1. Normaal 5. AML CD19+ Vraag 11 - cytometrie.nl · QuickTime™ en een TIFF (LZW)-decompressor zijn vereist om deze afbeelding weer te geven. Antwoord 2 CD45, WBC aantal, IgA •

QuickTime™ en eenTIFF (LZW)-decompressor

zijn vereist om deze afbeelding weer te geven.

• 1. Normaal 5. AML• 2. Acute B-cel leukemie 6. CML• 3. Chronisch B-cel leukemie 7. T-ALL• 4. Lymfoom 8. T-NHL

Vraag 11CD19+



Vraag 11 Antwoord 7 T-ALL



CD10-FITC/CD20-PE heeft in beenmerg ook eenstereotype patroon waardoor B-cel maligniteitenherkenbaar zijn.

Normaal beenmerg

CD10-FITC

CD

20-P

E



Aan welke maligniteit denk U?

• 1.Transient B-ALL / Burkitt lymfoom• 2. Common-All• 3. Pre-B-ALL• 4. B-CLL• 5. Chemotherapie effect. ( toename precursor B-cellen )• 6. B-NHL

Vraag 12normaal afwijkend

CD10-FITC CD10-FITC

CD

20-P

E

CD

20- P

E



Antwoord 1. Transient B-ALL / Burkitt lymfoomVraag 12

normaal afwijkend

CD10-FITC CD10-FITC

CD

20-P

E

CD

20- P

E




• 1. B-ALL / Burkitt lymfoom• 2. Common-All• 3. Pre-B-ALL• 4. B-CLL• 5. Chemotherapie effect. ( toename precursor B-cellen )• 6. B-NHL




Antwoord 6 B-NHL

B-NHL: CD20++B-CLL: CD20+-





• 1. B-ALL / Burkitt lymfoom• 2. Common-All• 3. Pre-B-ALL• 4. B-CLL• 5. Chemotherapie effect. ( toename precursor B-cellen )• 6. B-NHL




Antwoord 5 Chemotherapie effect

• Chemotherapie effect. ( toename precursor B-cellen )




Patient: geb 02-09-1929Sinds medio 2000 bekend met NHL.Nu hypercalcaemie, toename LUC, WBC 2,3x109/L, trombo’s 107x109/L.Diff. bevat grote atypische lymfocyten.

• 1.geen

• 2.T-cellijn maligniteit

• 3.B-cellijn maligniteit• 4.Myeloide maligniteit

Is er een afwijkende populatie in bloed aanwezig?Vraag 15SS-lin CD4-FITC CD8-PE Kappa-FITC Lambda-PE

CD

45-C

Y5

CD

3-C

Y5

CD

3-C

Y5

CD

19-C

Y5

CD

19-C

Y5



Antwoord 3 B-cellijn maligniteit

Vraag 15



Welke markers zijn afwijkend?

• 1. CD19 / CD10 / CD34 / CD117• 2. CD20 / CD19 / CD5 / IgA en Kappa• 3. CD45 / CD19 / CD5 / IgM en Kappa• 4. CD45 / CD20 / CD5 / IgD en Lambda• 5. CD45 / CD3 / CD4 / CD8 / CD5

Vraag 16

CD34-FITC CD23-PE CD5-FITC CD10-FITC FMC7-FITC

CD

19-C

Y5

CD

20-P

E

CD

20-C

Y5

CD

117-

PE

CD

19-C

Y5

CD

19-C

Y5

CD

19-C

Y5

CD

19-C

Y5

CD

19-C

Y5

IgM-PE IgD-FITC IgA-PE IgG-FITC



Welke markers zijn afwijkend?

• Antwoord 2 . CD20 / CD19 / CD5 / IgA en Kappa

Vraag 16

CD34-FITC CD23-PE CD5-FITC CD10-FITC FMC7-FITC

CD

19-C

Y5

CD

20-P

E

CD

20-C

Y5

CD

117-

PE

CD

19-C

Y5

CD

19-C

Y5

CD

19-C

Y5

CD

19-C

Y5

CD

19-C

Y5

IgM-PE IgD-FITC IgA-PE IgG-FITC



Van welke maligniteit is er sprake?

• 1. geen• 2. B-PLL• 3. B-NHL ( FCL )• 4. B-NHL ( B-CLL like )• 5. T-NHL• 6. Precursor B-ALL• 7. HCL

Vraag 17



Antwoord 4 B-NHL ( B-CLL like )

Vraag 17



Wat is bijzonder in vergelijking met een “normale B-CLL”?

