Chemistry Piccolo Piccolo Tests Liver Panel

8/10/2019 . Chemistry Piccolo Piccolo Tests Liver Panel

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Liver Panel Plus

For In Vitro Diagnostic Use and For Professional Use OnlyCustomer and Technical Service: 800-822-2947 CLIA Waived: Use lithium heparin whole blood, only

Moderate Complexity: Use lithium heparin whole blood,October 2006 lithium heparin plasma, or serumPN: 400-7060 Rev.: K

1998, Abaxis, Inc., Union City, CA 94587

1. Intended Use

The Piccolo Liver Panel Plus, used with the Piccolo Blood Chemistry Analyzer, utilizes dry and liquid reagents to provide invitro quantitative determinations of alanine aminotransferase, albumin, alkaline phosphatase, amylase, aspartateaminotransferase, gamma glutamyltransferase, total bilirubin, and total protein in heparinized whole blood, heparinized plasma,or serum.

The tests on this panel are waived under CLIA 88 regulations. If a laboratory modifies the test system instructions, then thetests are considered high complexity and subject to all CLIA requirements. For CLIA waived labs, only lithium heparin whole

blood may be tested. For use in moderate complexity labs, lithium heparinized whole blood, lithium heparinized plasma, or

serum may be used.

A CLIA Certificate of Waiver is needed to perform CLIA waived testing. A Certificate of Waiver can be obtained from theCenters for Medicare & Medicaid Services (CMS). Please contact the Commission on Laboratory Accreditation (COLA) at 1-800-981-9883 for assistance in obtaining one.

2. Summary and Explanation of Tests

The Piccolo Liver Panel Plus and the Piccolo Blood Chemistry Analyzer comprise an in vitro diagnostic system that aids thephysician in diagnosing the following disorders.

Alanine aminotransferase: Liver diseases, including viral hepatitis and cirrhosis; heartdiseases.

Albumin: Liver and kidney diseases.Alkaline phosphatase: Liver, bone, parathyroid, and intestinal diseases.Amylase: Pancreatitis.Aspartate aminotransferase: Liver disease including hepatitis and viral jaundice, shock.Gamma glutamyltransferase: Liver diseases, including alcoholic cirrhosis and primary and

secondary liver tumors.Total bilirubin: Liver disorders, including hepatitis and gall bladder obstruction;

jaundice.Total protein: Liver, kidney, bone marrow diseases; metabolic and nutritional

disorders.

3. Test Principles

Alanine Aminotransferase (ALT)Alanine aminotransferase (ALT) has been measured by three methods. Two of these methodsthe colorimetricdinitrophenylhydrazine coupling technique1,2and the fluorescent enzymatic assayare rarely used.3An enzymatic method

based on the work of Wrblewski and LaDue4is the most common technique for determining ALT concentrations in serum. Amodified Wrblewski and LaDue procedure has been proposed as the recommended procedure of the International Federationof Clinical Chemistry (IFCC).5

The method developed for use on the Piccolo Analyzer is the same as that recommended by the IFCC but run at a highertemperature. In this reaction, ALT catalyzes the transfer of an amino group from L-alanine to -ketoglutarate to form L-glutamate and pyruvate. Lactate dehydrogenase catalyzes the conversion of pyruvate to lactate. Concomitantly, NADH isoxidized to NAD+, as illustrated in the following reaction scheme.

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ALTL-Alanine + -Ketoglutarate L-Glutamate + Pyruvate

LDHPyruvate + NADH + H+ Lactate + NAD+

The rate of change of the absorbance difference between 340 nm and 405 nm is due to the conversion of NADH to NAD+andis directly proportional to the amount of ALT present in the sample.

Albumin (ALB)Early methods used to measure albumin include fractionation techniques6,7,8and tryptophan content of globulins.9,10Thesemethods are unwieldy to perform and do not have a high specificity. Two immunochemical techniques are considered asreference methods, but are expensive and time consuming.11Dye binding techniques are the most frequently used methods formeasuring albumin. Bromcresol green (BCG) is the most commonly used of the dye binding methods but may over-estimatealbumin concentration, especially at the low end of the normal range.12Bromcresol purple (BCP) is the most specific of thedyes in use.13,14

Bromcresol purple, when bound with albumin, changes from a yellow to blue color. The absorbance maximum changes withthe color shift.

SurfactantsBCP + Albumin BCP-Albumin Complex

Acid pH

Bound albumin is proportional to the concentration of albumin in the sample. This is an endpoint reaction that is measured asthe difference in absorbance between 600 nm and 550 nm.

Alkaline Phosphatase (ALP)Techniques to measure alkaline phosphatase were first developed over 60 years ago. Several of these end-point or two-pointspectrophotometric methods15,16are now considered obsolete or too cumbersome. The use ofp-nitrophenyl phosphate (p-NPP)increased the speed of the reaction.17,18The reliability of this technique was greatly increased by the use of a metal-ion buffer tomaintain the concentration of magnesium and zinc ions in the reaction.19The American Association for Clinical Chemistry(AACC) reference method20usesp-NPP as a substrate and a metal-ion buffer.

The Piccolo procedure is modified from the AACC20and IFCC21methods. Alkaline phosphatase hydrolyzesp-NPP in a metal-

ion buffer and formsp-nitrophenol and phosphate.

ALPp-Nitrophenyl Phosphate p-Nitrophenol +

Zn2+, Mg2+ Phosphate

The amount of ALP in the sample is proportional to the rate of increase in absorbance difference between 405 nm and 500 nm.

Amylase (AMY)About 200 different tests have been developed to measure amylase. Most procedures use a buffered polysaccharide solution butemploy different detection techniques. Viscosimetric methods are lacking in precision and accuracy22, while turbidimetric andiodometric methods are difficult to standardize.23,24Commonly used are saccharogenic and chromolytic methods. The classicamylase measurement technique is a saccharogenic method25, but is difficult and time-consuming.26Chromolytic methods

usingp-nitrophenylglycosides as substrates have been recently developed.27

These assays have a higher specificity forpancreatic amylase than for salivary amylase and are easily monitored.27

In the Piccolo method, the substrate, 2-chloro-p-nitrophenyl--D-maltotrioside (CNPG3), reacts with -amylase in the patientsample, releasing 2-chloro-p-nitrophenol (CNP). The release of CNP creates a change in color.

-AmylaseCNPG3 CNP + D-Maltotrioside

The reaction is measured bichromatically at 405 nm and 500 nm. The change in absorbance due to the formation of CNP isdirectly proportional to-amylase activity in the sample.

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Aspartate Aminotransferase (AST)The aspartate aminotransferase (AST) test is based on the Karmen rate method28as modified by Bergmeyer.29The currentInternational Federation of Clinical Chemistry (IFCC) reference method utilizes the Karmen/Bergmeyer technique of couplingmalate dehydrogenase (MDH) and reduced nicotinamide dinucleotide (NADH) in the detection of AST in serum.29,30Lactatedehydrogenase (LDH) is added to the reaction to decrease interference caused by endogenous pyruvate.

AST catalyzes the reaction of L-aspartate and -ketoglutarate into oxaloacetate and L-glutamate. Oxaloacetate is converted tomalate and NADH is oxidized to NAD+by the catalyst MDH.

ASTL-aspartate + -ketoglutarate Oxaloacetate + L-glutamate

MDHOxaloacetate + NADH Malate + NAD+

The rate of absorbance change at 340 nm/405 nm caused by the conversion of NADH to NAD+is directly proportional to theamount of AST present in the sample.

Gamma Glutamyltransferase (GGT)The first quantitative methods developed to measure gamma glutamyltransferase (GGT) involved a second reaction to form anazo dye that combined with a chromophore.39,40The change to L--glutamyl-p-nitroanilide as the substrate in the reaction

eliminated the dye-formation step.

41

Due to the poor solubility and stability of L--glutamyl-p-nitroanilide, this procedure wasmodified to use the substrate L--glutamyl-3-carboxy-4-nitroanilide.42The International Federation of Clinical Chemistry(IFCC) recommended GGT method is based on the latter substrate, with glycylglycine as the other substrate.43

Abaxis has modified the IFCC method to react at 37C. The addition of sample containing gamma glutamyltranferase to thesubstrates L--glutamyl-3-carboxy-4-nitroanilide and glycylglycine (gly-gly) causes the formation of L--glutamyl-glycylglycine (glu-gly-gly) and 3-carboxy-4-nitroaniline.

GGTL--glutamyl- + Gly-gly-3-carboxy 4-nitroanilide Glu-gly-gly + 3-carboxy-4-nitroaniline

The absorbance of this rate reaction is measured at 405 nm. The production of 3-carboxy-4-nitroaniline is directly proportionalto the GGT activity in the sample.

Total Bilirubin (TBIL)Total bilirubin levels have been typically measured by tests that employ diazotized sulfanilic acid.32,44A newer, more specificmethod has been developed using the enzyme bilirubin oxidase.34,35,36In addition to using the more specific total bilirubin testmethod, photodegradation of the analyte is minimized in the Piccolo System because the sample can be tested immediatelyafter collection.

In the enzyme procedure, bilirubin is oxidized by bilirubin oxidase into biliverdin. The final reaction is the conversion ofbiliverdin into various purple compounds.

Bilirubin OxidaseBilirubin + O2 Biliverdin + H2O

Bilirubin is quantitated as the difference in absorbance between 467 nm and 550 nm. The initial absorbance of this endpointreaction is determined from the bilirubin blank cuvette and the final absorbance is obtained from the bilirubin test cuvette. Theamount of bilirubin in the sample is proportional to the difference between the initial and final absorbance measurements.

Total Protein (TP)The total protein method is a modification of the biuret reaction, noted for its precision, accuracy, and specificity.45Originallydeveloped by Riegler46and modified by Weichselbaum47, Doumas, et al48proposed a biuret reaction as a candidate total

protein reference method.

In the biuret reaction, the protein solution is treated with cupric [Cu(II)] ions in a strong alkaline medium. Sodium potassiumtartrate and potassium iodide are added to prevent the precipitation of copper hydroxide and the autoreduction of copper,

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respectively.47The Cu(II) ions react with peptide bonds between the carbonyl oxygen and amide nitrogen atoms to form acolored Cu-Protein complex.

