean latent tymovirus) szfrikus partikulumai (30 nm) [A.J. Gibbs szvessge folytn] .................................... 33 19. A burgonya T-vrus (potato T vitivirus) flexibilis virionjai (637 nm 12 nm) [L.F. Salazar szvessge folytn] ............................................................................................................................................. 35 20. A vruskapcsolatok s specifitsok identifiklsnak stratgiai diagramja. GVL = gazdavrus lista, VCsA = vruscsoport-adatok, VA = vrusadatok [Brunt et al., 1990 utn] ....................................... 47

A vrusok osztlyozsa

ix Created by XMLmind XSL-FO Converter.

21. A virolgiban alkalmazott fontosabb oltsi mdszerek. A: zldolts hastkba; B: prosts; C: hj al olts; D: rintkezses olts; E: palackolts; F: hagymaolts; G: szemzs; H: szemlapozs (chipszemzs); I: gumba olts; J: heteroplasztikus olts (zld hajts fs rszbe oltsa); K: levlolts ktszikek esetben; L: levlolts az egyszik Liliaceae csaldba tartoz nvnyeknl [Schmelzer, 1980 utn] .................. 68 22. A: dohny mozaik vrus (tobacco mosaic tobamovirus) tnetei Nicotiana tabacum cv. Samsun s B: N. tabacum cv. rdi dohnynvnyek levelein [Horvth Jzsef szvessge folytn] ............................ 69 23. A vrusok mechanikai tvitelhez hasznlatos eszkzk. A: orsprs [J.A. de Bokx szvessge folytn]; B: 1 = gmblombik; 2 = drzsmozsarak; 3 = vegspatulk; 4 = desztilllt vz; 5 = manyag jelfa; 6 = pufferoldat; 7 = mrhenger; 8 = karborundumszr [Horvth Jzsef szvessge folytn] ....... 70 24. A: a dohny mozaik vrus (tobacco mosaic tobamovirus) tnetei a fertztt paradicsommaggal trtn tvitel utn Lycopersicon esculentum nvnyek levelein; B: bab srga mozaik vrus (bean yellow mosaic potyvirus) tnetei Phaseolus vulgaris cv. Red Kidney nvnyen [Horvth Jzsef szvessge folytn] 71 25. Az Olpidium brassicae gombavektor zoosporangiumai. A: salta trzs (lettuce strain) vektora; B: kposzta trzs (cabbage strain) nem vektor; C: az Olpidium spp. zoospri [Teakle, 1967 utn] ... 73 26. A: az uborka zldfoltossg mozaik vrus (cucumber green mottle mosaic tobamovirus) tnetei Cucumis sativus cv. Delicatess uborkanvnyen; B: az uborka mozaik vrus (cucumber mosaic cucumovirus) tnetei Nicotiana tabacum cv. Xanthi-nc dohnyon [Horvth Jzsef szvessge folytn] 74 27. Levltetvel trtn rpa srga trpls vrus (barley yellow dwarf luteovirus) tvitel sematikus brzolsa. A nyilak a cirkulatv vrustvitel tjt jelzik. JNyM: jrulkos nylmirigy, EnyM: elsdleges nylmirigy, KB: kzpbl, UB: utbl [A. Miller szvessge folytn] ............................................. 75 28. Az szirzsa srgasg fitoplazma (aster yellows phytoplasma) kabcavektorai A-B: Macrosteles fascifrons; C-D: Elymana virescens. Balrl htoldali, jobbrl hasi helyzetben lv nnem egyedek [L.N. Chiykowski szvessge folytn] ....................................................................................................... 77 29. A: kifejlett Aceria tulipae atkavektor sematikus rajza az emsztcsatornval s a petefszekkel. Fg = elbl, Mg = kzpbl, Hg = utbl, Ct = fejtor, Fl = mells lbak, Hl = hts lbak, Go = ivarszerv nylsa, E = tojs, Oc = rett petesejt, Hs = utbl vgblszer zskja, As = anlis tapadkorong [Paliwal s Slykhuis, 1967 utn]; B: bza cskos mozaik vrussal (wheat streak mosaic tritimovirus) fertzdtt bza levelei a fertzttsg slyossga sorrendjben (alulrl felfel) [J.T. Slykhuis szvessge folytn] 78 30. Thrips tabaci, a tospovirusok vektora [K.M. Smith szvessge folytn] ..................................... 79 31. Piesma quadratum a rpa levlgndrds vrus (beet leaf curl ? rhabdovirus) levlpoloska-vektora [G. Proeseler szvessge folytn] ...................................................................................................... 79 32. A crinivirusok tvitelben szerepet jtsz molytetvek (Trialeurodes vaporariorum) populcija dohnylevlen [Szalay-Marzs Lszl szvessge folytn] .............................................................. 80 33. Retek mozaik vrussal (radish mosaic comovirus) fertztt Brassica campestris nvny levele [Horvth Jzsef szvessge folytn] ................................................................................................. 81 34. AC: szvethlval s vegajtval elltott inszektriumok; DF: miniatr levltet-inszektriumok, amelyeket csptetvel lehet a nvnyek levelre, egy meghatrozott helyre elhelyezni [Horvth Jzsef szvessge folytn] ............................................................................................................................ 83 35. A membrnhrtyk elksztsnek folyamata. 1. a gyr oldalrl, ill. fellrl; 2. a gyrre rfesztjk az els parafilmet (P1); 34. a kifesztett hrtyra rcseppentjk a tpllkot; 5. kifesztjk a msodik parafilmet (P2); 6. a P2 parafilmet rhelyezzk az els parafilm tetejre; 78. a kt filmet sszeszortjuk s szleiket feltekerjk; 9. az elkszlt membrnhrtya [Kunkel, 1977 utn] ...................................... 86 36. A gyrk sszelltsnak mdozatai (a 35. bra folytatsa). 9. az elkszlt membrnhrtya; 10. a gyr oldalrl, ill. fellrl; 11. gyr a hrtyval. Az egyszer gyrk (1213.) s a vlasztsos kamrk (1516.) alja nejlon ftyolszvet, amelyet mikroszkp trgylemezhez erstett parafadughoz ragasztunk. A vlasztsos kamra keresztirny darabja (14.) veglapbl van kivgva s parafilmmel beragasztva [Kunkel, 1977 utn] .......................................................................................................................... 86 37. A kifejlett kabck gyjtsre alkalmas szvkszlk [Washio et al., 1968 utn mdostva Noordam (1973) utn] ...................................................................................................................................... 92 38. A Trichodorus fajok izollshoz szksges, n. Baerman-fle tlcsr [Noordam, 1973 utn] . 94 39. A Trichodorus fajok izollsnak kvetkez lpse [Noordam, 1973 utn] .............................. 94 40. A: szr (0,05 mm) a Petri-csszben az llvnyon; B: doboz a bevsett ngyzetrccsal: 1. foganty, 2. emelt szegly; C: disznszr vkony fadarabra ragasztva [Noordam, 1973 utn] ........................ 95 41. Talajbl izollhat nematdafajok. 1. Tylenchorhynchus dubius. 2. Rhabditid. 3.*Longidorus elongatus. 4. Dorilaimid. 5. Rotylenchus uniformis. 6.*Xiphinema diversicaudatum. 7. Tylolaimophorus.

