3. Bioeconomia y Metabolismo_2012

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El metabolismo y sus productos derivadosTemario1. De la refinera a la Biorefinera Biocombustibles Plataformas qumicas 2. Qumica de vas metablicas Energa libre y poder reductor Glicolisis Metabolismo fermentativo Ciclo TCA Fosforilacin oxidativa Va de las pentosa fosfato Resumen del metabolismo primario de glucosa 2. Qumica de vas metablicas Vas principales,vas divergentes y vas convergentes. Producto:intracelular - extracelular. Concepto de red metablica Ej : Gliclisis Sustrato: glucosa Producto: piruvato Estequiometra (respecto de C) C6H12O62 C3H4O3 2.1. Energa libre de Gibbs y poder reductor Ssi AGR 0 tambin posibles al acoplarse a otras con AGR< 0. En la clula, ATP. Estructura de los3adenosina-5-nucleotidos Termodinmica del ATP C T amol kJ Smol kJ Hmol kJ GP ADP ATPoaq O H aq P aq ADP l O H aq ATPorororii 3734205 , 300) ( ) ( ) ( ) ( ) (1 1 1 3 2=+ = A = A = A= + + + + ++ Reacciones acopladas con ATP permiten alcanzar condiciones termodinmicamente favorables. Ej:Glc + ATP----}Glc-6-P + ADPArG= - 16.7 kJ mol-1 ATP NADP+ Anabolism Catabolism Growth Triose-P Tetraose-P Pentose-P Hexose-P PEP Pyruvate AcSCoA o-KG SuccSCoA OAA proteins nucleicacids complex lipids ------------------- membranes walls organelles Fat CO2 Protein Carbohydrates Amino acids Nucleotides etc. ADP NADPH Es el transportador de energa libre, entre reacciones de produccin-energa y aquellas de utilizacin-energa. Rol del ATP en el metabolismo ATP: moneda energtica de la clula Compound ( )1A mol KJG pHTemperature (C) (a) High-energy compounds ( )( )( )AA O P H P A ATP ATPcoenzyme Succinylcoenzyme Acetylphosphate Argininephosphate Creatinephosphate Acetyllpyruvate Phosphoenolinkage Dlinkagelinkage22337 2 2344,,,| o| o | (b) Low-energy compounds

AMP2222266 cos1 cos1phosphate Fructosephosphate e Gluphosphate e Gluphosphate Glycerol

36.0 36.9 32.6 34.7 55.6 43.9 43.5 49.4 34.3 32.6 9.6 9.2 19.9 12.6 14.6 7.0 7.0 7.0 7.0 7.0 7.0 7.0 7.0 7.0 7.0 7.0 8.5 8.5 8.5 8.5 20 20 20 20 20 25 20 20 - - 20 38 38 38 38 El Sistema Adenilato ATP, ADP,AMP(y PPi) Suconcentracin-ymuchasveceslaproporcin ATP/AMP - juegan un rol regulador sobre reacciones anablicas-catablicas. Concentracin celular adenilatos: 0.5 5 mM Turnover ATP: 1-10s ATP +AMP 2ADPAdenilato quinasa Carga energtica de la clula | | | || | | | | | AMP ADP ATPADP ATPEC+ ++=21Concentraciones relativas de ATP, ADP y AMP como funcin de la carga energtica, suponiendo que la reaccin de la adelinato quinasa est en equilibrio.Esquemticamente, Respuesta terica para la carga energtica de enzimas regulatorias en las vas metablicas, en funcin de la regeneracin ( R) y la utilizacin (U) de ATPCerca de EC = 1,las reacciones que generan ATP estn inhibidas y las que lo utilizan estn activas. Ejemplo:Tabla con concentraciones y valores de EC vs growth rates en Lactoccus lactis NADH: moneda de poder reductor Principalmente en reacciones catablicas RH2 + NAD+= R + NADH + H+ Ej: C6H12O6 + 2NAD+2 C3H4O3 + 2NADH + 2H Carga catablica Ratio NADH/NAD fuertemente regulado 0,03 < CC < 0,07