OH-

Total Protein + Cu(II) Cu-Protein Complex

The amount of total protein present in the sample is directly proportional to the absorbance of the Cu-protein complex. Thetotal protein test is an endpoint reaction and the absorbance is measured as the difference in absorbance between 550 nm and

850 nm.

4. Principles of Procedure

See the Piccolo Analyzer Operators Manual, for the principles of procedure.

5. Description of Reagents

ReagentsEach Piccolo Liver Panel Plus reagent disc contains dry test-specific reagent beads (described below). A dry sample blankreagent (comprised of buffer, surfactants, excipients, and preservatives) is included in each disc for use in calculatingconcentrations of alanine aminotransferase (ALT), albumin (ALB), alkaline phosphatase (ALP), amylase (AMY), aspartateaminotransferase (AST), and gamma glutamyltransferase (GGT). Dedicated sample blanks are included in the disc for total

bilirubin, and total protein. Each reagent disc also contains a liquid diluent consisting of surfactants, excipients, andpreservatives.

Table 1: Reagents

Component Quantity/Disc

Alanine Aminotransferase ReagentL-alanine 874 g-ketoglutaric acid 54 g-nicotinamide adenine dinucleotide reduced (NADH) 7 gLactate dehydrogenase (LDH)(Staphylococcus epidermidis)

Buffers, surfactant, excipients, and preservatives0.09 U

Albumin ReagentBromcresol purple, sodium saltBuffer, surfactant, excipients, and preservatives

2 g

Alkaline Phosphatase ReagentMagnesium chloride 3 gZinc sulfate 3 gp-NPP, disodium saltBuffers, surfactant, excipients, and preservatives

56 g

Amylase Reagent

CNPG3Buffer, surfactant, excipients, and preservatives

40 g

Aspartate Aminotransferase ReagentL-aspartic acid 426 gLactate dehydrogenase (LDH)(Staphylococcus epidermidis) 0.04 U

-nicotinamide adenine dinucleotide, reduced (NADH) 5 gMalate dehydrogenase (MDH) (porcine heart) 0.01 U-ketoglutaric acid 28 gBuffers, surfactant, excipients, and preservatives

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Table 1 continued: Reagents

Component Quantity/Disc

Gamma Glutamyltransferase ReagentGlycylglycine 317 gL-glutamic acid -(3-carboxy-4-nitroanilide 30 gBuffer, surfactant, excipients, and preservatives

Total Bilirubin ReagentBeckman Bilirubin Enzyme Reagent 0.1 UBuffer, excipients, and preservatives

Total Bilirubin BlankBuffer, excipients, and preservatives

Total Protein ReagentSodium potassium tartrate 343 gCupric sulfate 134 gPotassium iodide 28 g

Excipients and preservatives

Total Protein BlankSodium potassium tartrate 343 gPotassium iodide 28 gExcipients and preservatives

Warnings and Precautions The diluent container in the reagent disc is automatically opened when the analyzer drawer closes. A disc with an opened

diluent container can not be re-used. Ensure that the sample or control has been placed into the disc before closing thedrawer.

Used reagent discs contain human body fluids. Follow good infection control practices when handling and disposing useddiscs.49See the Piccolo Blood Chemistry Analyzer Operators Manual for instructions on cleaning biohazardous spills.

The reagent discs are plastic and may crack or chip if dropped. Neveruse a dropped disc as it may spray bio-hazardsthroughout the interior of the analyzer.

Reagent beads may contain acids or caustic substances. The operator does not come into contact with the reagent beadswhen following the recommended procedures. In the event that the beads are handled (e.g., cleaning up after dropping andcracking a reagent disc), avoid ingestion, skin contact, or inhalation of the reagent beads.

Reagent beads and diluent contain sodium azide which may react with lead and copper plumbing to form highly explosivemetal azides. Reagents will not come into contact with lead and copper plumbing when following recommended

procedures. However, if the reagents do come into contact with such plumbing, flush with a large volume of water to

prevent azide buildup.

StorageStore reagent discs in their sealed pouches at 2-8C (36-46F). To use reagent discs, remove the discs in their sealed foil

pouches from the refrigerator. Discs in sealed pouches can be left at room temperature and then placed back in the refrigeratorseveral times. Ensure that the total time discs are at room temperature does not exceed 48 hours. Open the pouch and removethe disc just prior to running the test.

Do not expose discs, in or out of the foil pouches, to direct sunlight or to temperatures above 32C (90F). A disc must be usedwithin 20 minutes of opening the pouch; a disc in an opened pouch can not be placed back in the refrigerator for use at a latertime.

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Indications of Reagent Disc Instability/DeteriorationDo notuse a disc:

after the expiration date. An error message will appear on the PiccoloBlood Chemistry Analyzer display if you use anexpired disc;

from a torn or otherwise damaged pouch; or if the desiccant is pink as observed through the strip of the packet enclosed in the disc pouch.

6. Instrument

See the Piccolo Analyzer Operators Manual for complete information on using the analyzer.

7. Sample Collection and Preparation

Sample collection techniques are described in the PiccoloBlood Chemistry Analyzer Operators Manual.

The minimum required sample size is ~90 L of heparinized whole blood, heparinized plasma, serum, or serum control.The reagent disc sample chamber can contain up to 120 L of sample.

Finger puncture samples should be dispensed into the reagent disc immediatelyfollowing sample collection.

Whole blood samples obtained by venipuncture must be homogeneous before transferring a sample to the reagent disc.

Gently invert the collection tube several times just prior to sample transfer. Do notshake the collection tube; shaking cancaused hemolysis.

Whole blood venipuncture samples should be run within 60 minutes of collection.50Refrigerating whole blood samplescan cause significant changes in concentrations of aspartate aminotransferase.51The sample may be separated into

plasma or serum and stored in capped sample tubes at 2-8C (36-46F)if the sample can not be run within 60 minutes.

Total Bilirubinresults may be adversely affected by photodegradation. Whole blood samples not run immediately shouldbe stored in the dark for no longer than 60 minutes. If the sample can not be analyzed within that period, it should beseparated into plasma or serum and stored in a capped sample tube in the dark at low temperatures.52

Known Interfering Substances The only anticoagulant recommended for use in the Piccolo test protocol is lithium heparin. Abaxis has performed studies

demonstrating that EDTA, fluoride, oxalate, and any anticoagulant containing ammonium ions will interfere with at leastone chemistry contained in the Piccolo Liver Panel Plus.

Amylaseis secreted by several glands as well as by the pancreas. Only pancreatic amylase is of clinical interest.53Contamination of a sample with nonpancreatic amylase will cause artificially elevated results. Finger puncture samples aremore prone to contamination than are venipuncture samples. If amylase results from a finger puncture sample are notconsistent with the patients clinical symptoms, repeat the test using a venipuncture sample.

Interference may be seen in the total proteintest when analyzing samples with a triglyceride concentration >400 mg/dLmay show an increased total protein level. The Piccolo Analyzer suppresses any results that are affected by >10%interference from lipemia. LIP is printed on the result card in place of the result.

8. Procedure

Materials RequiredRefer to the Piccolo Analyzer Operators Manual, for information on ordering the materials needed to operate the PiccoloBlood Chemistry Analyzer according to the recommended procedure.

One Piccolo Liver Panel Plus Reagent Disc PN: 400-1003 (a box of discs PN: 400-0003)

Materials Required but not Provided Piccolo Blood Chemistry Analyzer Sample transfer pipettes (fixed volume approximately 100 L) and tips are provided with each Piccolo Blood Chemistry

Analyzer and may be reordered from Abaxis.

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Commercially available control reagents recommended by Abaxis (contact Abaxis Technical Service for approved controlmaterials and expected values).

Timer

Test ParametersThe PiccoloBlood Chemistry Analyzer operates at ambient temperatures between 15C and 32C (59-90F). The analysis timefor each Piccolo Liver Panel Plus is


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Warning: Extensive testing of the PiccoloBlood Chemistry System has shown that, in very rare instances, sample

dispensed into the reagent disc may not flow smoothly into the sample chamber. Due to the uneven flow, aninadequate quantity of sample may be analyzed and several results may fall outside the expected ranges. Thesample may be re-run using a new reagent disc.

InterferenceSubstances were tested as interferents with the analytes. Human serum pools were prepared. The concentration at which each

potential interferent was tested was based on the testing levels in NCCLS EP7-A.

15

Effects of Endogenous Substances Physiological interferents (hemolysis, icterus and lipemia) cause changes in the reported concentrations of some analytes.

The sample indices are printed on the bottom of each result card to inform the operatorabout the levels of interferentspresent in each sample.

The Piccolo Blood Chemistry System suppresses any results that are affected by >10% interference from hemolysis,lipemia or icterus. HEM, LIP, or ICT respectively, is printed on the result card in place of the result.

For maximum levels of endogenous substances contact Abaxis Technical Service.

Additionally, lactate at 230 mg/dL and lactate dehydrogenase at 10,000 U/L were found to have no effect on any of the

assays on this disc.Effects of Therapeutic Substances The following compounds do not significantly interfere with the chemistries in the Piccolo Reagent Disc. Significant

interference is defined as >10% shift in the result for a normal range specimen. Human serum pools were supplementedwith known concentrations of the drugs or chemicals and then analyzed.

Therapeutic or Exogenous Concentration with No Physiologic orSubstances Significant Interference Therapeutic Range54-57

(mg/dL) (mg/dL)

Acetaminophen 100 1-2Acetylsalicylic acid 50 2-10Chloramphenicol 100 1-2.5Cimetidine 16 0.1-1Dextran 300 600-1800Erythromycin 10 0.2-2.0Hydrochlorothiazide 7.5 Isoniazide 4 0.1-0.7Ketoprofen 50 Lidocaine 1 0.15-0.6Methicillin 100 Methotrexate 0.5 0.1Metronidazole 5 0.1

Nafcillin 1 Oxacillin 1 Phenytoin 3 1-2

Rifampin 0.5 0.4-3Salicylic acid 25 15-30

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The following substances showed greater than 10% interference. Significant interference is defined as >10% shift in the resultfor a normal range specimen. Human serum pools were supplemented with known concentrations of the drugs or chemicalsand then analyzed.