8. Diphtherophora. 9. Trichodorus. A *-gal jellt fajok vrustvitelre alkalmasak [J. Seinhorst rajza alapjn Noordam, 1973 utn] ........................................................................................................................ 95

A vrusok osztlyozsa

x Created by XMLmind XSL-FO Converter.

42. A vrus megrzsnek specilis helyei a vektor fonlfrgekben. A vrus kapcsolatban van a tpcsatorna falval a jelzett terleteken [Taylor s Robertson, 1975 utn] ...................................... 96 43. Javtott standard mdszerrel vgzett vrustvitel fonlfrgekkel[R. Fritzsche szvessge folytn] 97 44. A burgonya szrtrpls vrus (potato mop-top pomovirus) loklis tnetei Chenopodium amaranticolor diagnosztikai tesztnvnyen, 27 nappal az inokulls utn [Horvth Jzsef szvessge folytn] ............................................................................................................................................. 98 45. A: Vicia faba hiperszenzitv reakcija a bab srga mozaik vrussal (bean yellow mosaic potyvirus) s B: Melandrium srgafoltossg vrussal (Melandrium yellow fleck bromovirus) szemben [Horvth Jzsef szvessge folytn] .......................................................................................................................... 104 46. Loklis szimptmk Datura stramonium (A) s D. gigantea (B) inokullt levelein. A: klorotikus lzik belladonna foltossg vrussal (belladonna mottle tymovirus) fertztt nvny leveln; B: nekrotikus lzik dohny gyrsfoltossg vrussal (tobacco ringspot nepovirus) inokullt nvny leveln [Horvth Jzsef szvessge folytn] .......................................................................................................................... 106 47. Szisztemikus szimptmk. A: lucerna mozaik vrussal (alfalfa mosaic alfamovirus) inokullt Solanum marginatum mozaikos levele; B: paradicsom magtalansg vrussal (tomato aspermy cucumovirus) inokullt Nicotiana glutinosa deformlt levele; C: burgonya Y-vrussal (potato Y potyvirus) inokullt burgonya (Solanum tuberosum) levele; D: dohny mozaik vrussal (tobacco mosaic tobamovirus) fertztt Petunia atkinsiana pfrnylevelsge [Horvth Jzsef szvessge folytn] .................................... 108 48. A: burgonya Y-vrussal (potato Y potyvirus) fertztt Nicotiana tabacum szrnekrzisa; B: nekrotikus lzik a burgonya Y-vrus NTN-trzsvel fertztt burgonya (Solanum tuberosum) bogyin; C: nekrotikus lzik a burgonya Y-vrus NTN trzsvel fertzdtt burgonyagumkon; D: tarlrpa mozaik vrussal (turnip mosaic potyvirus) fertzdtt Matthiola incana virgnak szntrse (flower breaking) [A s D: Horvth Jzsef szvessge folytn; B s C: Pintr Csaba szvessge folytn] ....................... 108 49. A: dohny rattle vrus (tobacco rattle tobravirus) ltal elidzett tnetek Libertas burgonyafajta gumszveteiben; B: rpa nekrotikus srgaersg vrus (beet necrotic yellow vein benyvirus) ltal elidzett gykrproliferci (szakllasods) cukorrpn [Horvth Jzsef szvessge folytn] .... 109 50. A: Chenopodium amaranticolor a polifg uborka mozaik vrus (cucumber mosaic cucumovirus) s B: burgonya Y-vrus (potato Y potyvirus) virofil gazdja [Horvth Jzsef szvessge folytn] ......... 114 51. A szl virolgiai ellenrzsnek rendszere [Lzr Jnos szvessge folytn] ........................ 119 52. Klnbz morfolgij nvnypatogn vrusok. A: plcika alak dohny mozaik vrus (tobacco mosaic tobamovirus); B: fonl alak salta mozaik vrus (lettuce mosaic potyvirus); C: szfrikus belladonna foltossg vrus (belladonna mottle tymovirus) [Horvth Jzsef szvessge folytn] .... 128 53. BSMV: rpa cskos mozaik vrus (barley stripe mosaic hordeivirus) s LRSV: Lychnis gyrsfoltossg vrus (Lychnis ringspot hordeivirus) rszecske-hosszsg eloszlsa. A stt oszlopok a mrt virionok eloszlst mutatjk, mg a vonaldiagram a hrom csoport folyamatos sszegezsvel kapott eredmnyt brzolja. : norml hosszsg; : ltszlagos hosszsg [Gibbs et al., 1963 utn] .... 130 54. Vrusfelhalmozds a kloroplasztiszban. Kt vrushalmaz dohny mozaik vrussal (tobacco mosaic tobamovirus) fertztt dohny (Nicotiana tabacum) mezofillum sejtjnek kloroplasztiszban. Az als sztnyomja a grnumokat, a fels halmaz kidombortja a kloroplasztiszt hatrol ketts membrnt. GR = grnum, V = vrushalmaz, VA = kzponti sejtreg, W = sejtfal. 30 000-szeres nagyts [Esau, 1968 utn] 135 55. A: tarlrpa srga mozaik vrussal (turnip yellow mosaic tymovirus) fertztt knai kel (Brassica pekinensis) levl mezofillumsejtjnek kloroplasztiszai. Jellegzetes szli vezikulumok (V) a kloroplasztiszban, s virionok felhalmozdsa a kt kloroplasztisz kztti citoplazmban. B: szli vezikulumok kinagytott kpe. Nyilak jelzik a ketts membrnnal bortott hlyagocskk nyaki rszt, amely a citoplazmba nylik. Az als vonalak mrete = 100 nm [Francki et al., 1985 utn] ......... 136 56. A kloroplasztiszok kros eltrsei paradicsom bronzfoltossg vrussal (tomato spotted wilt tospovirus) fertztt Nicotiana benthamiana nvnyek levelnek mezofillumsejtjeiben A: a megnagyobbodott kemnytszemcsk (nyllal jellve) sztnyomjk a tilakoidmembrnokat; B: a kloroplasztiszok alakja megvltozott, a bels membrnrendszer fellazult. A tilakoidok (T), a plasztoglobulusok (P) s a kloroplasztiszban tallhat vezikulumok nyllal jellve; C: az ersen duzzadt kloroplasztiszban plasztoglobulusok halmozdtak fel (nyl jelzi); D: a fertzs utols szakaszban a kls burokkal rendelkez virionok az egsz citoplazmban megtallhatk, de sohasem fordulnak el a kloroplasztiszokon bell. A nyllal jelzett virionok hrmas-ngyes csoportokban, vagy tbbesvel lthatk egy kzs membrnban .................................................................................................................. 137 57. Kristlyos citoplazmatikus zrvny, dohny mozaik vrussal (tobacco mosaic tobamovirus) fertztt dohny (Nicotiana tabacum) parenhimasejtjben. A plcika alak virionok egymssal prhuzamosan, sorokba rendezdve, szmos rteget kpeznek. 26 000-szeres nagyts. CH = kloroplasztisz, VA = kzponti vakulum, W = sejtfal [Esau, 1968 utn] ........................................................................ 139

A vrusok osztlyozsa

xi Created by XMLmind XSL-FO Converter.