CCNADHNADH+ NADOtras monedas GTP (sntesis proteica) NADPH (reacciones anablicas) FADH2 Ojo: en Escherichia coli y otros miroorg: NADH + NADP+ NADPH + NAD+ (transhidrogenasa) (no existe en Saccharomyces cerevisiae) Bases de datos de reaccionesmetablicas EXPASY /www.expasy.ch) KEGG (www.genome.jp/kegg/) BRENDA (www.brenda-enzymes.org) para propiedades de enzimas. 2.2. La Gliclisis Metabolismo Celular y Formacin de Productos: La caja gris Sustratos Macromolculas Proteinas Building blocks Sustratos Biomasa Precursores metablicos Productos metablicos Transporte FuelingBiosntesis Polimerizacin Ensamble Transporte Secrecin Metabolismo Celular y la Formacin de Productos: La caja gris SustratosSustratos Precursores metablicos Productos metablicos Fueling 1- Generacin de Energa 2.- Generacin de poder reductor 3.- Sntesis de metabolitos intermediariosObjetivos Fueling Va deEmbden-Meyerhof-Parnas Glucosapiedra angular de carbono y energa Concentracin de intermediarios y cofactoresde la gliclisis en el eritrocito humano Metabolite/co-factorConcentration ( ) M Metabolite/co-factorConcentration ( ) M Glucose(GLC)50002-Phosphoglycerate (2PG)29.5 Glucose-6-P (G6P)83Phosphoenolpyruvate (PEP) 23 Fructosa-6-P (F6P)14Pyruvate (PYR)51 Fructose-1,6 bisP (FDP)31ATP1850 Dihydroxyacetone P (DHAP) 138ADP138 Glyceraldehyde-3-P (GAP) 18.5Pi1000 3-Phosphoglycerate (3PG) 118 The data are taken from Lehninger (1975). Equilibrio Qumico : Recordatorio DrG( ) DrGo( ) + RT lnQ (Ec 3)con Q P piYpiP siYsi; (Ec 4)DrGo( ) - RT lnKeq(Ec 5)ArG (kJ mol-1) -16.7 +1.7 -14.2 +24.0 ArG (kJ mol-1) -33.3 -2.7 -18.7 +0.7 ArG (kJ mol-1) +7.7 -18.5 +4.4 +1.8 -31.4 ArG (kJ mol-1) +2.7 0 +1.0 +1.2 -23.0 Ecuacin estequiomtrica de la gliclisis (Glucosa + 2ADP + 2~P + 2NAD+) + (2Pyr + 2ATP + 2NADH) = 0 2.3 Metabolismo fermentativo Re-oxidacin de NADH Distintas estrategias microbianas S. cerevisiae: sntesis de etanol bacterias lcticas:sntesis de cido lctico E. coli: fermentacin cido mixta

Metabolismo Fermentativo

1. Sntesis de lactato en bacterias lcticas(homofermentativas) Lactato + NAD+ - Piruvato NADH H+ = 0 2. Metabolismo cido-mixtoenEscherichia coli PiruvatoLactato CO2 + H20 Acetil-CoA Formiato Acetil-P Acetaldehido EtanolAcetato NADH NAD+ NAD+ NADH NADH NAD+ ATP ADP 3. Sntesis de etanol en Saccharomyces cerevisiaeOjo: estafermentacin produceotros productos metablicos. C6H12O62C3H6O3 +2ATPC6H12O6C3H6O3 +CHO2 + CO2 + C2H4O2 + C2H5OH +(2+ )ATP1. Fermentacin homo-lctica:2. Fermentacin cido-mixta: 3. Fermentacin alcohlica: C6H12O62C2H6O +2CO2 +2ATPProductos de fermentacin en S.cerevisiaeGlucosa 6 P Triosa - P Piruvato Glicerol Etanol + CO2 OxaloacetatoEtanol CO2 Succinato Succinato Azcar Glucosa 6 P Triosa - P Piruvato Glicerol Azcar Etanol + CO2 OxaloacetatoEtanol CO2 Succinato Succinato Productos de fermentacin en S.cerevisiaeGlucosa 6 P Triosa - P Piruvato Glicerol Etanol + CO2 OxaloacetatoEtanol CO2 Succinato Succinato Productos de fermentacin en S.cerevisiaeAzcar glucosa biomasa ADP ATP Fermentacin alcohlica (Guadalupeet al. 2010) glucosa etanolbiomasa ADP glucosa ATP Fermentacin alcohlica (Guadalupeet al. 2010) glucosa etanolbiomasa glucosa NAD+ NADH glicerol glucosa Fermentacin alcohlica ADP ATP (Guadalupeet al. 2010) Sntesis de glicerol y disipacin de NADH* en condiciones anaerbicas en levadura DAP + NADH + H+ Glicerol + NAD+ + P * : NADH generado durante la biosntesis de biomasa en anaerobiosis Funciones: Respuesta a stress osmtico Balance NADH 4 10 g/LGlucosa 6 P Triosa - P Pyruvato