Concentration with Physiologic orNo Significant TherapeuticInterference (mg/dL) Range54-57(mg/dL) Interference

Alanine Aminotransferase (ALT)

Ascorbic acid 20 0.8-1.2 11% inc*Oxaloacetate 132 843% inc

Albumin (ALB)Acetoacetate 102 0.05-3.60 18% dec*Ampicillin 30 0.5 12% decCaffeine 10 0.3-1.5 14% decCalcium chloride 20 17% decCephalothin (Keflin) 400 10 13% incIbuprofen 50 0.5-4.2 28% inc-Ketoglutarate 5 11% dec

Nitrofurantoin 20 0.2 13% dec

Proline 4 12% incSulfalazine 10 2-4 14% decSulfanilamide 50 10-15 12% decTheophylline 20 1-2 11% dec

Alkaline Phosphatase (ALP)Theophylline 20 1-2 42% dec

Total Bilirubin9(TBIL)Dopamine 19 55% decL-dopa 5 17% dec

*inc=increase; dec=decrease

For additional information on potential chemical interferents, see the Bibliography.

11. Expected Values

Samples from a total of 193 adult males and females, analyzed on the Piccolo Blood Chemistry Analyzer, were used todetermine the reference ranges for alanine aminotransferase, albumin, alkaline phosphatase, amylase, total bilirubin, and total

protein. Samples from a total of 186 adult males and females, analyzed on the Piccolo Blood Chemistry Analyzer, were used todetermine the reference ranges for aspartate aminotransferase. Samples from a total of 131 adult males and females, analyzedon the Piccolo Blood Chemistry Analyzer, were used to determine the reference ranges for gamma glutamyltransferase.

These ranges are provided as a guideline only. It is recommended that your office or institution establish normal ranges for thegeographic area in which you are located.

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Table 2: PiccoloReferences Ranges

Analyte Reference RangeCommon Units SI Units

Alanine Aminotransferase (ALT) 10-47 U/L 10-47 U/LAlbumin (ALB) 3.3-5.5 g/dL 33-55 g/LAlkaline Phosphatase (ALP), Male 53-128 U/L 53-128 U/L

Alkaline Phosphatase (ALP), Female 42-141 U/L 42-141 U/LAmylase (AMY) 14-97 U/L 14-97 U/LAspartate Aminotransferase (AST) 11-38 U/L 11-38 U/LGamma Glutamyltransferase (GGT) 5-65 U/L 5-65 U/LTotal Bilirubin (TBIL) 0.2-1.6 mg/dL 3.4-27.4 mol/LTotal Protein (TP) 6.4-8.1 g/dL 64-81 g/L

Amylaseis secreted by several glands as well as by the pancreas. Only pancreatic amylase is of clinical interest.53Contamination of a sample with nonpancreatic amylase will cause artificially elevated results. Finger puncture samples aremore prone to contamination than are venipuncture samples. If amylase results from a finger puncture sample are notconsistent with the patients clinical symptoms, repeat the test using a venipuncture sample.

12. Performance Characteristics

LinearityThe chemistry for each analyte is linear over the dynamic range listed below when the Piccolo Blood Chemistry Analyzer isoperated according to the recommended procedure (see the Piccolo Analyzer Operators Manual).

Table 3: Piccolo Dynamic Ranges

Analyte Dynamic RangeCommon Units SI Units

Alanine Aminotransferase (ALT) 5-2000 U/L 5-2000 U/LAlbumin (ALB) 1-6.5 g/dL 10-65 g/L

Alkaline Phosphatase (ALP) 5-2400 U/L 5-2400 U/LAmylase (AMY) 5-4000 U/L 5-4000 U/LAspartate Aminotransferase (AST) 5-2000 U/L 5-2000 U/LGamma Glutamyltransferase (GGT) 5-3000 U/L 5-3000 U/LTotal Bilirubin(TBIL) 0.1-30 mg/dL 1.7-513 mol/LTotal Protein (TP) 2-14 g/dL 20-140 g/L

If the analyte concentration is above the measuring range (dynamic range), but less than the system range, the print card willindicate a > sign at the upper limit and an asterisk after the number, e.g. ALT >2000* U/L. If lower than the dynamic range,a


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PrecisionPrecision studies were conducted using NCCLS EP5-T2 guidelines.60Results for within-run and total precision weredetermined by testing two levels of control material.

Table 4: Precision (N=80)

Analyte Within-Run TotalAlanine Aminotranferase (U/L)

Control Level 1Mean 21 21SD 2.76 2.79%CV 13.4 13.5


Albumin(g/dL)Control Level 1

Mean 5.6 5.6SD 0.09 0.11

%CV 1.7 2.1Control Level 2

Mean 3.7 3.7SD 0.07 0.11%CV 2.0 2.9

Alkaline Phosphatase (U/L)Control Level 1

Mean 39 39SD 1.81 2.29%CV 4.6 5.8

Control Level 2Mean 281 281SD 4.08 8.75%CV 1. 5 3.1

Amylase(U/L)Control Level 1

Mean 46 46SD 2.40 2.63%CV 5.2 5.7


Aspartate Aminotransferase (U/L)Control Level 1Mean 47 49SD 0.98 0.92%CV 2.07 1.88


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Table 4 continued: Precision (N=80)

Analyte Within-Run Total

Gamma Glutamyltransferase (U/L)Control Level 1

Mean 25 25

SD 0.59 0.74%CV 2.34 2.94


Total Bilirubin(mg/dL)Control Level 1

Mean 0.8 0.8SD 0.06 0.07%CV 8.0 9.3

Control Level 2

Mean 5.2 5.2SD 0.09 0.15%CV 1.7 2.8

Total Protein(g/dL)Control Level 1

Mean 6.8 6.8SD 0.05 0.08%CV 0.8 1.2

Control Level 2Mean 4.7 4.7SD 0.09 0.09

%CV 2.0 2.0CorrelationHeparinized whole blood and serum samples were collected from patients at two sites. The whole blood samples were analyzed

by the Piccolo Blood Chemistry Analyzer at the field sites and the serum samples were analyzed by the Piccolo Analyzer andby comparative methods. In some cases, high and low supplemented samples were used to cover the dynamic range. Allsamples were run in singlicate on the same day. Representative correlation statistics are shown in Table 5.

Table 5: Correlation of Piccolo Blood Chemistry Analyzer with Comparative Method

Whole BloodLab 1 Lab 2

Alanine Aminotransferase (U/L)

Correlation 0.98 0.99Slope 0.91 0.94Intercept 1.3 2.5SEE 3.21 2.84

N 86 67Sample range 10-174 10-174Comparative method Paramax Technicon

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Table 5 continued: Correlation of Piccolo Blood Chemistry Analyzer with Comparative Method


Albumin (g/dL)Correlation 0.85 0.90Slope 1.0 0.88Intercept 0.3 0.1SEE 0.22 0.21

N 261 100Sample range 1.1-5.3 1.5-5.0Comparative method Paramax Beckman

Alkaline Phosphatase(U/L)Correlation 0.99 0.93Slope 0.97 1.14Intercept 5.9 17.6SEE 3.97 4.79

N 99 80Sample range 27-368 26-150

Comparative method Paramax

TechniconAmylase(U/L)Correlation 0.98 0.96Slope 0.69 1.07Intercept 4.7 4.1SEE 3.11 3.47

N 99 80Sample range 11-92 19-118Comparative method Paramax Technicon

Aspartate Aminotransferase(U/L) 0.93 1.0Correlation 0.87 0.97Slope 5.3 3.0

Intercept 2.76 1.90SEE 159 46

N 13-111 13-252Sample range Paramax DAXComparative method

Gamma Glutamyltransferase(U/L)Correlation 1.0 1.0*Slope 0.98 1.60*Intercept 0.4 3.1*SEE 3.29 18.57*

N 135 49Sample range 5-312 27-1848Comparative method Paramax Beckman

Total Bilirubin(mg/dL)Correlation 0.97 0.98Slope 0.90 1.11Intercept 0.0 0.4SEE 0.07 0.09


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Table 5 continued: Correlation of Piccolo Blood Chemistry Analyzer with Comparative Method


Total Protein(g/dL)Correlation 0.85 0.87Slope 0.93 0.94Intercept 0.6 0.3SEE 0.19 0.16


*Laboratory 2 ran only serum on the Piccolo analyzer for the gamma glutamyltransferase test correlation.

Results of Untrained User StudyAn untrained user study was conducted in which participants were given only the test instructions and asked to performtesting of 3 discs with blinded randomized samples. The samples consisted of serum pools prepared at three levels for each ofthe eight analytes, ALT, albumin, ALP, AMY, AST, GGT, total bilirubin, and total protein. The participants were not givenany training on the use of the test. A total of approximately 60 participants were enrolled from 3 sites, representing a diverse

demographic (educational, age, gender, etc) population.Tables below present the summary of the performance for each analyte.

Alanine Aminotransferase (ALT)Level 1 Level 2 Level 3

N 62 62 62Mean 45.4 U/L 98.9 U/L 184.3 U/L%CV 3.7% 1.7% 1.5%

Observed Range 42 53 96 103 175 191Percent of Results

in the Range 15.0%*

98.4%61/62

95%CI: 91.3% to 100%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

* This percent is based on the premise that one cannot distinguish properly between normal and abnormal values when errorsare greater than one-quarter of the normal range. The range of (10 U/L - 47 U/L) was considered.