58. Amorf citoplazmatikus zrvny (X-test) dohny mozaik vrussal (tobacco mosaic tobamovirus) fertztt Nicotiana tabacum levelnek parenhimasejtjben. A tubulusok (csvecskk) kis csoportokban, a nyalbok egymssal szget bezrva rendezdtek. RB = riboszmk, ER = endoplazmatikus retikulum, VA = regek, V = virionok [Esau, 1968 utn] ...................................................................................... 140 59. Potyvirusokra jellemz forgkerkszer (pinwheel) zrvnyok (A, B, C). C: Malva rkivilgosods vrus (Malva vein clearing potyvirus) forgkerkszer zrvnyai. 80 000-szeres nagyts. La = lemezes aggregtumok, P = plasztid (kloroplasztisz), M = mitokondrium, Pw = forgkerkszer (pinwheel) zrvny [Horvth Jzsef szvessge folytn] .................................................................................. 140 60. Sejtmagzrvnyok dohny karcolatos vrussal (tobacco etch potyvirus) fertztt dohnylevl (Nicotiana tabacum) sejtjeiben. A: a metszs skja merleges a zrvny skjra; B: a metszet egy bipiramidlis zrvny lemeznek skjban kszlt. Az brk bal als sarkban a vonal 500 nm-nek felel meg. Nu = nucleolus (sejtmagvacska) [Francki et al., 1985 utn] .................................................. 141 61. A: Malva rkivilgosods vrus (Malva vein clearing potyvirus) fnymikroszkpos zrvnyai; B: retek mozaik vrus (radish mosaic comovirus) zrvnyai. 800-szoros nagyts; C: karfiol mozaik vrus (cauliflower mosaic caulimovirus) zrvnyai. 450-szeres nagyts; IB = zrvnytestek (inclusions), N = sejtmag, P = plasztid, CN = kristlyos, tszer zrvnyok, V = vakuolum [Horvth Jzsef szvessge folytn] ........................................................................................................................................... 142 62. A dohny nekrzis vrus (tobacco necrosis necrovirus) loklis tnetei Nicotiana knightiana (A) s Solanum capsicastrum (B) nvnyek levelein [Horvth Jzsef szvessge folytn] ...................... 146 63. A burgonya X-vrus (potato X potexvirus) s a belle izollt fehrje s nukleinsav abszorpcis spektruma [Francki s McLean, 1968 utn] ................................................................................... 149 64. A lucerna mozaik vrus (alfalfa mosaic alfamovirus) szisztemikus tnetei nhny gazdanvnyen. A: Ocimum viridae; B: Solanum marginatum; C: Viburnum opulus [Horvth Jzsef szvessge folytn] 154 65. Dohny gyrsfoltossg vrus (tobacco ringspot nepovirus) tnetei. A: loklis tnetek Datura gigantea nvny leveln; B: szisztemikus szimptmk Tropaeolum peregrinum nvny leveln [Horvth Jzsef szvessge folytn] .......................................................................................................................... 155 66. Dohny-mezofillumbl izollt protoplasztok ........................................................................... 160 67. A dohny mozaik vrus (tobacco mosaic tobamovirus) replikci szakaszai a nvnyi sejtben. A: fertzs, B: az RNS kiszabadulsa, C: ktds a riboszmkhoz, D: vrusreplikz (vagy egy rsze), E: a replikatv forma keletkezse, F: replikatv intermedierek keletkezse, G: replikatv komplex, H: sszepls, I: ksz virionok, RF: replikatv forma, RI: replikatv intermedier, sRNS: kis (szubgenomi) RNS [rsek s Gborjnyi, 1998 utn] ........................................................................................... 162 68. A potyvirusok [szilva himl vrus (plum pox potyvirus)] gntrkpe. P1(Pro) = P1 fehrje protezaktivitssal, HC-Pro = segt (helper) komponens, P3 = P3 fehrje, 6K1 = 6K1 fehrje, CI (Hel) = citoplazmikus zrvnyfehrje helikzaktivitssal, 6K2 = 6K2 fehrje, NIa = sejtmagfehrje, NIb (Rep) = sejtmagfehrje replikzaktivitssal, CP = kpenyfehrje, poli (A) = poliadenilsav. Magyarzat a szvegben [Riechmann et al., 1991 utn] ....................................................................................... 163 69. A tehnbors mozaik vrus (cowpea mosaic comovirus) gntrkpe s a transzlci utni hasads termkei: poli(A) = poliadenilsav farok, ORF = nylt leolvassi szakasz, nt = nukleotid, kD = kilodalton. Magyarzat a szvegben [Matthews, 1991 utn] ............................................................................ 164 70. A rozsnok mozaik vrus gnszervezdse. cap = sapka, tRNS = transzfer RNS-szer vg, ORF = nylt leolvassi szakasz, nt = nukleotid, kD = kilodalton [Matthews, 1991 utn] ................................... 165 74. A geminivirusok gnszervezdse s lehetsges gntermkei. Magyarzat a szvegben [Mullineaux et al., 1984 utn] ................................................................................................................................. 168 75. A paradicsom bronzfoltossg vrus (tomato spotted wilt tospovirus) osztott genomja s gnkifejezdse. mRNS = messenger RNS, vRNS = vrus-RNS, p = fehrje (protein), kD = kilodalton. Magyarzat a szvegben [German et al., 1992 utn] ...................................................................... 169 76. A tehnbors mozaik vrus (cowpea mosaic comovirus) s a poliovirusok fehrjegnjeinek hasonl elrendezdse s konzervlt szekvencii. CPMV = tehnbors mozaik vrus (cowpea mosaic comovirus). VP = vrusprotein, VPg = vrusgenomhoz kttt fehrje. A pontozott rszek a homolg szekvencikat jellik [Matthews, 1985 utn] ......................................................................................................... 171 77. A lucerna mozaik vrus (alfalfa mosaic alfamovirus), a rozsnok mozaik vrus (brome mosaic bromovirus) s a dohny mozaik vrus (tobacco mosaic tobamovirus) genomszervezdsnek hasonlsga a szekvenciban homolg szakaszokkal. AMV = lucerna mozaik vrus, BMV = rozsnok mozaik vrus, TMV = dohny mozaik vrus, CP = kpenyfehrje. A vonalazott rszek a megfelel konzervlt szakaszok [Matthews, 1985 utn] .................................................................................................................... 172 78. Az antign, az antignt megjelent sejt, a T s a B nyiroksejtek kztti klcsnhats [Hampton et al., 1990 utn] ....................................................................................................................................... 176 79. Az immunoglobulin- (IgG) molekulk felptse s tpusai enzimes hasts utn [Hampton et al., 1990 utn] ................................................................................................................................................ 178

A vrusok osztlyozsa

xii Created by XMLmind XSL-FO Converter.

