22
https://alevelbiology.co.uk

alevelbiology.co · 2020. 3. 5. · Proteine Reactii de clivare Etapa 1 Amestec de fragmente Separarea fragmentelor Etapa 2 Fragmente purificate Etapa 3 secventarea Secvente individuale

  • Upload
    others

  • View
    6

  • Download
    0

Embed Size (px)

Citation preview

  • https://alevelbiology.co.uk

  • Structura primara - secventa aminoacizilor din lantul polipeptidic

    Secvență semnal

    9-12 aminoacizi hidrofobi

    N-terminal al lanțului

    localizarea proteinei

  • Citocrom c (uman, 105 AA)MGDVEKGKKIFIMKCSQCHTVEKGGKHKTGPNLHGLFGRKTGQAPGYSYTA

    ANKNKGIIW GEDTLMEYLENPKKYIPGTKMIFVGIKKKEERADLIAYLKKATNE

    Structura primara

    Metoda cu clorura de dansil

  • Determinarea structurii primare

    Pehr Edman

    1972-secventa

    fibrinogenului

  • Structura primara - secventa aminoacizilor din lantul polipeptidic

    Frederick Sanger (Premiul Nobel 1958)

    Secventa aminoacizilor in insulina (porc). Fiecare molecula contine 2 lanturi polipeptidice

    http://upload.wikimedia.org/

  • Structura primara – determinarea AA de la capatul C-terminal

    https://www2.chemistry.msu.edu/

    https://www.liverpool.ac.uk/

  • ProteineReactii

    de

    clivare

    Etapa 1 Amestec

    de

    fragmenteSepararea

    fragmentelor

    Etapa 2 Fragmente

    purificate

    Etapa 3

    secventarea

    Secvente

    individuale

    Set de

    secvente

    individuale

    Alinierea

    secventelor

    individuale

    -clivarea

    alternativa;

    -separarea si

    secventierea

    Alinierea

    secventelor

    individuale

    Secventa

    completa

    Determinarea structurii primare

  • Cunoasterea

    structurii primare

    Mw

    Localizare AA

    Identificarea de parti

    functionale

    Stabilirea relatii

    de evolutie

  • Structura secundara

    Modalitatile de impachetare ale lantului polipeptidic

    legăturile peptidice

    grupe peptidice planare

    Golden,M., et al.,

    Molecular Biology and Evolution,

    34(8), 2016

    unghiurile de torsiune

    (diedrale sau de rotație)

    C- N ()

    C- C ()

    Rotaţie constrânsă

    H amidiciâ

    R (C)

  • Structura secundara

    Structura secundara descrie modalitatile de impachetare

    ale lantului polipeptidic

    Structura -Helix

    L. Pauling in 1951

    (Premiu Nobel)

    3,6 aa / rotatie

    Legături de hidrogen

    www.brooklyn.cuny.edu

  • Linus Pauling

    • singurul detinator a 2 premii Nobel

    (1954-Chimie, 1962-Pace)

    • A fost angajat al Institututului de

    Stiinta si Medicina in Palo Alto,

    California.

    • prieten cu Albert Einstein.

    • s-a dedicat chimiei cu scopul

    de a ajuta umanitatea

    • Profesorul a fost considerat

    campionul vitaminei C.

  • Reprezentarea schematica

    a helixului prin 3 modele:

    A) Modelul cu bile si bete;

    B) Modelul panglica;

    C) Modelul cilindric

    Momente de dipol

    in helix

    Structura -Helix

  • Diagrama Ramachandran pentru helixuri

    Restrictiile conformaţionale

    ale resturilor din proteină

    Fiecare punct

    Unghiurile φ şi θ

    (fiecare rest din proteina)

    ww2.chemistry.gatech.edu

    Diagrama Ramachandran

    hemoglobina

  • Structura -elicoidală

    Feritina (o proteină - fixează fier) - 75%

    24 x 4 elicoidale (A-D)

    Helicobacter pylori (feritina)

    Cho,K.J, et al.,

    Journal Molecular Biology

    390(1),83, 2016

    3000-4500 Fe3+

    chemistry.wustl.edu

  • Structura -pliata

    1951 Pauling si Corey

    Structura -pliata antiparalela Structura -pliata paralela

    Structura -pliata mixta

  • 2 - 22 de lanţuri polipeptidice

    Structurile -pliate

    medie / 6 lanţuri polipeptidice

    1 lanţ polipeptidic < 15 AA

    Structura antiparalelă > paralelă (stabilitate)

    https://ib.bioninja.com.au/

  • Structura -pliata paralelaStructura -pliata antiparalela

    Structura -pliata

    Structura -pliata rasucita

    A) Modelul cu bile si bete;

    B) Modelul cu sageti;

    C) Modelul cu sageti rotit cu 90

  • Structura -întoarsă (curbele )

    Element de conexiune

    Structura -întoarsă de tip II

    https://ww2.chemistry.gatech.edu/

    https://www.ebi.ac.uk/

    buclele (suprafaţa proteinelor)

    Recunoaștere

    Papaleo, E. et al., Chem. Rev.

    2016, 116, 11, 6391-6423

    Interacțiuni proteina-proteina

  • Cheratina

    Proteina stabila (punti disulfidice)

    localizare

    par

    coarne

    unghii

    pene

    Difractie cu raze X

    2 lanturi polipeptidice

    Structura superhelix (Cheratina din par)

    H2O2

    oxidare

    Acid

    tioglicolic

    reducere

    http://image.slidesharecdn.com/

  • Colagenul

    Proteina frecventa la vertebrate

    localizare

    oase

    dinti

    tendoane

    matrici fibroase

    (piele)

    continut

    15-30% proline

    3 lanturi -helix

    Poli-L-prolina

    http://www.soe.ucsc.edu/

  • Stanga - Fibre de colagen din

    tendoanele aflate in gatul unei

    pasari

    Colagenul (2)

    Dreapta-fibre de colagen din

    coada unui soarece

  • Lanț polipeptidic

    Gli-X-Y (X = Pro, Y = 4-HO-P, sau 5-HO-K)

    Colagenul

    https://www.tes.com/