AlbuminLevel 1 Level 2 Level 3

N 62 62 62Mean 3.0 g/dL 3.5 g/dL 4.2 g/dL%CV 2.7% 2.5% 1.8%

Observed Range 2.9 3.2 3.3 3.7 4.0 4.4Percent of Results

in the Range 12.5%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

Alkaline Phosphatase (ALP)Level 1 Level 2 Level 3

N 62 62 62Mean 94.5 U/L 171.5 U/L 337.5 U/L%CV 5.2% 3.2% 2.4%

Observed Range 85 106 160-184 287 388Percent of Results

in the Range 15.0%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

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Amylase (AMY)Level 1 Level 2 Level 3

N 62 62 62Mean 72.1 U/L 126.9 U/L 260.0 U/L%CV 2.4% 2.1% 1.9%


in the Range

15.0%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

Asparate Aminotransferase (AST)Level 1 Level 2 Level 3

N 62 62 62Mean 56.0 120.4 276.3%CV 2.4% 1.1% 1.0%


in the Range 15.0%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

Gamma Glutamyltransferase (GGT)

Level 1 Level 2 Level 3N 62 62 62

Mean 35.0 U/L 86.2 U/L 131.3 U/L%CV 2.8% 1.5% 1.5%


in the Range 15.0%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

Total Bilirubin (TBIL)Level 1 Level 2 Level 3

N 62 62 62Mean 0.86 mg/dL 2.5 mg/dL 5.7 mg/dL

%CV 6.1% 2.6% 1.8%Observed Range 0.8 1.0 2.3 2.6 5.4 5.9

Percent of Resultsin the Range

15.0%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

100%62/62

95%CI: 94.2% to 100%

Total Protein (TP)Level 1 Level 2 Level 3

N 62 62 62Mean 4.8 g/dL 5.7 g/dL 7.1 g/dL%CV 2.0% 1.5% 1.5%

Observed Range 4.6 5.3 5.3 5.9 6.7 7.5Percent of Results

in the Range 5.9%

98.4%

61/6295%CI: 91.3% to 100%

100%

62/6295%CI: 94.2% to 100%

100%

62/6295%CI: 94.2% to 100%

13. Bibliography

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Blood Specimens; Tentative Standard. NCCLS document H18-T. Villanova, PA: NCCLS; p. 219.51. Rehak, NN and BT Chiang. 1988. Storage of whole blood: effect of temperature on the measured concentration of analytes

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Harper and Row; pp. 417-421; 1058-105953. Jacobs, DS, WR DeMott, PR Finley, RT Horvat, BL Kasten, Jr, and LL Tilzer. 1994. Laboratory Test Handbook, 3rd ed.

Hudson, OH: Lexi-Comp Inc.; pp. 127-128.54. Benet, LZ and RL Williams. 1990. Design and optimization of dosage regimens: pharmacokinetic data. In: AG Gilman,

TW Rall, AS Nies, and P Taylor, eds., Goodman and Gilmans The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8th ed. New

York: McGraw-Hill, Inc.; pp. 1650-1735.55. Moss, DW and AR Henderson. 1994. Enzymes. In: CA Burtis and ER Ashwood, eds., Tietz Textbook of ClinicalChemistry, 2nd ed. Philadelphia: W.B. Saunders Company; pp. 735-896.

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Chemistry Devices, 2nd ed.; Tentative Guideline. NCCLS document EP5-T2. Villanova, PA: NCCLS.

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Leberprofil Plus

Fr dieIn-vitro-Diagnostik und nur fr die professionelle Anwendung

Technischer Kundendienst: +1 800-822-2947 Kein CLIA-Zertifikat erforderlich: AusschlielichLithiumheparin-Vollbut verwenden

Mige Komplexitt: Lithiumheparin-Vollbut,

Oktober 2006 Lithiumheparin-Plasma oder Serum verwendenPN: 400-7060 Rev.: K 1998, Abaxis, Inc., Union City, CA 94587

1. Verwendungszweck

Das Piccolo-Blutchemie-Analysesystem liefert bei Verwendung einer Piccolo-Leberprofil-Plus-Reagenzdisk mit Hilfe vonTrocken- und Flssigreagenzien in vitroquantitative Bestimmungen von Alaninaminotransferase, Albumin, alkalischerPhosphatase, Amylase, Aspartataminotransferase, Gamma-Glutamyltransferase, Gesamtbilirubin und Gesamtprotein inHeparin-Vollblut, Heparin-Plasma oder Serum.

Die Analysen dieses Panels erfordern gem den CLIA-Vorschriften aus dem Jahr 1988 keine CLIA-Zertifizierung.

Modifiziert ein Labor die Anweisungen fr das Analysesystem, gelten die Analysen als Tests hoher Komplexitt undunterliegen allen CLIA-Vorschriften. In nicht von CLIA zugelassenen Labors darf ausschlielich Lithiumheparin-Vollblutanalysiert werden. In gem CLIA fr Analysen mit miger Komplexitt zugelassenen Labors drfen ausschlielichLithiumheparin-Vollblut, Lithiumheparin-Plasma oder Serum verwendet werden.

Mit dem Zertifikat zur Befreiung von den CLIA-Vorschriften knnen Analysen, fr die kein CLIA-Zertifikat bentigt wird,durchgefhrt werden. Der Bescheid ber die Freistellung von der CLIA-Zertifizierung ist bei den Centers for Medicare &Medicaid Services (CMS, USA) erhltlich. Die Commission on Laboratory Accreditation (COLA) ist unter 1-800-981-9883

bei der Beantragung behilflich.

2. Zusammenfassung und Erklrung der Tests

Die Piccolo-Leberprofil-Plus-Reagenzdisk und das Piccolo-Blutchemie-Analysesystem umfassen einInVitro-

Diagnostiksystem fr die Diagnose folgender Erkrankungen durch den Arzt:Alaninaminotransferase: Erkrankungen der Leber, einschlielich Virushepatitis und Zirrhose;

HerzerkrankungenAlbumin: Leber- und NierenerkrankungenAlkalische Phosphatase: Leber-, Knochen-, Nebenschilddrsen- und DarmerkrankungenAmylase: PankreatitisAspartataminotransferase: Erkrankungen der Leber sowie Hepatitis und Virusgelbsucht, SchockGamma-Glutamyltransferase: Erkrankungen der Leber, Alkoholzirrhose, primre und sekundre

LebertumoreGesamtbilirubin: Erkrankungen der Leber; Hepatitis und Verschluss der Gallenblase;

GelbsuchtGesamtprotein: Erkrankungen der Leber, der Niere, des Knochenmarks; Stoffwechsel-

und Ernhrungsstrungen

3. Testprinzipien

Alaninaminotransferase (ALT)Zur Bestimmung von Alaninaminotransferase (ALT) existieren drei unterschiedliche Methoden. Zwei der Methoden diekolorimetrische Dinitro-phenylhydrazin-Kopplungstechnik1,2und der Fluoreszenzenzym-Assay werden nur seltenverwendet.3Die gebruchlichste Methode zur Bestimmung der ALT-Konzentration im Serum basiert auf der Arbeit vonWrblewski und LaDue4. Ein modifiziertes Verfahren nach Wrblewski und LaDue wird von der International Federation ofClinical Chemistry (IFCC) empfohlen.5

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Die zum Gebrauch mit dem Piccolo-Analysesystem entwickelte Methode ist eine Modifizierung des von der IFCCempfohlenen Verfahrens mit einer Reaktion bei hherer Temperatur. In dieser Reaktion katalysiert ALT die Umwandlungeiner Aminogruppe von L-Alanin zu -Ketoglutarat zur Bildung von L-Glutamat und Pyruvat. Laktatdehydrogenase katalysiertdie Umwandlung von Pyruvat zu Laktat. Begleitend wird NADH zu NAD+ oxidiert, wie im folgenden Reaktionsschemadargestellt.

ALTL-Alanin + -Ketoglutarat L-Glutamat + Pyruvat

LDHPyruvat + NADH + H+ Laktat + NAD+

Die Extinktionsnderungsgeschwindigkeit zwischen 340 nm und 405 nm hngt mit der Umwandlung von NADH zu NAD+zusammen und ist direkt proportional zur Menge des in der Probe vorhandenen ALT.

Albumin (ALB)Frhe Methoden zur Messung von Albumin basieren auf Fraktionierungstechniken6, 7, 8 und dem Tryptophangehalt derGlobuline.9, 10Diese Methoden sind schwer zu handhaben und nicht spezifisch. Zwei immunchemische Techniken werden alsReferenzmethoden betrachtet, sind jedoch teuer und zeitaufwendig11. Farbstoffbindungstechniken sind die am hufigstengebrauchten Methoden zur Bestimmung von Albumin. Bromcresolgrn (BCG) ist die am hufigsten verwendeteFarbstoffbindungstechnik, kann jedoch zu einer berschtzung der Albuminkonzentration fhren, insbesondere am unterenEnde des Normalbereichs.12Bromcresolpurpur (BCP) hat unter den verwendeten Farbstoffen die hchste Spezifitt.13, 14

An Albumin gebundenes Bromcresolpurpur (BCP) ndert die Farbe von gelb in blau. Der Extinktionswert ndert sich mit derFarbe.

TensideBCP + Albumin BCP-Albumin-Komplex

Sure-pH

Gebundenes Albumin ist zur Konzentration von Albumin in der Probe proportional. Dies ist eine Endpunktreaktion, die alsExtinktionsdifferenz zwischen 600 nm und 550 nm gemessen ist.

Alkalische Phosphatase (ALP)Messtechniken fr alkalische Phosphatase wurden erstmals vor ber 60 Jahren entwickelt. Mehrere dieser Endpunkt- oderZweipunkt-Spektrophotometrieverfahren15, 16 werden heute als veraltet oder zu umstndlich betrachtet. Die Verwendung von p-

Nitrophenylphosphat (p-NPP) beschleunigt die Reaktion.17, 18Die Zuverlssigkeit dieser Technik wurde durch die Verwendungeines Metallionenpuffers deutlich verbessert, da die Konzentration von Magnesium- und Zinkionen in der Reaktion19nichtverndert wird. Die Referenzmethode20der American Association for Clinical Chemistry (AACC) verwendet p-NPP alsSubstrat und Metallionenpuffer.

Die Piccolo-Methode ist eine modifizierte AACC-20und IFCC-21Methode. Alkalische Phosphatase hydrolysiert p-NPP in einenMetallionenpuffer und bildet p-Nitrophenol und Phosphat.