80. A monokln antitest ellltsnak folyamatbrja; A: az egr immunizlsa, B: a myeloma- s a lgsejtek fzira trtn elksztse;C: sejtfzi; D: a sejthibridek szelekcija, szaportsa, krioprezervlsa s klnozsa; E: a hibridmk szkrnelse; F: monokln antitest termeltetse s tiszttsa [Hampton et al., 1990 utn] ............................................................................................................ 181 81. A ketts gldiffzi precipitcis veinek rtelmezse. Magyarzat a szvegben [Hampton et al., 1990 utn] ................................................................................................................................................ 186 82. A klnbz ELISA-eljrsok sematikus brzolsa. A: Y = IgG, = vrus, YE = IgG-enzim konjugtum; B: V = F (ab)2, = vrus, Y = IgG, EA = Protein A-enzim konjugtum; C: Y = IgG, = vrus, Y = IgG, A-E = anti-IgG-enzim konjugtum; D: A = Protein A, Y = IgG, = vrus, EA = Protein A-enzim konjugtum; E: = vrus, YE = IgG-enzim konjugtum; F: = vrus, Y = IgG, A-E = anti-IgG-enzim konjugtum [Hampton et al., 1990 utn] ........................................................................................ 188 83. A gl-elektroforzis vzlata [Brown, 1990 utn] ...................................................................... 196 84. A Southern-hibridizci vzlata [Sain s Erdei, 1985 utn] ..................................................... 198 85. A blottols [Sambrook et al., 1989 utn] .................................................................................. 199 86. A szendvics-hibridizci vzlata [Molnr Jnos szvessge folytn] ....................................... 200 87. A cDNS-kszts folyamata [Brown, 1990 utn] ...................................................................... 200 88. Prbakszts nick-transzlcival. : Eredeti nick pozci, : Vgs nick pozci, : Jellt szl [Brown, 1990 utn] .................................................................................................................. 201 89. A biotinls vzlata [Molnr, 1991 utn] ................................................................................. 202 90. A polimerz lncreakci. A s B: az eredeti DNS-szlak, A s B: a kt oligonukleotid primer. A szaggatott vonal az in vitro szintetizlt DNS-t jelli [McInnes s Symons, 1991 utn] ................. 203 91. Az RNS-vrusok detektlsa RT-PCR reakcival. Elsszl komplementer DNS (cDNS) ksztse reverz transzkripcival (RT) RNS templtrl, majd a cDNS felszaportsa polimerz lncreakcival (PCR) [McInnes s Symons, 1991 utn] .................................................................................................... 205 92. Az indol-3-ecetsav szerkezeti kplete ....................................................................................... 207 93. A G3 gibberellinsav szerkezeti kplete ..................................................................................... 208 94. A: a citokininbzisok, B: nukleozidok s C: nukleotidok ltalnos szerkezeti kplete ............ 208 95. Az etiln szerkezeti kplete ...................................................................................................... 209 96. Az abszcisszinsav szerkezeti kplete ........................................................................................ 210 97. A zeatin (Z) elektrontkztetses tmegspektruma (a spektrumban csak a legjellegzetesebb fragmentumok szerepelnek). Bi+ = bzision; Mi+ = molekulaion; R.I. = relatv intenzits; m/z = tmeg/tlts arny ........................................................................................................................... 223 98. A nvnyeket befolysol ht stresszhats [Schlee, 1992 utn] ........................................... 232 99. Az aktv oxignformk szerepe a nvnyben lejtszd folyamatok aktivlsban. RP = receptormolekulk, G = G-protein, SA = szalicilsav, SA = szalicilt gyk, BA2H = benzoesav-2-hidroxilz, + = pozitv hats, = negatv hats [Hammond-Kosack s Jones, 1996 utn mdostva] 237 100. Az aktv oxignformk ktfzis termeldse krokoznvny kapcsolatban [Baker s Orlandi, 1995 utn] ....................................................................................................................................... 238 101. Az AOF termeldse (A, B) s sejthall (C, D) a P.s. tabaci (Pseudomonas syringae pv. tabaci) s P.s. gly. (Pseudomonas syringae pv. glycinea) 4-es s 6-os rasszval fertztt dohny- s szja-sejtkultrkban. Inkompatibilis (teli szimblumok) s kompatibilis (res szimblumok) gazdaparazita kapcsolatok [Baker s Orlandi, 1995 utn] ..................................................................................... 239 102. A H2O2 kimutatsa agarlemezes mdszerrel. A: gykereken a baloldali nvny a kontroll, B s C: burgonya-levlkorongokon fell a kontroll lthat mindkt esetben [Wu et al., 1995 utn] .......... 242 103. H2O2 szveti meghatrozsa csranvnybl szvetlenyomatok ksztsvel [Schopfer, 1994 utn] 244 104. Nekrotikus lzik krl keletkez szuperoxid s a NBT reakcija sorn keletkez formazn elsznezdse, dohny mozaik vrussal (tobacco mosaic tobamovirus) inokullt Nicotiana tabacum cv. Samsun NN dohny levlkorongjain [Doke s Ohashi, 1988 utn] ................................................ 246 105. Nicotiana tabacum cv. Xanthi-nc (A), Nicotiana suaveolens (balrl fertztt, jobbrl egszsges, kontroll nvny) (B) s Datura stramonium (C) hiperszenzitv rezisztencija a dohny mozaik vrussal (tobacco mosaic tobamovirus) szemben. Burgonya Y-vrussal (potato Y potyvirus) fertztt Capsicum annuum cv. Bogyiszli szisztemikus tnetei (D) ............................................................................ 252 106. A: a burgonya Y-vrussal (potato Y potyvirus) szembeni hiperszenzitv reakci (az inokullt leveleken kialakul nekrotikus lzik) Solanum tuberosum nvnyen. B: Solanum venturi (BGRC 8237) vad faj reakcija (szisztemikus mozaik) a burgonya X-vrussal (potato X potexvirus) szemben ... 259 107. A transzpozon nyomon kvets lpsei. Az els lpsben a dominns rezisztenciagnt (R gn) homozigta formban tartalmaz, nem-autonm transzpozont hordoz nvnyt olyan nvnnyel keresztezik, amely a transzpozon autonm prjt tartalmazza. A nem-autonm elem az A marker gnt hordozza annak rdekben, hogy biztostsk jelenltt a nvnyekben. Az F1 hibridben a nem-autonm

A vrusok osztlyozsa

xiii Created by XMLmind XSL-FO Converter.