• 1. FMC7, CD23, CD20, WBC aantal• 2. CD45, WBC aantal, IgA• 3. CD45, CD23, WBC aantal, IgA• 4. CD45, IgA, CD10• 5. CD38, CD45, CD20, CD5• 6. CD38, IgA, CD34

Vraag 18



Antwoord 2 CD45, WBC aantal, IgA

• CD45 past niet bij een B-CLL. Daarnaast is B-CLL meestal zwak IgM en IgD. Het aantal leucocyten is ook te laag voor een B-CLL. Deze afwijkende parameters passen meer bij een NHL.Echter omdat veel markers overeenkomen met een B-CLL is er sprake van een B-CLL-like NHL.

In de WHO-classificatie wordt de term “small lymfocytic lymphoma’(SLL) gebruikt. B-CLL en SLL worden als één type B-cel lymfoproliferatie beschouwd.

Vraag 18



• 1. CD20PE andere kloon als CD20-ECD• 2. Te weinig antistof CD20-ECD toegevoegd• 3. Compensatiefout PE v.s. ECD• 4. Antistof HLA-DR-ECD vervallen• 5. Procedure fout intracellulaire aankleuring

Kindje, 6 mnd oud. Vraag: nieuwe leukemie?Screening + vervolgschema B-ALL ingezet.

CD20-PE pos en CD20-ECD neg? Oorzaak?

Vraag 19

SS lin

CD

45-E

CD

CD34-FITC CD34-FITC

CD

117-

PE

CD

45-E

CD

CD117-PE

CD

45-E

CD

CD10-FITC

CD

20-P

E

CD10-FITC

HLA

dr-E

CD

CD10-FITC

CD

19-C

Y5

CD20-PE CD20-ECD TDT-FITC cytCD179a-PE

CD

20-E

CD

CD

20-E

CD

CD

10-C

Y5

HLA

d r-E

CD



1. CD20PE andere kloon als CD20-ECD2. Te weinig antistof CD20-ECD toegevoegd3. Compensatiefout PE v.s. ECD4. Antistof HLA-DR-ECD vervallen5. Procedure fout intracellulaire aankleuring

.CD20-PE pos en CD20-ECD neg? Oorzaak? Vraag 19

SS lin

CD

45-E

CD

CD34-FITC CD34-FITC

CD

117-

PE

CD

45-E

CD

CD117-PE

CD

45-E

CD

CD10-FITC

CD

20-P

E

CD10-FITC

HLA

dr-E

CD

CD10-FITC

CD

19-C

Y5

CD20-PE CD20-ECD TDT-FITC cytCD179a-PE

CD

20-E

CD

CD

20-E

CD

CD

10-C

Y5

HLA

d r-E

CD

ECD: Phycoerythrine –Texas red.( Tandem fluorchroom ) Antisof was verlopen.

Het fluorchroom ECD was uit elkaar gevallen in PE en Texas red.

Daardoor komt HLA-dr tot expressie in PE kanaal



Bloed van een patiënt.Is de populatie afwijkend? En zo ja, wat is er aan de hand?

• 1. Niet afwijkend• 2. Teveel niet lyseerbare erythrocyten• 3. Sterke toename van monocyten, granulocyten en

voorlopers• 4. Sterke toename van lymfocyten, granulocyten en

voorlopers

Vraag 20a

SS lin SS lin

FS li

n

CD

45F I

T C



Antwoord 3 Toename van monocyten, granulocyten envoorlopers

Vraag 20a

SS lin SS lin

FS li

n

CD

45F I

T C



Waar past dit beeld bij?

• 1. Lymfocytaire leukemie• 2. Myeloide leukemie• 3. Monocytaire leukemie• 4. Mobilisatie van stamcellen m.b.v. G-CSF

Vraag 20b

SS lin SS lin

CD

45FI

TC

FS li

n



Antwoord 4 Mobilisatie van stamcellen m.b.v. G-CSF

Vraag 20b

Documents

1. Normaal 5. AML CD19+ Vraag 11 - cytometrie.nl · QuickTime™ en een TIFF (LZW)-decompressor zijn vereist om deze afbeelding weer te geven. Antwoord 2 CD45, WBC aantal, IgA •