ALPp-Nitrophenylphosphat p-Nitrophenol +

Zn2+, Mg2+ Phosphat

Die ALP-Konzentration in der Probe verhlt sich proportional zur Anstiegsgeschwindigkeit der Extinktion zwischen 405 nm

und 500 nm.

Amylase (AMY)Etwa 200 verschiedene Tests zur Bestimmung von Amylase wurden entwickelt. Bei den meisten Verfahren wird einegepufferte Polysaccharidlsung eingesetzt, doch bedient man sich unterschiedlicher Detektionstechniken. ViskosimetrischenMethoden mangelt es an Przision und Genauigkeit22, whrend turbidimetrische und iodometrische Methoden schwer zustandardisieren sind.23,24Hufig angewendete Methoden sind saccharogene und chromolytische Verfahren. Klassisch ist dassaccharogene Verfahren25, jedoch schwierig und zeitaufwendig.26Chromolytische Verfahren mit p-Nitrophenylglycosiden alsSubstrat wurden entwickelt.27Diese Verfahren weisen eine hhere Spezifitt fr Pankreas-Amylase als fr Speichel-Amylaseauf und sind leicht zu berwachen.27

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In der Piccolo-Methode reagiert das Substrat 2-Chloro-4-Nitrophenyl--Maltotriosid (CNPG3) mit der -Amylase derPatientenprobe unter Freisetzung von 2-Chloro-p-Nitrophenol (CNP). Dies fhrt zu einer Farbnderung.

-AmylaseCNPG3 CNP + D-Maltotriosid

Die Reaktion wird bi-chromatisch bei 405 nm und 500 nm gemessen. Die durch die Bildung von CNP verursachte nderungder Extinktionsrate ist direkt proportional zur -Amylase-Aktivitt in der Probe.

Aspartataminotransferase(AST)Die Bestimmung von Aspartataminotransferase (AST) basiert auf der durch Bergmeyer29modifizierten Karmen-Rate-Methode28. Die gegenwrtige Referenzmethode der International Federation of Clinical Chemistry (IFCC) setzt die Methodeder Karmen-Bergmeyer-Technik ein, bei der Malatdehydrogenase (MDH) und reduziertes Nicotinamiddinucleotid (NADH)gekoppelt werden, um AST im Serum29, 30zu bestimmen. Laktatdehydrogenase (LDH) wird der Reaktion zugefgt, umInterferenzen durch endogenes Pyruvat zu vermindern.

AST katalysiert die Reaktion von L-Aspartat und -Ketoglutarat in Oxaloacetat und L-Glutamat. Oxaloacetat wird umgesetztzu Malat und NADH wird durch den Katalysator MDH zu NAD+ oxydiert.

ASTL-Aspartat + -Ketoglutarat Oxaloacetat + L-Glutamat

MDHOxaloacetat + NADH Malat + NAD+

Die nderung der Extinktionsrate bei 340 nm/405 nm, hervorgerufen durch die Umwandlung von NADH in NAD+, ist direkt

proportional zur Menge an AST in der Probe.

Gamma-Glutamyltransferase (GGT)Erste quantitative Methoden zur Bestimmung von Gamma-Glutamyltransferase (GGT) nutzten eine zweite Reaktion zurFarbbildung.39,40Die Verwendung von L--Glutamyl-p-Nitroanilid als Substrat machte den Farbbildungsschritt berflssig.41Wegen schlechter Lsbarkeit und geringer Stabilitt von L--Glutamyl-p-Nitroanilid wurde das Verfahren mittels Verwendungdes Substrats L--Glutamyl-3-Carboxy-4-Nitroanilid verndert.42Die von der International Federation of Clinical Chemistry(IFCC) empfohlene Methode zur Bestimmung von GGT basiert auf dem genderten Verfahren mit Glycylglyczin alsSubstrat.43

Abaxis hat die IFCC-Methode fr eine Reaktion bei 37 C modifiziert. Wird Probenmaterial, dasGamma-Glutamyltransferase enthlt, den Substraten L--Glutamyl-3-Carboxy-4-Nitroanilid und Glycylglyzin (gly-gly)zugefgt, werden L--Glutamyl-Glycylglyzin (glu-gly-gly) und 3-Carboxy-4-Nitroanilin gebildet.

GGTL--glutamyl- + Gly-gly-3-Carboxy 4-Nitroanilid Glu-gly-gly + 3-Carboxy-4-Nitroanilin

Die Extinktionsrate wird bei 405 nm gemessen. Die Produktion von 3-Carboxy-4-Nitroanilin ist direkt proportional zur GGT-Aktivitt in der Probe.

Gesamtbilirubin (TBIL)Zur Messung von Gesamtbilirubin werden Tests mit diazotierter Sulfanilsure verwendet.32, 44Neuere, spezifischere Methoden

wurden entwickelt, die das Enzym Bilirubinoxidase nutzen.34, 35, 36Neben dem Vorteil einer spezifischeren Gesamtbilirubin-Testmethode wird am Analysesystem auch der fotochemische Abbau des Analyten minimiert, da die Probe sofort nach derEntnahme getestet werden kann.

In der enzymatischen Reaktion wird Bilirubin durch Bilirubinoxidase zu Biliverdin oxidiert. In der abschlieenden Reaktionverwandelt sich Biliverdin in verschiedene sog. Purpurverbindungen.

BilirubinoxidaseBilirubin + O2 Biliverdin + H2O

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Bilirubin wird quantifiziert als die Differenz der Extinktionsraten zwischen 467 nm und 550 nm. Die erste Messung wird in derBilirubin-Blindkvette, die zweite Messung in der Bilirubin-Testkvette durchgefhrt. Die Menge an Bilirubin in der Probe ist

proportional zur Differenz zwischen Anfangs- und Endabsorptionsmessung.

Gesamtprotein (TP)Die Gesamtprotein-Methode ist eine Modifikation der Biuret-Reaktion, bekannt fr ihre Genauigkeit, Richtigkeit undSpezifitt.45Entwickelt von Riegler46und modifiziert von Weichselbaum47, Doumas, et al.48ist die Biuret-Reaktion alsGesamtprotein-Referenzmethode empfohlen.

In der Biuret-Reaktion wird die Proteinlsung im stark alkalischen Medium mit Kupfer 2-Ionen [Cu(II)] behandelt.Natriumkaliumtartrat und Kaliumiodid werden zugesetzt, um die Przipitation von Kupferhydroxid bzw. die Eigenreduktionvon Kupfer zu verhindern.47Die Cu(II)-Ionen reagieren mit Peptidbrcken zwischen dem Carbonylsauerstoff- undAmidstickstoffatomen und bilden einen farbigen Kupferproteinkomplex.

OH-

Gesamtprotein + Cu(II) Kupferproteinkomplex

Gesamtprotein in der Probe ist direkt proportional zur Extinktionsrate des Kupferproteinkomplexes. Der Gesamtproteintest isteine Endpunktreaktion bei der die Differenz aus den Extinktionsraten der Messungen bei 550 nm und 850 nm bestimmt wird.

4. Prinzipien des Verfahrens

Siehe Handbuch des Piccolo-Blutchemie-Analysesystems.

5. Beschreibung der Reagenzien

ReagenzienEine Piccolo-Leberprofil-Plus-Reagenzdisk enthlt lyophilisierte test-spezifische Reagenz-Beads (Beschreibung siehe unten).Ein lyophilisiertes Blindprobenreagenz (bestehend aus Puffer, Tensiden, Hilfsstoffen und Konservierungsmittel) dient zurBerechnung der Konzentration von Alaninaminotransferase (ALT), Albumin (ALB), alkalischer Phosphatase (ALP), Amylase(AMY), Aspartataminotransferase (AST) und Gamma-Glutamyltransferase (GGT). Besondere Blindproben befinden sich inder Disk fr Gesamtbilirubin (TBIL) und Gesamtprotein (TP). Jede Reagenzdisk enthlt einen Verdnnungspuffer, der ausTensiden, Hilfsstoffen und Konservierungsmitteln besteht.

Tabelle 1: Reagenzien

Komponenten Menge/Disk

Alaninaminotransferase-ReagenzL-Alanin 874 g-Ketoglutarsure 54 g-Nicotinamid-Adenin-Dinucleotid, reduziert (NADH) 7 gLaktatdehydrogenase (LDH)(Staphylococcus epidermidis)

Puffer, Tensid, Hilfsstoffe und Konservierungsmittel0,09 U

Albumin-ReagenzBromcresolpurpur, Natriumsalz

Puffer, Tensid, Hilfsstoffe und Konservierungsmittel

2 g

Reagenz Alkalische PhosphataseMagnesiumchlorid 3 gZinksulfat 3 g

p-NPP, DinatriumsalzPuffer, Tensid, Hilfsstoffe und Konservierungsmittel

56 g

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Tabelle 1 Fortsetzung: Reagenzien

Komponenten Menge/Disk

Amylase-ReagenzCNPG3Puffer, Tensid, Hilfsstoffe und Konservierungsmittel

40 g

Aspartataminotransferase-ReagenzL-Asparaginsure 426 gLaktatdehydrogenase (LDH)(Staphylococcus epidermidis) 0,04 U

-Nicotinamid-Adenin-Dinucleotid, reduziert (NADH) 5 gMalatdehydrogenase (MDH) (Schweineherz) 0,01 U-Ketoglutarsure 28 gPuffer, Tensid, Hilfsstoffe und Konservierungsmittel

Gamma-Glutamyltransferase-ReagenzGlycylglycin 317 gL-Glutaminsure -(3-Carboxy-4-Nitroanilid) 30 gPuffer, Tensid, Hilfsstoffe und Konservierungsmittel

Gesamtbilirubin-ReagenzBeckman-Bilirubinenzym-Reagenz 0,1 UPuffer, Tensid, Hilfsstoffe und Konservierungsmittel

Gesamtbilirubin-BlindprobePuffer, Tensid, Hilfsstoffe und Konservierungsmittel

Gesamtprotein-ReagenzNatriumkaliumtartrat 343 gKupfer(II)-sulfat 134 gKaliumiodid 28 gHilfsstoffe und Konservierungsmittel

Gesamtprotein BlankNatriumkaliumtartrat 343 gKaliumiodid 28 gHilfsstoffe und Konservierungsmittel

Warnungen & Vorsichtsmanahmen Der Verdnnungsbehlter im Reagenzdisk wird automatisch geffnet, wenn die Lade des Gertesystems schliet. Eine

Disk mit einem einmal geffneten Verdnnungsbehlter kann nicht wieder verwendet werden. Vor dem Schlieen derLade sicherstellen, dass die Probe richtig und in vorgegebener Menge in die Disk gefllt worden ist.