elem transzlokcijt a B marker gn megindul expresszija jelzi. Ezutn tovbbi keresztezsekkel eliminljk a riporter gnt s az autonm elemet tartalmaz kromoszmarszt, illetve szelektljk a mutns, vrusfogkony nvnyeket. P = promter rgi ................................................................ 270 108. Rezisztenciagn-izolls molekulris trkpezs segtsgvel. A: majdnem izogn vonalak analzise (Nearly Isogenic Lines NIL). A dominns rezisztenciagnt hordoz, vrusellenll nvnyt (P1) keresztezik a fogkony fenotpus fajtval (P2). A heterozigta F1 hibridet a fogkony (P2) szlvel visszakeresztezik. Az utdnvnyek kzl kivlogatjk a rezisztens fenotpusakat (heterozigtk), majd azokat jbl a homozigta recesszv (P2) szlvel keresztezik. Ezt a visszakeresztezst tbb genercin keresztl ismtlik, s mindig a dominns, vrusellenll fenotpusra szelektlnak. A kromoszmaprok rekombincija (crossing over) kvetkeztben a hetedik nemzedkben szinte a teljes genom a rezisztenciagnt tartalmaz szk rgi kivtelvel a fogkony szltl (P2) szrmazik. Ezek teht majdnem tkletesen izogn vonalak. B: hasadpopulci-analzis (Bulked Segregant Analyzis BSA). A dominns (rezisztens), illetve recesszv (fogkony) homozigta szlk keresztezsbl szrmaz F1 hibridet nmagval keresztezik. A hasad F2 nemzedk egyedeit fenotpusuk alapjn kt csoportra osztjk. A kromoszmaprok rekombincija (crossing over) kvetkeztben a rezisztenciagnnel azonos kromoszmn lv molekulris markerek trendezdnek. C: a molekulris markereket (polimorfizmusokat) sszehasonltjk a hibrid vonalak fenotpusval, s megkeresik a rezisztencival egytt hasad markereket. Ezek a keresett lkusz kzvetlen krnyezetbl szrmaz szekvenciarszletek, amelyek segtsgvel a genomi knyvtrbl izollhatk a rezisztenciagnek ................................ 272 109. A nvny idegen gnnel trtn transzformlsnak fbb lpsei [Salazar, 1996 utn] ........ 281 110. A pGA 482 alap plazmid. Az uborka mozaik vrus (cucumber mosaic cucumovirus CMV) Trk7-es trzse cDNS klnjrl szrmaz, 1200 bzispr hosszsg rgit, mely a vrus kpenyfehrje gnjt (CP) hordozza, az brn jellt XbaI helyre klnoztk 35S promter s NOS transzkripcis terminl rgi kz. BR = (right border) a T-DNS jobb oldali hatrszekvencija; BL = (left border) a T-DNS bal oldali hatrszekvencija; NptII = neomicin-foszfotranszferz II NOS promter s terminl rgi kztt; Tet = tetraciklin-rezisztenciagn baktriumpromter mgtt .................................................................. 282

xiv Created by XMLmind XSL-FO Converter.

A tblzatok listja

1. Nvnypatogn vruscsaldok s nemzetsgeik szma ................................................................ 10 2. Tospovirusok tvitelben szerepet jtsz vektorok ...................................................................... 12 3. A Nemzetkzi Vrustaxonmiai Bizottsg ltal jonnan jvhagyott vrusrendszer .................... 35 4. Nvenypatogen vrusnemzetsgek s tpustagjainak fontosabb tulajdonsgai ............................. 38 5. A nvnypatogn vrusnemzetsgek tpus vrusfajainak sszefoglal tulajdonsgai1 ................. 44 6. A vrusok magyar s angol nevei, valamint akronmjai1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 ...................................... 52 7. A nvnyvirolgiban hasznlt fontosabb ksrleti nvnyek kdjai1 ......................................... 66 8. A burgonya Y-vrus (potato Y potyvirus) tvitele levltetvekkel (Govier s Kassanis, 1974 utn) 87 9. Burgonya Y-vrus (potato Y potyvirus) s helper komponens tvitelek levltetvekkel (Govier s Kassanis, 1974 utn) ......................................................................................................................... 88 10. Loklis nvny-vrus kapcsolatok ............................................................................................ 106 11. Szisztemikus nvny-vrus kapcsolatok ................................................................................... 107 12. Loklislzi-szmlls latin ngyzet mdszerrel ...................................................................... 111 13. Loklislzi-szmlls fllevl s latin ngyzet mdszerrel .................................................... 112 14. A dohny mozaik vrus s a paradicsom mozaik vrus sztvlasztsa differencil tesztnvnyekkel (Horvth, 1993a utn) ..................................................................................................................... 114 15. Vrusok fenntartsra alkalmas tesztnvnyek s azok inokulcijnak optimlis ideje (Noordam, 1973 utn) ....................................................................................................................................... 115 16. Nhny vrus fenn tarthatsga gazdanvny kben ................................................................ 116 17. A magyar vrusellenrzsi rendszerben hasznlt fs szr indiktorokkal kimutathat szlpatogn vrusok1 .......................................................................................................................................... 120 18. Gymlcsfajok veghzi fs szr biolgiai tesztelse (Bach s Sznyegi, 1996 utn)1 ........ 123 19. A citoplazmatikus s a normlis sejtalkotrszek elsznezdse klnbz festsek alkalmazsakor (Dijkstra s De Jager, 1998 utn) .................................................................................................... 142 20. Nvnyvrusok, amelyekkel szemben monokln antitesteket lltottak el (van Regenmortel s Dubs, 1993 utn mdostva) ..................................................................................................................... 182 21. Az indol-3-ecetsavnak s klnbz szrmazkainak tmegspektrumban elfordul jellegzetes ioncscsok m/z rtkei s a bzisionhoz viszonytott relatv intenzitsuk (zrjelben). IES = = indol-3-ecetsav, Me = metil, TMS = trimetil-szilil, Mi+(Mi-) = molekulaion, Bi+(Bi-) = bzision. .......... 216 22. Citokininvegyletek s szrmazkaik elektrontkztetses tmegspektrumt alkot fontosabb ioncscsok m/z rtkei s relatv intenzitsuk a bzision szzalkban (zrjelben). iP = izopentenil-adenin, [9R]iP = izopentenil-adenin-ribozid, Z = zeatin, [9R]Z = zeatin-ribozid, TMS = trimetil-szilil,

perMe = permetil, Mi+ = molekulaion, Bi+ = bzision. ................................................................. 224 23. Az AOF mrsi mdszereinek sszefoglalsa (Schroeder et al., 1996 utn mdostva) .......... 241 24. Nicotiana tabacum fajtk s trzsek vrusrezisztencija ........................................................... 253 25. A paradicsom vrusrezisztencija (Spaar s Kleinhempel, 1985 utn mdostva) .................... 254 26. A Capsicum genotpusok rezisztencija s a tobamovirus patotpusok kztti kapcsolat (Boukema, 1984 utn) ....................................................................................................................................... 255 27. A paprika komplex vrusrezisztencija (Spaar s Kleinhempel, 1985 utn) ............................. 256 28. Paprikafajtk tobamovirus-ellenllsga .................................................................................. 257 29. A genetikai bzis (Solanum fajok) vrusrezisztencija (Horvth, 1988 utn) 1, 2, 3 ................ 258 30. Fontosabb rezisztenciaszablyoz gnek (Foxe, 1992 utn) .................................................... 259 31. A burgonya X-vrus (potato X potexvirus) trzsek csoportostsa (Foxe, 1992 utn) .............. 260 32. j burgonyafajtk nemestsnek vzlata (Ross, 1986 utn mdostva) .................................. 263 33. Protoplaszt-tenyszts s a nvnyregenerls krlmnyei .................................................... 268 34. A kpenyfehrjegnnel induklt vrusrezisztencia a transzgnikus nvnyekben (Miller s Hemenway, 1998) ............................................................................................................................................... 274 35. Az Eurpai Kzssgben el nem fordul krokozk1 ........................................................... 286 36. Az Eurpai Kzssgben el nem fordul, de az Eurpai Kzssgre nzve fontos vrus, vrusszer s viroid krokozk ............................................................................................................................. 288 37. Az Eurpai Kzssgben elfordul s az Eurpai Kzssgre nzve fontos krostk ......... 289 38. Eurpai karantn krostk (vrusok, vrusszer krokozk s viroidok) az EPPO-rgiban (Smith et al., 1997 utn) ................................................................................................................................. 292