Glicerol Etanol + CO2 OxaloacetatoEtanol CO2 Succinato Succinato Productos de fermentacin en S.cerevisiaeAzcar Vas TCA : RESPIRACION vs. FERMENTACION X (Camarasa et al, 2003) Piruvato Oxaloacetato citratomalato fumaratoisocitrato o-cetoglutarato succinato ATPCO2 NADHAcetyl CoA NADPHCO2 FADH Va reductiva Va oxidativa Anaerobiosis y vas TCAAcetyl CoA ? Yeast enzymes involved in the cytosolic PDH bypass under anaerobiosis (ALD2, ALD3, ALD6) (ACS1, ACS2) (PDC1) Cytosol X Productos de fermentacin en S.cerevisiaePROUN_LIPERGNADHmitNADHcyt11 O2ATP2340.8 1.2 14 29 0.1 0.5 11 24 -0.9 -0.6 8.2 19 -0.9 -0.7 4.3 14.0 -0.8 -0.6 4.4 14.0 0.2 0.4 6.7 13 0.1 -0.1 -4.6 -8.7 41% 41% 43% 49% 0 0.11 0.24 0.24 91 91 82 79 93 94 92 93 1.2 1.3 3.5 2.0 1.7 1.8 4.1 2.6 3.4 3.1 3.8 3.0 100 100 100 100 2.0 2.1 2.5 2.7 61 61 60 61 0.07 0.02 0.03 0.06 2.6 2.6 3.0 3.2 0.5 0.5 0.6 0.6 2.1 2.1 2.9 2.9 96 96 95 95 94 94 93 93 0 0.02 0.02 0.05 0.02 0.02 0.02 0.02 1.5 1.4 1.2 1.3 MALRedistribucin del flujo de carbono en el metabolismo central de Saccharomyces cerevisiae EC 1118 al incrementar lasconcentraciones de oxigeno disuelto Aceituno et al, 2012 Temario1. De la refinera a la Biorefinera Biocombustibles Plataformas qumicas 2. Qumica de vas metablicas Energa libre y poder reductor Glicolisis Metabolismo fermentativo Ciclo TCA Fosforilacion oxidativa Va de las pentosa fosfato Resumen del metabolismo primario de glucosa 2.4. El ciclo TCA fuente de: NADH/FADH2 metabolitos intermediarios del anabolismo Condiciones Aerbicas El ciclo TCA Descarboxilacin oxidativadepiruvato El ciclo TCA Ecuacin estequiomtrica de la oxidacin total de piruvato en el ciclo TCA 3 CO2+GTP+4NADH+FADH2 +4H+ - Pyr 3H2O GDP ~P 4NAD+ - FAD = 0 http://www.youtube.com/watch?v=A1DjTM1qnPM Nota: Reacciones anaplerticas 2.5 Produccin de ATP por fosforilacin oxidativa Bacterias:aerobias anaerobias;estrictas facultativas. Levaduras: solo S. cerevisiae es aerobio facultativo. 1mol de glucosa completamente metabolizado a CO2 en la gliclisis y ciclo TCA produce 12 cofactores redox: Los co-factores son regenerados en varias etapas de la cadena respiratoria, (fosforilacin oxidativa):

C6H12O66CO2 +2NADH+(8NADH+2FADH2)+2ATP+2GTPNADH + 12O2NAD++(PO)NADHATPFADH2 + 12O2FAD+(PO)FADH2ATPRegulacin del metabolismo del carbono Previene que demasiado Carbono TCA y redunde en sobreproduccin innecesaria de ATP por respiracin. Nocin de overflow metabolism: Escherichia coli Saccharomyces cerevisiae Efecto Crabtree Efecto Pasteur Produccin de acetato en Escherichia coli en condiciones aerbicas en funcin de 24: 530-536, 2006 24: 530-536, 2006 Key biochemical pathways in E. coli involved in the aerobic consumption of glucose and the synthesis of acetate, carbon dioxide and biomass.Formation of acetate (red) with increasing growth rate of E. coli.The intracellular pyruvate concentration (blue) and the redox ratio (green)correlate strongly with the appearance of acetate. Metabolismo respiro-fermentativo en Saccharomyces cerevisiae (ALD2, ALD3, ALD6) (ACS1, ACS2) (PDC1) Cytosol Temario1. De la refinera a la Biorefinera Biocombustibles Plataformas qumicas 2. Qumica de vas metablicas Energa libre y poder reductor Glicolisis Metabolismo fermentativo Ciclo TCA Fosforilacion oxidativa Va de las pentosa fosfato Resumen del metabolismo primario de