Benutzte Reagenzdisks enthalten Krperflssigkeiten, die als potenziell infektis anzusehen sind. Handhabung undEntsorgung mssen den Bestimmungen entsprechen.49Siehe auch die Anweisungen im Handbuch des Piccolo-

Blutchemie-Analysesystems zur Beseitigung von potenziell infektisen Verunreinigungen.

Reagenzdisks bestehen aus Plastikmaterial. Keinebeschdigten oder heruntergefallenen Reagenzdisks einsetzen, da dieMglichkeit besteht, dass potenziell infektises Material austritt und das Gertesystem verunreinigt.

Reagenz-Beads knnen Suren oder tzende Substanzen enthalten. Bei vorschriftsmigem Gebrauch entsteht keinKontakt mit dem Bediener. Kommt es dennoch zum direkten Kontakt (z. B. bei Reinigung und Beseitigung einerzerstrten Reagenzdisk), sind Hautkontakt mit bzw. Inhalieren oder Verschlucken der Reagenz-Beads unbedingt zuvermeiden.

Reagenz-Beads und Verdnnungspuffer enthalten Natriumazid, das mit Abflussleitungen aus Blei und Kupfer reagierenund hochexplosive Metallazide bilden kann. Bei vorschriftsmigem Gebrauch entsteht kein Kontakt mit diesen

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Materialien. Im Fall eines Kontaktes mit Abflussleitungen mit groen Mengen Wasser (H2O) splen, um eine mglicheReaktion zu unterbinden.

LagerungReagenzdisks in ihren versiegelten Beuteln bei 2-8 C lagern. Zur Verwendung einer Reagenzdisk die Disk in ihremversiegelten Folienbeuteln aus dem Khlschrank entnehmen. Disks in versiegelten Beuteln knnen beschrnkte Zeit beiRaumtemperatur aufbewahrt und dann mehrmals zurck in den Khlschrank verbracht werden. Sicherstellen, dass dieGesamtzeit, in der Disks bei Raumtemperatur gelagert werden, 48 Stunden nicht bersteigt. Den Beutel unmittelbar vor

Durchfhrung des Tests ffnen und die Disk entnehmen.Disks nicht direktem Sonnenlicht oder Temperaturen ber 32 C aussetzen. Dies gilt auch fr im Beutel verpackte Disks. EineDisk muss innerhalb von 20 Minuten nach ffnung des Beutels verwendet werden; eine Disk in einem geffneten Beutel kannnicht fr sptere Verwendung zurck in den Khlschrank gelegt werden.

Hinweise auf Reagenzienstabilitt/AlterungDisks nichtverwenden:

Nach Ablauf des Verfallsdatums (Achtung: Verfallsdatum wird im amerikanischen Datumsformat angegeben: MM/TT/JJ).Eine Fehlermeldung des Piccolo-Blutchemie-Analysesystems weist zustzlich darauf hin.

Wenn der Verpackungsbeutel beschdigt ist. Wenn ein Farbniederschlag auf dem Kissen im Beutel zu erkennen ist (Feuchtigkeit).

6. Gert

Siehe Handbuch des Piccolo-Blutchemie-Analysesystems.

7. Probengewinnung und Aufbereitung

Techniken zur Probengewinnung sind im Handbuch des Piccolo-Blutchemie-Analysesystems beschrieben.

Erforderliche Probenmenge ist Minimum ~90 L an Heparin-Vollblut, Heparin-Plasma, Serum oder Serumkontrolle. DieProbenkammer in der Reagenzdisk kann bis zu 120 L Probe aufnehmen.

Kapillarproben mssen sofortnach Gewinnung eingefllt werden.

Vollblutproben aus venser Abnahme mssen vor dem Einfllen homogen sein. Das Probengef vor dem Einfllenvorsichtig schwenken. Starkes Schwenken oder Schtteln kann zu Hmolyse fhren.

Vollblutproben mssen innerhalb von 60 Minuten analysiert werden.50Khlung einer Vollblutprobe kann zu einersignifikanten Vernderung der Konzentrationen von Aspartataminotransferase fhren.51Falls keine Mglichkeit besteht,die Probe innerhalb 60 Minuten zu analysieren, sollte diese in Serum oder Plasma separiert und in geschlossenenProbengefen bei 2-8 C aufbewahrt werden.

Gesamtbilirubinwird photochemisch abgebaut. Vollblutproben, die nicht sofort abgebaut werden, sollten fr maximal 60Minuten dunkel gelagert werden. Proben, die nicht in dieser Zeit analysiert werden knnen, sollten in Plasma oder Serumsepariert werden und dunkel bei niedrigen Temperaturen aufbewahrt werden.52

Bekannte Strsubstanzen Das einzige fr das Piccolo-Testprotokoll empfohlene Antikoagulans ist Lithiumheparin. Abaxis hat Studien durchgefhrt,

die belegen, dass EDTA, Fluorid, Oxalat oder ein anderer beliebiger Gerinnungshemmer mit Ammonium-Ionen zuStrungen bei mindestens einer Substanz in der Reagenzdisk fhrt.

Amylasewird von unterschiedlichen Drsen und dem Pankreas ausgeschieden. Lediglich Pankreas-Amylase ist vonklinischer Bedeutung.53Verunreinigung einer Probe mit Amylase anderer Herkunft verursacht knstlich erhhteErgebnisse. Kapillarproben sind fr Verunreinigung anflliger als vense Proben. Wenn Amylase-Ergebnisse von einerKapillarprobe nicht mit dem klinischen Bild des Patienten bereinstimmen, den Test mit Hilfe einer vensen Probewiederholen.

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Strungen von Gesamtproteinwerden beobachtet bei Proben mit Triglyzeridkonzentration >400 mg/dL. Diese knnenerhhte Gesamtproteinspiegel aufweisen. Das Piccolo-Blutchemie-Analysesystem gibt keine Ergebnisse aus, dieStrungen >10 % durch Lipmie aufweisen. LIP wird an Stelle eines Wertes ausgedruckt.

8. Vorgehensweise

Bentigte MaterialienSiehe Handbuch des Piccolo-Blutchemie-Analysesystems fr zustzliche fr die Durchfhrung empfohlene Materialien.

Eine Piccolo Leberprofil Plus Reagenzdisk Art.-Nr.: 400-1003 (ein Karton mit Disks, Art.-Nr.: 400-0003)

Bentigte Materialien, die nicht zum Lieferumfang gehren Piccolo-Blutchemie-Analysesystem Probentransferpipetten (Fixvolumen ca. 100 L) und Spitzen werden mit jedem Piccolo-Blutchemie-Analysesystem

geliefert und knnen bei Abaxis nachbestellt werden. Von Abaxis empfohlene, im Handel erhltliche Kontrollreagenzien (zugelassene Kontrollmaterialien und Erwartungswerte

erfragen Sie bitte beim technischen Kundendienst von Abaxis) Zeitgeber

TestparameterDasPiccolo-Blutchemie-Analysesystem arbeitet bei Umgebungstemperaturen zwischen 15 C und 32 C . Die Analysezeit fr

jede Piccolo Reagenzdisk betrgt weniger als 13 Minuten. Die Temperatur innerhalb des Gertesystems betrgt whrend dergesamten Messung 37 C.

TestverfahrenProbengewinnung sowie die einzelnen Schritte zur Durchfhrung einer Bestimmung sind im Handbuch des Piccolo-Blutchemie-Analysesystems genau beschrieben.

QualittskontrolleEine Vielzahl von Qualittskontrollparametern (siehe Handbuch) wird whrend jeden Laufs automatisch berprft. Abaxisversichert die Richtigkeit der im Barcode beinhaltenden Kalibrationsfaktoren. Die Kalibrationsfaktoren knnen jedoch vomBenutzer ber zustzliche Qualittskontrollen berprft werden, z. B. mit Kontrollproben wie Qualittskontrollmaterialien aufSerumbasis.

Die Leistung des Piccolo-Blutchemie-Analysesystems kann durch die Analyse von Kontrollen berprft werden. Fr eine Listezugelassener Qualittskontrollmaterialien und der zulssigen Bereiche wenden Sie sich bitte an den technischen Kundendienstvon Abaxis.

Siehe Handbuch des Piccolo-Blutchemie-Analysesystems zur weiteren Betrachtung zur Durchfhrung von Kontrollen undInterpretation.

KalibrierungDas Piccolo-Blutchemie-Analysesystem wurde bei der Herstellung kalibriert und mit allen Faktoren programmiert. MittelsBarcode auf dem Barcodering der Reagenzdisk werden dem Piccolo-Blutchemie-Analysesystem die diskspezifischenKalibrationsdaten mitgeteilt. Siehe auch Handbuch des Piccolo-Blutchemie-Analysesystems.

9. Ergebnisse

Das Piccolo-Blutchemie-Analysesystem berechnet und druckt die verschiedenen Parameterkonzentrationen in der Probeautomatisch. Weitere Informationen zur Endpunkt und Ratenreaktionsberechnung finden sich im Handbuch des Piccolo-Blutchemie-Analysesystems. Die Interpretation der Ergebnisse ist im Handbuch beschrieben. Ergebnisse werden aufErgebniskarten ausgedruckt, die Abaxis mit den Reagenzdisks liefert. Die Ergebniskarten sind zum Einkleben in diePatientenakte auf der Rckseite mit Klebstoff beschichtet. Zustzliche Karten sind auf Anfrage verfgbar.

Alle Reaktion werden bei 37 C gemessen.