1 Created by XMLmind XSL-FO Converter.

1. fejezet - Elsz A Nvnyvrusok s virolgiai vizsglati mdszerek c. egyetemi tan- s kziknyv megrst az tette szksgess, hogy a Pannon Agrrtudomnyi Egyetem Georgikon Mezgazdasgtudomnyi Karnak (Keszthely) Nvnyvdelmi Intzete elnyerte az Orszgos Akkreditcis Bizottsghoz benyjtott plyzatt Nvnyvirolgiai Iskola (Ph.D.-kpzs) megteremtsre. Tekintettel arra, hogy magyar nyelv vrusmdszertani kiadvny eltekintve a korbbi vekben megjelent nvnyvirolgiai knyvekben s folyiratokban kzztett szkebb kr ismeretektl nem ll korszer formban rendelkezsre a Ph.D. hallgatk szmra, ezrt nlklzhetetlennek tartottuk ennek a knyvnek a kiadst. gy gondoljuk, hogy Ph.D. hallgatinkon kvl az agrrmrnk, az agrrkmikus agrrmrnk, a nvnyvdelmi szakmrnk s a nvnyorvosi szak hallgatinak rgi kvnsga teljesl azzal, hogy a Nvnyvrusok s virolgiai vizsglati mdszerek c. tanknyv megjelenik. Remljk, hogy ezt a knyvet nemcsak az agrregyetemi s fiskolai kpzsben, hanem a biolguskpzsben rszt vev hallgatk is rmmel fogadjk.

Az egyetemi tanknyvet kigondol szerkesztk rszrl taln mersz vllalkozsnak tnhet, hogy a mdszertani knyv megrst nagyobb rszben virolgus Ph.D. hallgatinkra bztuk. Ezzel azt kvntuk elrni, hogy sajt tudomnyterletk tmiban minl jobban elmlyedjenek, megismerjk a legalapvetbb mdszereket, s azokat gy rjk meg, ahogyan meglmodtk egy hazai, mg nem ltez tanknyvben. Az egyes fejezetek vgn megtallhat Irodalom az ismeretek szlesebb kr elsajttsban k-vn segtsget nyjtani.

A szerkesztk s a szerzk ksznetket fejezik ki mindazoknak, akik a knyv kziratnak elkszlte sorn hasznos szrevteleket tettek. A kzirat elksztsben, szerkesztsben nyjtott technikai segtsgrt hls ksznetnket fejezzk ki Hun Lajosn, Ihsz Zoltnn s Molnr Katalin munkatrsainknak. Messzemen ksznetnket fejezzk ki Balzs Ervin, Barna Balzs, Kirly Zoltn s Klement Zoltn professzor uraknak azrt, hogy a Pannon Agrrtudomnyi Egyetem Virolgiai Doktori Iskola munkjban kzremkdtek s segtettk a virolgus doktorjelltek tudomnyos tevkenysgt s e tanknyvben val kzremkdst. Ksznetet mondunk azoknak a hazai s klfldi kollginknak s kiadknak, akik eredeti s mr megjelent rtkes brikat rendelkezsnkre bocstottk. Nem utols sorban ksznetettel tartozunk a knyv lektorainak, akik szrevteleikkel s tancsaikkal gazdagtottk a knyvet. Ksznet illeti a Mezgazda Kiadt s minden prtfog tmogatt, hogy e knyv megjelentetst elsegtettk.

A Nvnyvrusok s virolgiai vizsglati mdszerek c. egyetemi tanknyvet azzal a gondolattal bocstjuk tjra, hogy felhvjuk vele a figyelmet a rohamosan fejld nvnyvirolgia fontossgra s elsegtjk az egyetemi hallgatknak s a Doktori Iskola Ph.D. hallgatinak munkjt, ismereteik gyarapodst, tovbb a tudomnyba vetett hitk megrzst s tovbbadst.

KeszthelyBudapest, 1998 novemberben

Horvth Jzsef Gborjnyi Richard

intzetigazgat egyetemi tanr, egyetemi magntanr,

az MTA lev. tagja az MTA doktora

Pannon Agrrtudomnyi Egyetem

Magyar Tudomnyos Akadmia

Nvnyvdelmi Intzet, Nvnyvdelmi Kutatintzete,

Keszthely Budapest

2 Created by XMLmind XSL-FO Converter.

2. fejezet - Bevezets a virolgiba

1. A vrusok jelentsge

A vrusok az lvilg olyan paraziti, amelyek nvnyekben, emberekben, llatokban, rovarokban s klnbz mikroorganizmusokban tbbnyire slyos megbetegedseket idznek el. A vrusbetegsgek (himl, veszettsg, srgalz, sertspestis, Eupatorium srgalevelsg, tulipn szntrs) hossz idk ta ismertek, br etiolgiai kutatsuk s fertzkpessgk bizonytsa csak a XIX. szzad vgn kezddtt el. Finlay 1881-ben igazolta a srgalz vruskrokozjnak tvitelt Aedes aegypti cspsznyoggal, Mayer 1886-ban a dohny mozaik betegsget okoz vrus tvitelt fertz dohnynvny szvetnedvvel, Loeffler s Frosch pedig 1898-ban bizonytotta a szarvasmarhk szj- s krmfjs-betegsg vruskrokozjnak szrhetsgt. Jelenlegi ismereteink szerint a vrusok a Fldn mindentt elfordulnak. Csupn Eurpban mintegy ezer nvnyi vrusbetegsg ismert; a szilva himl vrus (plum pox potyvirus) a volt Jugoszlvia terletn mintegy 16 milli szilvaft betegtett meg s puszttott el. A nvnyvrusok ltal elidzett termsvesztesgekre vonatkozan (tbb mint 30 vrus esetben) Pennazio et al. (1996) kzlt legjabban sszefoglal tanulmnyt. Az ember- s llatpatogn influenzavrusok (A s B tpus) 810 venknt igen jelents epidmikat, nha pandmikat okoznak. A XX. szzadban hrom, nagy morbiditssal s gyors terjedssel jr vrus-influenzapandmit figyeltek meg. Az els az n. spanyolntha volt, amely 1918 prilisban lpett fel, s mintegy 20 milli ember hallt okozta. A msodik, az n. zsiaiinfluenza-jrvny 1957-ben alakult ki (Bakcs s Farkas, 1965). A harmadik jrvnyt amely 1968/1969-ben az Amerikai Egyeslt llamokban lpett fel az influenzavrus n. Hongkong tpusa idzte el.

2. A vrusok morfolgija s felptse

A vrusok olyan fertzkpes, szubmikroszkopikus obligt sejtparazitk, amelyeknek szfrikus (izometrikus) formi 20200 nm tmrjek, megnylt plcika, ill. fonl alak formi 1002000 nm hosszsgak s 1020 nm tmrjek. A vrusok nagyobb rsze heliklis szimmetrij; egyes baktriumvrusok (bakteriofgok) binlisak (1. bra). A geminivirusoknak iker virionjaik vannak. A vrusok a genetikai informcit hordoz egyszl, ktszl, lineris vagy cirkulris ribonukleinsavbl (RNS) vagy dezoxiribonukleinsavbl (DNS) s a nukleinsav vdelmi funkcijt ellt fehrjeburokbl (kapszid) llnak. A nukleinsav s a kapszid egyttesen alkotja a nukleokapszidot. Az ilyen sszettel vrusokat burok nlkli (non-enveloped) vrusoknak nevezzk [pl. dohny mozaik vrus (tobacco mosaic tobamovirus), rovarpatogn iridovirus stb.]. A vrusok egy msik rsznl a nukleokapszidot mg egy kls glkoproteid burok (peplon) veszi krl [pl. paradicsom bronzfoltossg vrus (tomato spotted wilt tospovirus), valamint nhny nvny- s rovarpatogn rhabdovirus]. Egyes vrusok mg klnbz mrtkben lipideket, cukrot s nyomokban poliaminokat is tartalmaznak.