glucosa Temario1. De la refinera a la Biorefinera Biocombustibles Plataformas qumicas 2. Qumica de vas metablicas Energa libre y poder reductor Glicolisis Metabolismo fermentativo Ciclo TCA Fosforilacin oxidativa Va de las pentosa fosfato Resumen del metabolismo primario de glucosa 2.6 Ciclo de las pentosa fosfato Una red metablica multipropsito: Sintesis de NADPH Sntesis de intermediarios C5, C4 y C3 GAP Ribosa EritrosaVade las Pentosa Fosfato Gluconato6P + NADPH - Glucosa 6P NADP+ - H2O = 0 CO2 + Ribulosa5P + NADPH - Gluconato6P NADP+ -H2O = 0 Ribosa5P- Ribulosa5P = 0 Xilulosa5P - Ribulosa5P =0 Gliceraldehido3P + Sedoheptulosa7P - Xilulosa 5P -Ribosa5P = 0 Fructosa6P + Eritrosa4P - Sedoheptulosa7P - Gliceraldehido3P = 0 Fructosa6P + Gliceraldehido3P - Xilulosa 5P - Eritrosa4P = 0 Reacciones de la va de las Pentosas Fosfato Ecuacin Estequiomtrica globalde la Va de las Pentosa Fosfato Funcin Anaplertica: 5G6P + 5ATP 6Rib5P + 5ADP Funcin oxidativa: G6P + 12NADP+ 12NADPH + 6CO2 Temario1. De la refinera a la Biorefinera Biocombustibles Plataformas qumicas 2. Qumica de vas metablicas Energa libre y poder reductor Glicolisis Metabolismo fermentativo Ciclo TCA Fosforilacin oxidativa Va de las pentosa fosfato Resumen del metabolismo primario de glucosa 2.7 Resumen del metabolismo primario de la glucosa Metabolismo primario y secundario Precursores, unidades biosintticas y requerimientos para producir1g de biomasa en Escherichiacoli.Precursor metablico Bloques deconstruccin Cantidad requerida (mol (gMS)-1) Glucosa 6 PUDP-glucosa, UDP galactosa205 Fructosa 6 PUDP-N-acetilglucosamina71 Ribosa 5 PHistidina, triptofano, nucletidos898 Eritrosa 4 PFenilalanina, triptofano, tirosina361 Gliceraldehido 3 Pesqueleto fosfolpidos 129 3 Fosfoglicerato Serina, cisteina, glicina, nucletidos1,496 FosfoenolpiruvatoFenilalanina, triptofano, tirosina519 PiruvatoAlanina, isoleucina, valina2,833 Acetil CoAlpidos3,747 2 OxoglutaratoArginina, glutamina, glutamato, prolina1,079 Succinil CoAHemos- OxaloacetatoAspartato, asparagina, lisina, metionina, treonina, nucletidos 1,787 EspecieContenido(g (g MS)-1) ATP (moles (g MS)-1) NADPH (moles (g MS)-1) Protenas0.5529.257(21.970)11.523(0) RNA0.26.796(2.146)427(0) rRNA0.16 tRNA0.03 mRNA0.01 DNA0.031.240(450)200(0) Lpidos0.092.836(387)5.270(0) LPS0.03470(125)564(0) Peptidoglicano0.03386(193)193(0) Glicgeno0.03154(154)0(0) Building bocks0.04 Total1.0041.139(25.425)18.177(0) Composicin y requerimientos de ATP y NADPH en E. coli a a Losdatoscorrespondenauncrecimientobalanceadoa37Cenunmediomnimodeglucosa,con una velocidad especifica de crecimiento de 1.04 h-1. Los datos entre parntesis son los requerimientos deATPyNADPHparauncrecimientoenunmedioricoquecontienetodoslosbuildingblock necesarios. De Ingraham et al. (1983).(MS = materia seca).Temario1. De la refinera a la Biorefinera 2. Qumica de vas metablicas 3. Ejemplos de bioprocesos para la produccin industrial de compuestos qumicos.3.1 Medios de cultivo3.2 Aminocidos 3.3 Antibiticos 3.4 Protenas Requerimientos de medio de cultivo segn composicin qumica de biomasa Medios complejos usados enfermentaciones industriales Medio Contenido OrigenAplicacin tpicaLicor de maizlactato, aminoacidos, minerales, vitaminas procesamiento de almidon de maiz antibioticosAlmidon de maiz almidon, glucosa