10. Grenzen des Verfahrens

Allgemeine Grenzen des Verfahren werden im Handbuch des Piccolo-Blutchemie-Analysesystems beschrieben.

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Das einzige zur Verwendung mit dem Piccolo-Blutchemie-Analysesystem empfohleneAntikoagulans ist

Lithiumheparin. Kein Natriumheparin verwenden.

Bei Albuminbestimmungist eine Vollblut- oder Serumprobe der kapillaren Abnahme vorzuziehen. Im Gegensatz zuvenser Abnahme kann kapillare Abnahme zu erhhter Zellschdigung fhren.

Proben mit einem Hmatokritwert von mehr als 62-65 % Erythrozytenvolumen knnen zu ungenauen Ergebnissen fhren.

Proben mit hohem Hmatokrit knnen als hmolysiert im Ausdruck erscheinen. Diese Proben knnen zum Erhalt vonPlasma zentrifugiert und dann in einer neuen Reagenzdisk erneut getestet werden.

Amylasewird von unterschiedlichen Drsen und dem Pankreas ausgeschieden. Lediglich Pankreas-Amylase ist vonklinischer Bedeutung.53Verunreinigung einer Probe mit Amylase anderer Herkunft verursacht knstlich erhhteErgebnisse. Kapillarproben sind fr Verunreinigung anflliger als vense Proben. Wenn Amylase-Ergebnisse von einerKapillarprobe nicht mit dem klinischen Bild des Patienten bereinstimmen, den Test mit einer vensen Probe wiederholen.

Alle den Assaybereich berschreitenden Analyseergebnisse sollten mit einem anderen zugelassenen Testverfahrenanalysiert oder an ein Referenzlabor geschickt werden. Die Probe nicht verdnnen und erneut im Piccolo-Blutchemie-Analysesystem testen.

Achtung: Umfassende Prfungen des Piccolo-Blutchemie-Analysesystems haben ergeben, dass in sehr seltenen Fllen

eine in die Reagenzdisk gegebene Probe nicht problemlos in die Probenkammer rinnt. Daher wirdmglicherweise nur eine unzureichende Probenmenge analysiert und einige Ergebnisse knnen auerhalb desReferenzbereichs liegen. Die Probe kann mit einer neuen Reagenzdisk nochmals getestet werden.

StrsubstanzenEs wurden Substanzen als mgliche Strsubstanzen mit den Analyten getestet. Humanserum-Pools wurden hergestellt. DieKonzentration, bei der die mglichen Strsubstanzen jeweils getestet wurden, basiert auf den Testkonzentrationen nach

NCCLS EP7-A.15

Auswirkungen endogener Substanzen Physiologische Strsubstanzen (Hmolyse, Ikterus und Lipmie) verursachen Vernderungen in den ausgegebenen

Konzentrationen mancher Analyten. Die Probenindizes werden unten auf jeder Ergebniskarte ausgedruckt, damit derBediener wei, in welcher Konzentration die Strsubstanzen in den einzelnen Proben auftreten.

Das Piccolo-Blutchemie-Analysesystem unterdrckt alle Ergebnisse, die auf Grund von Hmolyse, Lipmie oder IkterusStrungen von mehr als 10 % aufweisen. In solchen Fllen wird auf der Ergebniskarte an Stelle des Ergebnisses HEM(Hmolyse), LIP (Lipmie) oder ICT (Ikterus) ausgedruckt.

Angaben zu den maximalen Konzentrationen endogener Substanzen erhalten Sie beim technischen Kundendienst vonAbaxis.

Des Weiteren haben Laktat bei 230 mg/dL und Laktatdehydrogenase bei 10.000 U/L nachgewiesenermaen keineAuswirkungen auf die mit dieser Disk durchgefhrten Analysen.

Auswirkungen therapeutischer Substanzen

Die im Folgenden aufgefhrten Substanzen zeigen keine signifikante Strung der Chemie in der Piccolo-Reagenzdisk.Signifikante Strung ist definiert als >10% Vernderung der Ergebnisse bei einer Probe im Normalbereich. Humanserum-Pools wurden mit bekannten Konzentrationen der Substanzen versetzt und anschlieend gemessen.

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Therapeutische oder exogene Konzentration ohne Physiologische oderSubstanzen signifikante Interferenzen therapeutische Werte54-57

(mg/dL) (mg/dL)

Acetaminophen 100 12Acetylsalicylsure 50 210Chloramphenicol 100 12,5

Cimetidin 16 0,11Dextran 300 6001800Erythromycin 10 0,22,0Hydrochlorothiazid 7,5 Isoniazid 4 0,10,7Ketoprofen 50 Lidokain 1 0,150,6Methicillin 100 Methotrexat 0,5 0,1Metronidazol 5 0,1

Nafcillin 1 Oxacillin 1 Phenytoin 3 12Rifampin 0,5 0,43Salicylsure 25 1530

Die folgenden Substanzen zeigten Interferenzen grer als 10 %. Signifikante Interferenz ist definiert als >10 % Vernderungim Ergebnis bei Normalwerten. Humanserum-Pools wurden mit bekannten Konzentrationen der Medikamente oderChemikalien ergnzt und dann analysiert.

Konzentration ohne Physiologische odersignifikante Interferenzen therapeutische Werte54-57

(mg/dL) (mg/dL) Interferenz

Alaninaminotransferase (ALT)Ascorbinsure 20 0,81,2 11 % inc*Oxaloacetat 132 843 % inc

Albumin (ALB)Acetoacetat 102 0,053,60 18 % dec*Ampicillin 30 0,5 12 % decKoffein 10 0,31,5 14 % decKalziumchlorid 20 17 % decCephalothin (Keflin) 400 10 13 % incIbuprofen 50 0,54,2 28 % inc-Ketoglutarat 5 11 % dec

Nitrofurantoin 20 0,2 13 % decProlin 4 12 % incSulfalazin 10 24 14 % decSulfanilamid 50 1015 12 % decTheophyllin 20 12 11 % dec

Alkalische Phosphatase (ALP)Theophyllin 20 12 42 % dec

Gesamtbilirubin9(TBIL)Dopamin 19 55 % decL-dopa 5 17 % dec

* inc = Erhhung; dec = Erniedrigung.

Zustzliche Information ber potentielle chemische Interferenzen, siehe Literaturverzeichnis.

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11. Erwartete Werte

Zur Bestimmung der Referenzwerte von Alaninaminotransferase, Albumin, alkalischer Phosphatase, Amylase, Gesamtbilirubinund Gesamtprotein wurden 193 Proben von mnnlichen und weiblichen Erwachsenen mit dem Piccolo-Blutchemie-Analysesystem analysiert. 186 Proben von mnnlichen und weiblichen Erwachsenen wurden zur Bestimmung derReferenzwerte von Aspartataminotransferase mit dem Piccolo-Blutchemie-Analysesystem analysiert. 131 Proben von

mnnlichen und weiblichen Erwachsenen wurden zur Bestimmung der Referenzwerte von Gamma-Glutamyltransferase mitdem Piccolo-Blutchemie-Analysesystem analysiert.

Diese Bereiche werden nur als eine Richtlinie genannt. Wir empfehlen, dass Ihr Labor oder Ihre Institution eigeneNormalwerte fr Ihre besondere Population ermittelt.

Tabelle 2: Piccolo-Referenzwerte

Analyte ReferenzwerteKonv. Einheiten SI Einheiten

Alaninaminotransferase (ALT) 1047 U/L 1047 U/LAlbumin (ALB) 3,35,5 g/dL 3355 g/LAlkalische Phosphatase (ALP), Mann 53128 U/L 53128 U/L

Alkalische Phosphatase (ALP), Frau 42141 U/L 42141 U/LAmylase (AMY) 1497 U/L 1497 U/LAspartataminotransferase (AST) 1138 U/L 1138 U/LGamma-Glutamyltransferase (GGT) 565 U/L 565 U/LGesamtbilirubin (TBIL) 0,21,6 mg/dL 3,427,4 mol/LGesamtprotein (TP) 6,48,1 g/dL 6481 g/L

Amylasewird von unterschiedlichen Drsen und dem Pankreas ausgeschieden. Lediglich Pankreas-Amylase ist von klinischerBedeutung.53Verunreinigung einer Probe mit Amylase anderer Herkunft verursacht knstlich erhhte Ergebnisse.Kapillarproben sind fr Verunreinigung anflliger als vense Proben. Wenn Amylase-Ergebnisse von einer Kapillarprobe nichtmit dem klinischen Bild des Patienten bereinstimmen, den Test mit einer vensen Probe wiederholen.

12. LeistungsmerkmaleLinearittBei richtiger Benutzung des Piccolo-Blutchemie-Analysesystems ist der Reaktionsverlauf folgender Analyte linear ber dengenannten dynamischen Bereich

Tabelle 3: Piccolo dynamische Bereiche

Analyte Dynamische BereicheKonv. Einheiten SI Einheiten

Alaninaminotransferase (ALT) 52000 U/L 52000 U/LAlbumin (ALB) 16,5 g/dL 1065 g/LAlkalische Phosphatase (ALP) 52400 U/L 52400 U/L

Amylase (AMY) 54000 U/L 54000 U/LAspartataminotransferase (AST) 52000 U/L 52000 U/LGamma-Glutamyltransferase (GGT) 53000 U/L 53000 U/LGesamtbilirubin(TBIL) 0,130 mg/dL 1,7513 mol/LGesamtprotein (TP) 214 g/dL 20140 g/L

Wenn die Analytkonzentration ber dem Messbereich (dynamischen Bereich) aber unter dem Systembereich liegt, wird auf derErgebniskarte an der oberen Grenze das Zeichen > und nach dem Zahlenwert ein Stern eingesetzt. Beispiel: ALT >2000*U/L. Liegt das Ergebnis unterhalb des dynamischen Bereichs, wird das Zeichen


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wiederholt werden. Wenn auch fr die zweite Probe kein Ergebnis gedruckt wird, bitte den technischen Kundendienst vonAbaxis kontaktieren.