1. bra - A vrusok sematikus brzolsa. A: heliklis dohny mozaik vrus (tobacco mosaic tobamovirus); B: izometrikus, kubiklis szimmetrij tarlrpa srga mozaik vrus (turnip yellow mosaic tymovirus); C: bakteriofg (Echerichia coli T2-fgja)

3. A vrusok replikcija

Bevezets a virolgiba

3 Created by XMLmind XSL-FO Converter.

A vrusok sajt anyagcservel nem rendelkeznek, replikcijukhoz a gazdasejt fehrje- s nukleinsav-szintetizl kpessgt hasznljk fel. A replikci sorn a gazdasejt tevkenysgt gy programozzk t, hogy a sejt sajt anyagai elsegtsk j virionok bioszintzist (produktv infekci). Bizonyos ember-, ill. llatpatogn vrusok kpesek a gazdasejt rosszindulat talaktsra is (malignus transzformci); ebben az esetben a sejtek a rkos sejtekhez vlnak hasonlv. Produktv infekci esetn a vrusok replikcija hat szakaszra oszthat: (1) adszorpci, (2) penetrci, (3) dekapszidci, (4) eklipszis, (5) maturci, (6) kiszabaduls. Az adszorpcis fzisban a sejt felszne s a virion kztt stabil ktds jn ltre. A penetrci sorn a virion klnbz mechanizmusokkal (nvnyvrusoknl vektorok segtsgvel, llatpatogn vrusoknl fagocitzis-szer folyamattal, baktriumvrusok esetben nukleinsav-belvssel) jut be a sejtbe. A penetrci utn a virion dekapszidldik. E folyamatban egyes vrusoknl n. kapszid fehrjket bont enzim vesz rszt, ms vrusoknl (pl. influenzavrus) pedig a peplon egyesl a sejtmembrnnal s a citoplazmba csak a nukleokapszid hatol be. Az eklipszis szakaszban a vegetatv vrus nukleinsavban trolt informcii nukleinsav-polimerzok segtsgvel j nukleinsavak kpzdst eredmnyezik (replikci). Hasonlan fontos a nukleinsavat bont nuklezoknak (RNzok, DNzok) s a nukleinsavtrseket sszekapcsol, valamint a vrusnukleinsavnak a sejtgenomba trtn beptst vgz ligzoknak a szerepe. A vrusnukleinsav replikcijval prhuzamosan kezddik a vrusfehrjk szintzise. A maturcis (rsi) szakaszban a szintetizldott nukleinsav-, a fehrje- s az egyb komponensek rett, fertz vrusokk egyeslnek. Az sszepls az izometrikus RNS-tartalm vrusoknl a nukleinsav- s a fehrjealegysgek fizikokmiai konfigurcijbl addan csak egyfle virion kialakulshoz vezethet. Ms vrusok spontn is aggregldhatnak, de ismertek olyanok is (pl. adenovirusok), amelyeknek az alkotrszei nem tudnak minden esetben komplett virionn sszeplni, s n. res kpenyfehrje-burkok jnnek ltre. A vrusok replikcijrl A vrusgenom szervezdse s a vrusok replikcija cm fejezetben tallhatk rszletes ismeretek.

4. A vrusos betegsgek kialakulsa s a tnetek (szimptmk)

A vrussal fertztt gazdaszervezetben morfolgiai, citolgiai, fiziolgiai stb. elvltozsok figyelhetk meg, amelyek kls s bels tnetekben nyilvnulnak meg. A nvnyvrusok a fertztt sejtek plazmodezmin keresztl hatolva fertzik meg a szomszdos sejteket (480 m/ra terjedsi sebessg), majd a szlltszvetekben, a floemben s a xylemben 0,11,8 cm/ra sebessggel kpesek terjedni. A hiperszenzitven reagl nvnyi szvetekben a vrusok terjedse a nekrotizld sejtek miatt megll. Az llatpatogn vrusok a nyirok- s vrednyekben vagy az idegplykon keresztl terjednek. A rovarpatogn vrusok orlis felvtelt kveten a gyomorba jutva lokalizldhatnak, vagy a hemolimfn keresztl ms szvetbe (zsrszvet, szaportszervek, idegrendszer) jutnak. A tnetek a fertzst kvet nhny nap mlva megjelenhetnek (nvny-, ember- s llatpatogn vrusok), mg a bakteriofgok esetben nhny perc alatt. Ismeretesek n. lass vrusok is, amelyek nhny hnap (veszettsg vrus), ill. 12 v alatt (fs szr nvnyek vrusai) manifesztldnak. A nvnyvrusok kls tnetei szn- s formaelvltozsokban jutnak kifejezsre (abnormlis kalluszkpzds, sejtfalvastagods, amorf s kristlyos zrvnyok). Az ember- s llatpatogn vrusok ltal elidzett betegsgtnetek (lz, fej- s izomfjs, tvgytalansg, fokozott vladkkpzds), hasonlan a nvnyvrusok tneteihez, nem specifikusak. A legfontosabb betegsgszindrmk az albbi csoportokba sorolhatk: idegrendszeri, lgti, lgzszervi, br- s nylkahrtya-, szem-, mj-, emsztszervi, nyirok- s lzas betegsgek.

5. A vrusok tvitele, terjedse

Minden nvnyvrus tvihet fogkony gazdanvnyre kertszeti oltssal, de termszetes terjedsk fkppen vektorokkal (levltetvek, kabck, fonlfrgek, talajban l gombk) s parazita nvnyekkel (Cuscuta spp.) trtnik. A vektormentes tvitelen kvl a vegetatv szaportszervekkel (gum, hagyma, rizma), a generatv szaportszervekkel (mag, pollen) s a mechanikai ton trtn terjedsnek van jelentsge. Az ember- s llatpatogn vrusok terjedsben a kontakt tvitelnek, a csepp- s brfertzsnek, a transzplantcinak s a passzzsnak (tojs, anyatej) van jelentsge. A vrusok igen szles kr elterjedse, tg gazdakre, valamint a kedvez kolgiai krlmnyek sok esetben idben s trben egybees epidmik kialakulst, vagy olyan pandmik kialakulst eredmnyezi, amelyek kiterjedse s idtartama hatrtalan. Az epidmik s pandemik kialakulsban az ember direkt s indirekt szerepn kvl igen fontos szerepet jtszik a nvnyek esetben a rezisztencia hinya, a megnvekedett nemzetkzi forgalom stb. Az ember- s llatpatogn vrusoknl az koszisztmban bekvetkezett vltozsok, a szles krben elterjedt hzillatember kapcsolattal egyttjr vz- s tpllkkontamincik, valamint a vektorpopulcik ltal terjesztett szmos vrus olyan betegsgek epidmijt s pandemijt kpes elidzni, mint pl. a veszettsg, influenza stb.