maizetanol, enzimas industrialesCebada malteada almidon, sacarosa cebadacerveza, whiskeyMelazassacarosa, rafinosa, glucosa, fructosa, betaina azucar de caa o remolachalevaduras de pan, etanolPharmamediaCarbohidratos, minerales, aminoacidos, vitaminas, grasas semilla de algodn antibioticossuero aminoacidos, factores de crecimiento sueroproteinas recombinantessuero de leche lactosa, proteinas leche acido lcticoextracto de levadura peptidos, aminoacidos, vitaminas levaduras enzimasTemario1. De la refinera a la Biorefinera 2. Qumica de vas metablicas 3. Ejemplos de bioprocesos para la produccin industrial de compuestos qumicos.3.1 Medios de cultivo3.2 Aminocidos (metabolitos primarios) 3.3 Antibiticos 3.4 Protenas 2 Familias de aminocidos en eucariotes Familia del glutamato (5) Familia del Aspartato (5) Glu Arg* Gln Pro ornitina o-aaa Lys* o-cetoglutarato oxaloacetato Met* Ile*Thr* Asp homoserina Asn 1 5 1 1 3 4 1 1 3 32 4 5 *:aa esencialBiosntesis de glutamato ylisina en Corynebacterium glutamicum Biosntesis de L-glutamato o-cetoglutarato + NH3 + NADPH glutamato (va GDH) (alto Km) glutamina + o-cetoglutarato +NADPH 2glutamato(va GOGAT) glutamato + NH3 + ATP glutamina (va GS) ------------------------------------------------------------------------- o-cetoglutarato + NADPH+ NH3 + ATP L-glutamato A. B. Nota: Transaminacin de glutamato y glutamina genera varios nuevos aa AminocidoPrecursora ATPb NADHNADPHNH3 L-Alanina 1 pyr00-1-1 L-Arginina 1 okg-71-4-4 L-Asparagina 1 oaa-30-1-2 L-Aspartato 1 oaa00-1-1 L-Cistena 1 pga -41-5-1 L-Glutamato 1 o kg00-1-1 L-Glutamina 1 o kg-10-1-2 L-Glicina 1 pga01-1-1 L-Histidina 1 penP-63-1-3 L-Isoleucina 1 oaa, 1 pyr-20-5-1 L-Lisina 1 pyr, 1 oaa-30-4-2 Costos metablicos de la biosntesis microbiana de algunos aminocidos Temario1. De la refinera a la Biorefinera 2. Qumica de vas metablicas 3. Ejemplos de bioprocesos para la produccin industrial de compuestos qumicos.3.1 Medios de cultivo3.2 Aminocidos 3.3 Antibiticos (metabolitos secundarios) 3.4 Protenas Categoras de antibiticos Categora EjemplosAplicacinProductor |-lactmicosPenicilinas Cefalosporinas Infecciones bacterianas Hongos filamentosos Poliktidostetraciclinas eritromicina Amplio espectro: Infecciones resistentes a |-lactmicos, fngicas, parasiticas,.. Actinomicetos GlicopptidosTeicoplanina ltimo recurso para tratamiento de infeccin bacteriana Actinomicetos AntraciclinasDaunorubicina quimioterapiaActinomicetos Temario1. De la refinera a la Biorefinera 2. Qumica de vas metablicas 3. Ejemplos de bioprocesos para la produccin industrial de compuestos qumicos.3.1 Medios de cultivo3.2 Aminocidos 3.3 Antibiticos 3.4 Protenas With permission from Molecular Biotechnology, Glick et al, ASM, 2010Enzimas de inters industrial http://www.novozymes.com/en/about-us/brochures/Documents/Enzymes_at_work.pdf Temario1. De la refinera a la Biorefinera 2. Qumica de vas metablicas 3. Medios de cultivo 4. Ejemplos de bioprocesos para la produccin industrial de compuestos qumicos.5. Diseo deprocesos biotecnolgicos 5.1. Seleccin y diseo de la cepa Escherichia coli Saccharomyces cerevisiae 5.1. Seleccin y diseo de la cepa (bis) Penicillium chrysogenum, Aspergillus oryzae, Tamao del genoma en pares de bases virus plasmidios bacterias fungi plantas algae insectos moluscos reptiles pjaros mammals 104 