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TEST DE COOMBSTEST DE COOMBS

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GENERALIDADES

De los sistemas serolgicos para demostrar la presencia de antgenos

o anticuerpos de grupos sanguneos, la Prueba de Coombs o

antiglobulina humana es considerada como la ms eficiente y de

mayor valor en el Banco de Sangre.

Principio de la prueba:Detectar inmunoglobulinas de la clase IgG y/o fracciones del

complemento ( C3d ) unidos a los G.R.

Obtencin:

El reactivo de antiglobulina se prepara inyectando a conejos

gamma globulina humana purificada para obtener suero

antiglobulina, y otras son inyectadas con componentes purificados

del complemento ( C3 ) para producir anticuerpos especficos contra

ellos .

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FUNDAMENTOS DE LA PRUEBA DE COOMBS

Los anticuerpos y complemento humano son globulinas y

adems son diferentes a otras especies; por lo tanto, se

comportan como antgenos cuando se inyectan a otras

animales.

Si un animal es inyectado con globulinas humanaspurificadas o con suero total, este animal elaborar

anticuerpos contra ellas, estos anticuerpos tendrn

especificidad antiglobulina humana.

El suero antiglobulina humana ( Suero de Coombs )

reaccionar especficamente contra las globulinas humanas.

Si los G.R. estn sensibilizados por las inmunoglobulinas, el

suero de Coombs se combinar con ellas.

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MECANISMO DE ACCION DEL REACTIVO

ANTIGLOBULINA HUMANA

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GENERALIDADES

La sensibilizacin de los G.R. se puede producir de dos formas:

a) In vivo, es decir, cuando la reaccin del antgeno con su

correspondiente anticuerpo se efecta en el organismo,

cuando ambos estn circulando como sucede, por ejemplo, en

caso anemias hemolticas autoinmunes, enfermedad

hemoltica del recin nacido, etc.

b) In vitro, la sensibilizacin de los G.R. por el anticuerpo se

realiza en un tubo de ensayo en el laboratorio. Si en el suero

existen anticuerpos contra los antgenos presentes , seproducir la reaccin antgeno-anticuerpo y los G.R.

quedaran sensibilizados.

Para demostrar la sensibilidad de los G.R. sea in vivo o in vitro

existen dos modalidades en la prueba de antiglobulina

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PRUEBA DE ANTIGLOBULINA DIRECTA

Detecta la sensibilizacin de G.R. in vivo. Tiene valor dx. en:

* Enfermedad hemoltica del recin nacido* Anemia hemoltica autoinmune

* Anemia hemoltica y

sensibilizacin inducida por drogas *

Investigacin de reacciones transfusionales.Procedimientono

Interpretacin:

a) Si la prueba de Coombs muestra aglutinacin, se interpretapositiva, significa que hubo sensibilizacin de los G.R. in

vivo, se seala en cruces, vg. 4 +

b) Si no hubo aglutinacin, la prueba es negativa y significa

que no existe autosensibilizacin eritroctica. La prueba

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COOMBS DIRECTO

PROCEDIMIENTO

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PREPARACIN PARA LA PRUEBA

a. Lavar los eritrocitos del paciente cuando menos 3

veces en solucin salina con una concentracin al 4 %

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Adicin del SueroAnti-Humanoa. Colocar en un tubo de ensayo una a dos gotas del suero deCoombs

b. Agregar una gota de eritrocitos lavados al tubo de ensayo

c. Mezclar bien con una suave agitacin. Centrifugar 20 seg. a

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3 REACCIN

a. Resuspender los eritrocitos para ver aglutinacin

macroscpicab. Una reaccin ne ativa confirmarla or medio de

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4 INTERPRETACIN

a. TUBO SUPERIOR: Aglutinacin eritrocitos cubiertos con

anticuerpo

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PRUEBA DE COOMBS INDIRECTAPermite detectar G.R. sensibilizados in vitro. El suero en estudio es

incubado con los G.R. por el tiempo adecuado, luego se lavan para

eliminar anticuerpos y otras inmunoglobulinas que no se hanfijado en el eritrocito.

Se investiga anticuerpos irregulares en el suero

La deteccin de anticuerpos presentes en el suero se realiza con:

a) G.R. especialmente seleccionados: clulas detectaras, en las cuales

se encuentran presentes los antgenos de grupos sanguneos

correspondientes a los anticuerpos de mayor frecuencia e

importancia clnica.

b) G.R. de gentica conocida ( panel ). Se usa despus de haber

demostrado anticuerpos irregulares mediante las clulas

detectoras.

c) Con G.R. desconocidos como en la Prueba de compatibilidad.

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1 PREPARACIN PARA LA PRUEBA

a. Lavar G.R. del donante en solucin salina normal con unaconcentracin al 4 %

b. Coloque dos gotas del suero del receptor en cada uno de los

EN IBILIZ CIN DE

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2SENSIBILIZACIN DE

LOS ERITROCITOS

a. Agregue una gota de eritrocitos lavados a cada uno de los

tubos de ensayob. Mezcle con suave a itacin e incube durante 15 a 60

LAVADO DE LOS ERITROCITOS ANTES DE

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3LAVADO DE LOS ERITROCITOS ANTES DE

LA PRUEBA DE COOMBS

a) Lave los eritrocitos tres veces con una solucin salina

normal, decantando tanta solucin como sea posibledespus del ltimo lavado

ADICIN DEL SUERO

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4ADICIN DEL SUERO

ANTI-HUMANO

a) Agregue una o dos gotas del suero de Coombs.

b) Mezclar bien y centrifugar y resuspender los eritrocitos.Observar si hay aglutinacin.

c) Una reaccin negativa puede ser confirmada por

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5 INTERPRETACIN

TUBO SUPERIOR: Aglutinacin Prueba cruzada mayor

incompatible

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PRUEBA DE COOMBS INDIRECTAInterpretacin

a) Si hay aglutinacin: prueba de Coombs indirecta positiva,

presencia de anticuerpos irregulares en el suero.

b) Si no hay aglutinacin : Coombs indirecto negativa. Es vlido el

resultado si la prueba control de Coombs es positiva, y si esta

ltima es negativa, la prueba es invlida. Debe repetirse el

procedimiento.

Indicaciones

* Como screening en: embarazo, donantes de sangre,

*Pacientes que est recibiendotransfusiones o ya las ha recibido

* Identificar cualquier

anticuerpo encontrado en el screening

* Pruebas decompatibilidad *

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RESULTADO DE TECNICAS DE AGLUTINACION Y DE

ELISA EN PACIENTE CON PRUEBA DE COOMBS

NEGATIVA

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