Bevezets a virolgiba

4 Created by XMLmind XSL-FO Converter.

6. A vrusok diagnosztikja

Vrusbetegsgnek csak az tekinthet, aminek vruskrokozjt sikerl izollni, antignjeit a gazdaszervezetben kimutatni s/vagy a betegsget mestersges inokulcival reproduklni. A vrusfertzs kvetkeztben fellp tnetek (szimptmk) alapjn bizonyos vrusokra lehet kvetkeztetni, de a gazdavrus reakcikat befolysol krnyezeti tnyezk jelents volta, tovbb a szmos ltens s lass fertzs (slow vrusok) miatt a szimptomatolgia egyedl igen megbzhatatlan a vrusok diagnosztikjban. A vrusok mestersges tvitele tesztnvnyekre, tesztllatokra, valamint olyan objektv diagnosztikai eljrsok, mint pl. az ELISA-mdszer, a komplementktsi reakci, a hemaglutinci, a neutralizci, az elektronmikroszkpia, az immuno-elektronmikroszkpia, az RNS-DNS hibridizci, a polimerz lncreakci (PCR) stb. jelents szerepet jtszanak a vrusok azonostsban. A vrusok fizikai tulajdonsgain (hinaktivlsi pont, in vitro eltarthatsg, hgthatsg stb.) alapul diagnosztika megbzhatatlan.

7. A vrusok elleni vdekezs

A vrusokkal mint fertz betegsgekkel szembeni vdekezs kt csoportba oszthat: (1) megelzs (profilaxis) s (2) gygyts (terpia). A nvnyvrusokkal szembeni preventv eljrsok kzl a rezisztencira nemestsnek (rezisztens fajtk ellltsnak), a vrusmentes szaportanyagok hasznlatnak, a fertzsi forrsok (gyomnvnyek), a vrustvitelben szerepet jtsz vektorok elpuszttsnak s a karantn rendszablyok betartsnak a legnagyobb a jelentsge. jabban eredmnyeket rtek el a gyenge vagy gyengtett vrustrzsek preimmunizlsval kapcsolatban. A keresztvdettsg (cross protection) jelensg nven ismertt vlt biolgiai vdekezs lnyege az, hogy egy vrus gyenge, enyhe megbetegedst okoz trzse vdelmet nyjt ugyanazon vrus slyos betegsget elidz trzsnek fertzsvel szemben, s ez utbbi vrus szaporodsa is jelentsen cskken. A biotechnolgiai mdszerek kzl figyelmet rdemel a kpenyfehrjegnnel, a szatellit RNS-sel, az rtelmetlen (antiszensz) nukleinsavval s a defektv interferl molekulkkal kialaktott induklt rezisztencia. A biotechnolgiai mdszerek alkalmazst a nvnyvrusok ellen azok az elmlt vekben trtnt biolgiai, biokmiai s molekulris biolgiai felfedezsek tettk lehetv, amelyekkel ismertt vlt az egyes szervezetek mkdst ellenrz gnek megismerse s megvltoztatsa. A gnsebszeti, ill. a gntltetsi mdszerek felhasznlsval forradalmi vltozsok kvetkeztek be a mezgazdasgban s a nvnyvdelemben. Egyes vlemnyek szerint 12 vtized mlva a vilg lelmezsben szerepet jtsz 29 f tpnvny 80%-a genetikailag mdostott, azaz transzgnikus nvny lesz. A transzgnikus nvnyek ellltsval kapcsolatban rszletes adatok tallhatk A vrus-ellenllsgra nemests biotechnolgiai mdszerei c. fejezetben.

A terpiai eljrsok kzl fkppen a hterpinak s a regenercis terpinak (merisztma kultra) van jelentsge. A nvnyvrusok s ltalban a vrusok elleni kemoterpit (vrusellenes anyagok) igen nagy mrtkben htrltatja az a tny, hogy a vrusoknak nincs nll anyagcserjk, ezrt az in vivo vgzett kemoterpikumok nemcsak a krokozt, hanem a gazdasejtet is krostjk. Ennek ellenre egyes vrusellenes szerek (pl. Ribavirin, Tiazofurin, Pyrazofurin) tpoldatba adsval sikerlt egyes vrusok [pl. burgonya X-vrus (potato X potexvirus), burgonya S-vrus (potato S carlavirus)] szaporodst merisztma kultrban gtolni, vagy megszntetni. jabban metil-benzimidazol-2il-karbamt tartalm gombal szerekkel is (pl. Benlate, Bartstin) sikerlt mrskelni egyes nvnyvrusok tnettani hatst.

A nvnyvrusok elleni vdekezssel kapcsolatos antivirlis, kmiai anyagokrl Gborjnyi s Tbis (1986a,b), Hansen (1988, 1989), Schuster (1988), Kluge et al. (1990), Tallczy s Gborjnyi (1990), Yordanova et al. (1996), valamint Horvth (1999) munki adnak sszefoglal ttekintst.

Az ember- s llatpatogn vrusok elleni preventv vdekezsben az a lnyeges klnbsg, hogy a gerincesekben, belertve az embert is, a vrusfertzsre immunreakci lp fel, amelyet igen hatsosan lehet felhasznlni. A preventv vdekezs a vrus terjedsnek megakadlyozsra (hygiene, ferttlent rendszablyok betartsa, vektorok elleni vdekezs, az emberre veszlyes llati gazdk eliminlsa), vdoltsokra, premunizlsra s a karantn-rendszablyok betartsra terjed ki, mg a terpia (gygyts) a tneti kezelsre s a kmiai gygytsra szortkozik. Az aktv immunizls (vdolts) humorlis immunitst s a cellulris immunreakci aktivlst induklja, ezltal a legfontosabb profilaktikus eljrs. Ilyen pl. az influenza elleni vdolts (kisgyermekeknek, 65 v feletti s veszlyeztetett szemlyeknek), amely 1 vig, vagy a srgalz elleni vdolts (fertztt terletekre utazknak), amely 10 vig jelent vdettsget. A jrvnyos gyermekbnuls ellen az 1970-es vekben bevezetett Kiterjesztett Immunizcis Program (Expanded Programme on Immunization = EPI) eredmnyeknt a WHO becslse szerint tbb mint 400 ezer gyermeket sikerlt megmenteni attl, hogy nyomorkk vljon, s remlhetleg ez a jrvnyos betegsg az ezredfordulra megsznik. A premunizls (nem specifikus vdelmi szisztma) mind profilaktikusan, mind terpikusan rvid

Bevezets a virolgiba

5 Created by XMLmind XSL-FO Converter.

idej vdelmet jelent az emberre s az llatra egyarnt. Ezt igazoljk az interferonnal vgzett kutatsi eredmnyek, amelyeket a klnbz daganatokat elidz vrusok ellen hasznlnak. Az interferon nincs hatssal a vironra; hatst gy fejti ki, hogy egy msik mRNS transzkripcijt depresszlja. Ez a mRNS a riboszmkban egy sejtfehrjnek (antivirlis protein, AVP) a transzlcijt segti el, ami gtolja a vrusfehrjk transzlcijt gy, hogy a vrus-mRNS-t nem engedi a riboszmkhoz ktdni. Szles kr hasznlatnak gtat szab a toxikussg, a toleranciafzis s a szelektivits (arra a szervezetre hat, amely termelte). A tneti kezelsre irnyul terpia