SpezifittDie unteren Grenzen bei der Bestimmung der Analyte sind: Alaninaminotransferase 10 U/L; Albumin 1 g/dL (10 g/L);Alkalische Phosphatase 5 U/L; Amylase 5 U/L; Aspartataminotransferase 5 U/L; Gamma-Glutamyltransferase 5 U/L;Gesamtbilirubin 0,1 mg/dL (1,7 mol/L); Gesamtprotein 2 g/dL (20 g/L).

PrzisionPrzisionsstudien wurden gem den Bestimmungen NCCLS EP5-T2 durchgefhrt.60Przision whrend der Analyse undGesamtprzision wurden mittels Kontrollmaterial Level 1 und Level 2 bestimmt.

Tabelle 4: Przision (N=80)

Analyte Whrend Analyse GesamtAlaninaminotranferase (U/L)Kontrolle Level 1

Mittelwert 21 21SD 2,76 2,79%CV 13,4 13,5

Kontrolle Level 2

Mittelwert 52 52SD 2,70 3,25%CV 5,2 6,2

Albumin(g/dL)Kontrolle Level 1

Mittelwert 5,6 5,6SD 0,09 0,11%CV 1,7 2,1

Kontrolle Level 2Mittelwert 3,7 3,7SD 0,07 0,11%CV 2,0 2,9

Alkalische Phosphatase (U/L)Kontrolle Level 1

Mittelwert 39 39SD 1,81 2,29%CV 4,6 5,8

Kontrolle Level 2Mittelwert 281 281SD 4,08 8,75%CV 1,5 3,1

Amylase(U/L)Kontrolle Level 1

Mittelwert 46 46SD 2,40 2,63%CV 5,2 5,7


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Tabelle 4 Fortsetzung: Przision (N=80)

Analyte Whrend Analyse GesamtAspartataminotransferase (U/L)Kontrolle Level 1

Mittelwert 47 49SD 0,98 0,92%CV 2,07 1,88


Gamma- Glutamyltransferase (U/L)Kontrolle Level 1

Mittelwert 25 25SD 0,59 0,74%CV 2,34 2,94


Gesamtbilirubin(mg/dL)Kontrolle Level 1

Mittelwert 0,8 0,8SD 0,06 0,07%CV 8,0 9,3


Gesamtprotein(g/dL)



KorrelationHeparin-Vollblut- und Serumproben wurden an zwei unterschiedlichen Stellen gewonnen. Die Vollblutproben wurden vor Ortmit dem Piccolo-Blutchemie-Analysesystem gemessen und die Serumproben wurden mit einem Piccolo-Blutchemie-

Analysesystem sowie der Vergleichsmethode analysiert. Um den gesamten dynamischen Bereich abzudecken, wurden ineinigen Fllen Proben mit hohen und niedrigen Konzentrationen ergnzt. Alle Proben wurden am selben Tag inEinzelbestimmung bestimmt. Reprsentative Korrelationsstatistiken in Tabelle 5.

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Tabelle 5: Korrelation des Piccolo-Blutchemie-Analysesystems mit Vergleichsmethoden

VollblutLabor 1 Labor 2

Alaninaminotransferase (U/L)Korrelation 0,98 0,99Steigung 0,91 0,94

Schnittpunkt 1,3 -2,5SEE 3,21 2,84

N 86 67Probenbereich 10174 10174Vergleichsmethode Paramax Technicon

Albumin (g/dL)Korrelation 0,85 0,90Steigung 1,0 0,88Schnittpunkt -0,3 -0,1SEE 0,22 0,21

N 261 100

Probenbereich 1,15,3 1,55,0Vergleichsmethode Paramax BeckmanAlkalische Phosphatase(U/L)

Korrelation 0,99 0,93Steigung 0,97 1,14Schnittpunkt -5,9 -17,6SEE 3,97 4,79


Amylase(U/L)Korrelation 0,98 0,96

Steigung 0,69 1,07Schnittpunkt -4,7 -4,1SEE 3,11 3,47


Aspartataminotransferase(U/L) 0,93 1,0Korrelation 0,87 0,97Steigung 5,3 3,0Schnittpunkt 2,76 1,90SEE 159 46

N 13111 13252Probenbereich Paramax DAXVergleichsmethode

Gamma-Glutamyltransferase(U/L)Korrelation 1,0 1,0*Steigung 0,98 1,60*Schnittpunkt -0,4 3,1*SEE 3,29 18,57*

N 135 49Probenbereich 5312 271848Vergleichsmethode Paramax Beckman

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Tabelle 5 Fortsetzung: Korrelation des Piccolo-Blutchemie-Analysesystems mit Vergleichsmethoden

VollblutLabor 1 Labor 2

Gesamtbilirubin(mg/dL)Korrelation 0,97 0,98Steigung 0,90 1,11Schnittpunkt 0,0 -0,4SEE 0,07 0,09

N 250 91Probenbereich 0,23,7 0,16,4Vergleichsmethode Paramax Beckman

Gesamtprotein(g/dL)Korrelation 0,85 0,87Steigung 0,93 0,94Schnittpunkt 0,6 0,3SEE 0,19 0,16

N 251 92Probenbereich 5,79,2 6,59,2

Vergleichsmethode Paramax

Beckman

*Labor 2: nur Serumproben am Piccolo-Blutchemie-Analysesystem bei Korrelation GGT.

Ergebnisse der Studie mit ungeschulten BenutzernBei einer Studie mit ungeschulten Benutzern wurde den Teilnehmern nur die Gebrauchsanweisung zur Verfgung gestelltund ihnen die Aufgabe gestellt, 3 Disks mit randomisierten Blindproben zu analysieren. Die Proben bestanden aus Serumpools,die mit jeweils drei Konzentrationen von jedem der acht Analyten (ALT, Albumin, ALP, AMY, AST, GGT, Gesambilirubinund Gesamtprotein) prpariert waren. Die Teilnehmer erhielten keinerlei Schulung fr die Durchfhrung der Analyse.Insgesamt nahmen ca. 60 Teilnehmer von 3 verschiedenen Orten und mit unterschiedlichem Hintergrund (Ausbildung, Alter,Geschlecht etc.) an der Studie teil.

Die unten stehenden Tabellen zeigen eine Zusammenfassung der Leistung fr jedes Analyt.

Alaninaminotransferase (ALT)Konzentration 1 Konzentration 2 Konzentration 3

N 62 62 62Mittelwert 45,4 U/L 98,9 U/L 184,3 U/L

% VK 3,7 % 1,7 % 1,5 %Ermittelter Bereich 4253 96103 175191

Prozentsatz derErgebnisse

innerhalb desBereichs

15,0 %*

98,4 %61/62

95 %-VI: 91,3 % bis100 %

100 %62/62

95 %-VI: 94,2 % bis100 %

100 %62/62

95 %-VI: 94,2 % bis100 %

* Dieser Prozentsatz basiert auf der Annahme, dass bei Fehlerausmaen von mehr als einem Viertel des Normalbereichs nichtkorrekt zwischen normalen und abnormalen Werten unterschieden werden kann. Der bercksichtigte Messbereich war 10 U/L47 U/L.

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AlbuminKonzentration 1 Konzentration 2 Konzentration 3

N 62 62 62Mittelwert 3,0 g/dL 3,5 g/dL 4,2 g/dL

% VK 2,7 % 2,5 % 1,8 %Ermittelter Bereich 2,93,2 3,33,7 4,04,4


innerhalb desBereichs 12,5 %

100 %62/62

95 %-VI: 94,2 % bis100 %

100 %62/62

95 %-VI: 94,2 % bis100 %

100 %62/62

95 %-VI: 94,2 % bis100 %

Alkalische Phosphatase (ALP)Konzentration 1 Konzentration 2 Konzentration 3




innerhalb des

Bereichs 15,0 %

100 %62/62

95 %-VI: 94,2 % bis

100 %

100 %62/62

95 %-VI: 94,2 % bis

100 %

100 %62/62

95 %-VI: 94,2 % bis

100 %

Amylase (AMY)Konzentration 1 Konzentration 2 Konzentration 3




innerhalb desBereichs

15,0 %

100 %62/62

95 %-VI: 94,2 % bis100 %

100 %62/62

95 %-VI: 94,2 % bis100 %

100 %62/62

95 %-VI: 94,2 % bis100 %

Aspartataminotransferase (AST)Konzentration 1 Konzentration 2 Konzentration 3

N 62 62 62Mittelwert 56,0 120,4 276,3



innerhalb desBereichs 15;0 %

100 %62/62

95 %-VI: 94,2 % bis100 %

100 %62/62

95 %-VI: 94,2 % bis100 %

100 %62/62

95 %-VI: 94,2 % bis100 %

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Gamma-Glutamyltransferase (GGT)

Konzentration 1 Konzentration 2 Konzentration 3N 62 62 62

Mittelwert 35,0 U/L 86,2 U/L 131,3 U/L% VK 2,8 % 1,5 % 1,5 %

Ermittelter Bereich 3338 8390 123135Prozentsatz der

Ergebnisseinnerhalb desBereichs 15,0 %

100 %

62/6295 %-VI: 94,2 % bis100 %

100 %

62/6295 %-VI: 94,2 % bis100 %

100 %

62/6295 %-VI: 94,2 % bis100 %

Gesamtbilirubin (TBIL)Konzentration 1 Konzentration 2 Konzentration 3

N 62 62 62Mittelwert 0,86 mg/dL 2,5 mg/dL 5,7 mg/dL



innerhalb desBereichs 15,0 %

100 %62/62

95 %-VI: 94,2 % bis100 %

100 %62/62

95 %-VI: 94,2 % bis100 %

100 %62/62

95 %-VI: 94,2 % bis100 %

Gesamtprotein (TP)Konzentration 1 Konzentration 2 Konzentration 3

N 62 62 62Mittelwert 4,8 g/dL 5,7 g/dL 7,1 g/dL



innerhalb des

Bereichs 5,9 %

98,4 %61/62

95 %-VI: 91,3 % bis

100 %

100 %62/62

95 %-VI: 94,2 % bis

100 %

100 %62/62

95 %-VI: 94,2 % bis

100 %

13. Literaturverzeichnis

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13. Literaturverzeichnis (Fortsetzung)

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