108 105 106 107 1011 1010 109 peces anfibios http://www3.kumc.edu/jcalvet/PowerPoint/bioc801b.ppt 20304050607080 Contenido GC (%) Vertebrados Invertebrados Plantas Bacterias 3 5 10 Number of species in each GC class 5 10 5 El contenido GC vara entre genomas Genome content 90 Ejemplos de genomas Especie Tamao Genes Genes/MbH.sapiens 3,200Mb 35,000 11D.melanogaster 137Mb 13,338 97C.elegans 85.5Mb 18,266 214A.thaliana 115Mb 25,800 224S.cerevisiae 15Mb 6,144 410E.coli 4.6Mb 4,300 934 Lista de 70 eucariotes, 141 bacterias, y20 archaea en http://www.ncbi.nlm.nih.gov/PMGifs/Genomes/links2a.html Pelagibacter ubique are possibly the most numerous bacteria in the world (perhaps 1028 individual cells).Pros y contras de diferentes factoras celulares para produccin de proteinas recombinantes.Ver diapo siguiente Pros y cons de diferentes factorias celulares para prots. recombinantesHospederoVentajasDesventajas Bacterias(E. coli; B. subtilis) - Amplio espectro de vectores - Expresin gnica de fcil control - Altos rendimientos posible - Alta secrecin protenas - Ausencia modificaciones post-traduccionales. - Endotoxinas- Cuerpos de inclusin Levaduras(S. cerevisiae;P. stipitis) - GRAS - Experiencia produccin gran escala - Algunas modificaciones post-traduccionales posibles. - Menor N de Vectores - Glicosilacin no idntica a mamfera.- Base gentica menos conocida que E. coli.Hongos filamentosos- Amplia experiencia con produccin a gran escala- Fuente de variadas enzimas indust. - Excelente secrecin protenas - Expresin prot. heterloga no lograda aun Clulas mamferas- Actividad biolgica deprotenas idntica a natural. - Vectores expresin disponibles - Clulas difciles de crecer - Caro - Crecimiento lento y baja productividad Clulas de insecto- Alto nivel de expresin posible - Modificacion post traduccion OK.- No siempre protenas 100% activas - Mecanismos desconocidos 5.2. Criterios de Diseo y Optimizacin Rendimiento producto j sobre sustrato i,Yij Unidad tpica:g de producto por g de sustrato Productividad de i,qi Unidad tpica: g producto por L de reactor por hora Concentracin final de P, Cp

Unidad tpica: g de productopor L de volumen de reactor 5.3 Mejoramiento de cepas Ing. metablica Ingeniera Metablica Sntesis Modificaciones genticas Biologa Molecular Tecnologas de DNA recombinante. Clonacin Transformacin. Anlisis Caracterizacin Metablica Diseo Futuras modificaciones Fisiologa de fermentacin. Anlisis de redes metablicas. Tcnicas analticas Anlisis de expresin (arreglos de ADN) Anlisis proteico. Anlisis de metabolitos. Anlisis de flujo. Interpretacin del anlisis Sugerencias para futuras modificaciones. Aplicaciones de la IngenieraMetablica Produccin de proteinas recombinantes Hormonas, anticuerpos, vacunas, enzimas etc. Extensin del rango de sustrato utilizacin ms eficiente de materias primas Vas conducentes a nuevos productos Frmacos, biomateriales,qumica fina Degradacin de compuestosxenobiticos Catalizador eficiente para bioremediacin de mezclas dexenobiticos.Ingeniera de la fisiologa celular Incremento en la performance del proceso Eliminacin o reduccin de sub-productos Menor impacto ambiental y mejor utilizacin de materiasprimas. Incremento en rendimiento, concentracion y productividadProductos ms baratos que rutas qumicas de sntesis Aplicaciones de la IngenieriaMetablica